电刺激小脑顶核改善头痛、健忘症状与脑血流量分析

目的：通过应用脑神经促通仪对慢性脑缺血的治疗，观察临床症状改善和经颅多普勒超声(TCD)改善的情况。方法：应用成都迪康医用数字设备公司生产的D／NSJ—I脑神经促通仪进行治疗，据病情选择不同的处方，45min／次，10次为1个疗程。应用TCD监测治疗前后血流速度。结果：治疗后临床症状明显改善，头痛由89％降至13％、头晕由96%降至15％、失眠由60％降至9％、健忘由28％降至9％。治疗前后血流速度的改善有非常显著的差异，单个患者最高血流速度增加67．6％。结论：脑神经促通仪对表现头痛、头晕、失眠、记忆力减退的脑缺血、脑损伤患者，通过改善脑供血，可以起到良好的治疗作用。     

雾水葛化学成分研究

目的:分离鉴定雾水葛全草的化学成分。方法:运用多种色谱进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果:从雾水葛全草中分离出14个化合物,分别鉴定为:β-谷甾醇(1)、胡萝卜苷(2)、齐墩果酸(3)、(-)表儿茶素(4)、α-香树脂醇(5)、丁香基-β-芸香糖苷(6)、2α,3α,19α-三羟基-12-烯-28-乌苏酸(7)、东莨菪苷(8)、黄芩素-7-O-α-L-鼠李糖苷(9)、东莨菪素(10)、槲皮素(11)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(12)、洋芹素(13)、2α-羟基乌苏酸(14)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。     

老年骨质疏松性肱骨近端骨折的临床治疗及效果观察

目的探讨锁定钢板联合抗骨质疏松药物治疗老年骨质疏松性肱骨近端骨折的临床效果。方法 2012年9月—2015年12月我院选取了骨质疏松性肱骨近端骨折的老年患者50例开展研究分析,把患者分组为对照组和试验组,均有25例,对照组患者接受锁定钢板治疗,试验组接受锁定钢板和抗骨质疏松联合治疗,对两组的临床治疗效果进行比较分析。结果试验组患者的治疗优良率是88.0%,平均骨折愈合时间(95.20±2.96)d;对照组的治疗优良率是64.0%,平均骨折愈合时间(117.63±2.91)d,两组的治疗优良率和骨折愈合时间差异有统计学意义(P0.05)。结论锁定钢板、抗骨质疏松药物联合治疗老年骨质疏松性肱骨近端骨折的效果比较优秀,能够预防并发症,促进患者的康复,患者平均愈合时间和愈合优良率均比较理想。     

反转录病毒介导的Luciferase基因稳定转染细胞株的建立及其生物发光成像检测

目的 建立反转录病毒介导的Luciferase基因(Luc2)稳定转染的细胞株,通过体内及体外实验探讨Luc2阳性细胞数与生物发光成像系统光通量之间的关系.方法 采用分子克隆方法构建pMX-Luc2质粒,将其与pMD.G质粒共转染293T gag-pol细胞,获得表达Luc2的反转录病毒.将该反转录病毒感染小鼠结肠癌CT26、人小细胞肺癌NCI-H446、人结肠癌HT-29、人卵巢癌SKOV3、人肝癌sMMC-7721细胞系,建立并筛选Luc2阳性表达的细胞株.分别接种10～1×104个SKOV3-Luc2细胞于培养皿中,在4只裸鼠背侧皮下16个位点分别接种200μl不同浓度(1×107、5×106、2.5×106、1 × 106、5×105、2.5 × 10s、1×105、5 × 104/ml)的SKOV3-Luc2细胞,在另外4只裸鼠尾静脉中分别注射1 ×106和3×106个SKOV3-Luc2细胞.采用生物发光成像系统检测体外、体内接种细胞的光通量值.结果 成功获得表达Luc2的反转录病毒,感染肿瘤细胞系CT26、NCI-H446、HT-29、SKOV3、SMMC-7721,筛选阳性细胞株,均可稳定表达Luc2.体外生物发光成像系统检测结果表明,光通量值与培养皿中接种的细胞数之间存在显著的线性关系(R2=0.944,β=0.972,P＜0.01);活体检测结果表明,光通量值与裸鼠尾静脉注射和皮下接种的细胞数之间均存在显著的线性关系(R2=0.991,β=0.996,P＜0.01; R2=0.351,β=0.628,P＜0.01).结论 采用表达Luc2的反转录病毒感染肿瘤细胞系是快速建立Luc2阳性细胞株的一种可行方法.Luc2阳性细胞数与生物发光成像系统中光通量值具有显著的线性关系.     

基因沉默MTA1对宫颈癌细胞生物学效应的影响

目的:探讨基因沉默MTA1对宫颈癌CaSki细胞株生物学效应的影响。方法:构建针对MTA1基因的siRNA,体外转染人宫颈癌CaSki细胞株,通过RT-PCR检测其对CaSki细胞MTA1 mRNA表达的影响,并检测转染前后细胞增殖、生长及细胞周期改变情况。结果:瞬时转染MTA1-siRNA入CaSki细胞,可见细胞中MTA1 mRNA表达降低,转染后细胞生长减慢,克隆形成及划痕愈合能力下降,但对细胞周期的改变不明显。随着干扰浓度的增加,时间的延长,siRNA对MTA1 mRNA表达的抑制作用逐渐增强。结论:基因沉默MTA1能使宫颈癌细胞生长减慢,细胞迁移能力下降,一定程度上逆转了宫颈癌细胞的恶性表型。     

人类脂肪来源成体干细胞体外定向成软骨的诱导实验

目的 评价人类脂肪来源成体干细胞(hADASc)体外培养转基因定向成软骨诱导的可行性.方法 hADASc体外培养后行PGL3.转化生长因子β1(TGF-β1)基因转染并鉴定,检测转染细胞Lueiferase活性相对光读数(RLU),再行反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测和抗Ⅱ型胶原免疫组织化学染色(实验组:转染的hADASc,同比对照组:加入软骨细胞定向诱导培养基的未转染hADASc;阴性对照组:未转染的hADASc),自动图像分析系统分析免疫染色图片并计算阳性颗粒(PU)值.结果 人类皮下脂肪体外分离培养出具有干细胞特征的有核组织细胞.hADASc转染后,实验组测得RLU值(9 212.583±315.240)高于阴性对照组(317.000±20.710,P＜0.01).RT-PCR结果显示转染的hADASc表达TGF-β1;免疫染色结果显示,实验组与同比对照组呈阳性反应,且两组PU值(13.864±2.416,13.637±2.548)均与阴性对照组的PU值差异有统计学意义(6.013±0.827,P＜0.05).结论 人类皮下脂肪体外分离培养出具有干细胞特征的有核组织细胞.PGL3-TGF-β1基因转染的hADASc可表达TGF-β1.内源性TGF-β1可诱导hADASc分泌Ⅱ型胶原蛋白,与外源性TGF-β1作用相类似.     

卡介苗多糖核酸通过抑制支气管哮喘小鼠核因子κB影响支气管肺泡灌洗液中细胞因子水平的研究

目的 观察卡介苗多糖核酸(BCG-PSN)对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠Th1/Th2型免疫反应的调节作用,探讨核因子κB(NF-κB)与细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白介素4(IL-4)、IL-5的关系及BCG-PSN的调节作用.方法 35只小鼠随机分为对照组、卵白蛋白(OVA)组、BCG-PSN 6周龄组、BCG-PSN 6周龄+OVA组、BCG-PSN 1周龄+OVA组.所有动物于第40天和第41天雾化吸入OVA进行气道激发,第42天行支气管肺泡灌洗;取支气管、肺组织标本.用ELISA方法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中INF-γ、IL-4、IL-5的水平,用免疫组织化学染色方法检测支气管、肺组织NF-κB的表达.结果 OVA致敏后BALF中IL-4、IL-5的水平及支气管、肺组织中NF-κB的表达明显增加,且NF-κB的表达与IL-4、IL-5的水平呈正相关;BCG-PSN免疫后IL-4、IL-5的水平及NF-κB的表达下降,BCG-PSN 1周龄+OVA组IFN-γ的水平有显著升高.结论 NF-κB对IL-4、IL-5具有上调作用,BCG-PSN免疫可提高BCG-PSN 1周龄鼠IFN-γ水平.     

大黄配合西药治疗有机磷农药中毒65例

目的:观察生大黄配合西药治疗经口有机磷农药中毒的疗效。方法:将65例经口有机磷农药中毒患者分为治疗组和对照组。在基本治疗基础上,治疗组配合生大黄治疗,对照组配合20%甘露醇加活性炭治疗。结果:治疗组治愈率及住院天数明显优于对照组,阿托品中毒发生减少,无一例发生反跳。结论:大黄在促进胃肠蠕动、防止残留农药再吸收确有效果。     

食管鳞癌细胞系核苷酸还原酶亚单位M1的表达水平与细胞对吉西他滨敏感性的关系

Objective Ribanucleotide reduetase subunit M1(RRM1)is the intraeellular target of gemeitabine(GEM).The aim of this study is to explore the relationship between the level of RRMI expression and the sensitivity to GEM in the esophageal squamous cell carcinoma cell lines.Methods Four esophageal sqaamous cell carcinoma cell lines(Kyse-150,Kyse-450,9706 and Eca-109)were cultured in vitro.In the same period,RRM1 expression level was measured by RT-PCR and Western blot,and cell sensitivity to GEM was determined by CCK-8 assay.The relation between cell sensitivity and RRM1 expression was further analyzed.Kyse-450 cells were continuously cultured in the medium containing 50 nM GEM.RRM1 expression was measured at different time points to monitor the dynamic changes in the surviving cells.Inhibition of RRM1 expression by RNAi method was applied and the effect on GEMsensitivity was further examined.Results The IC50 of Eca-109,Kyse-150,Kyse-450 and 9706 cells were (0.92±0.17),(0.48±0.11),(0.29±0.06)and(0.02±0.01)mmol/L,respectively.The expressions of RRMI protein and mRNA of Eea-109 cell line were the highest detected by Western blot and RT-PCR,followed by Kyse-150 and Kyse-450,and the lowest one was 9706 cell line.When Kyse-450 cells were continuously treated with 50 nmol/L GEM,the level of RRM1 protein was increasing in the surviving cells.RRM1 siRNA could effeetively knock down the expression of RRM1 and significantly increase the cell sensitivity to GEM(P = 0.035).Conclusion The level of RRM1 expression corelates with the cell sensitivity to gemcitabine.The cells with a lower level of RRM1 expression are more sensitive to gemcitabine.