免疫抑制性酸性蛋白单克隆抗体对卵巢上皮性癌的免疫组化研究

通过免疫抑制性酸性蛋白(IAP)单克隆抗体(MI)对33例卵巢上皮性癌的免疫组化实验研究表明,MI_2识别的IAP亚型似主要由癌细胞产生,对卵巢癌细胞的选择性较强,可能做为诊断卵巢癌的一种标志物。实验结果表明阳性着柒率与卵巢癌类型,病理分级关系不显著,而柒色程度与临床分期及预后密切相关,这对临床初步判定预后、估计复发、指导治疗有一定的意义。     

重组小鼠MIG趋化因子的高效真核表达及免疫活性测定

目的 克隆小鼠CXC趋化因子干扰素-γ诱生单核因子（MIG）并在杆状病毒表达系统中进行高效表达，进而对MIG蛋白进行纯化和活性鉴定。方法从小鼠脑组织中用RT-PCR的方法扩增出小鼠MIG基因的全长cDNA，在克隆入Bae-to-Bac杆状病毒表达载体后在High-Five昆虫细胞中进行分泌型表达；表达产物经S-Sepharose进行了纯化并进行了生化鉴定；最后对纯化的重组小鼠MIG蛋白进行了钙离子内流诱发试验和淋巴细胞趋化测定以鉴定其免疫活性。结果成功克隆了小鼠MIG基因并在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中进行了高效表达，其表达蛋白主体相对分子质量约为15000；经过单步S-Sepha-rose纯化法就可获得纯度为85％以上的重组小鼠MIG蛋白，产量为10mg/L；该蛋白该纯化蛋白在体外具有诱导小鼠T淋巴细胞钙离子内流和吸引、趋化小鼠脾细胞的活性。结论小鼠MIG蛋白可在杆状病毒表达系统中高产量分泌表达并可用S-Sephavose纯化法直接纯化；小鼠重组MIG蛋白具有激活、趋化淋巴细胞的生物活性；rmMIG纯化蛋白的大量制备为进一步研究小鼠MIG蛋白在炎症、免疫器官的成熟和其它疾病中的功能和作用提供了有利的工具。     

VEGF165反义RNA表达对人胃癌细胞恶性生物学行为的影响

目的利用本室构建的反义VEGF165（血管内皮生长因子,vascular endothelial growth factor）真核表达载体,研究VEGF反义RNA表达对人胃癌细胞生物学表型的影响. 方法用阳性脂质体介导的基因转染技术,将VEGF反义RNA重组体转入人胃癌细胞系,观察转染细胞的细胞周期、增殖能力及致瘤生长情况等生物学表现. 结果 VEGF反义RNA重组体转染胃癌细胞后,斑点杂交、间接免疫荧光等分析显示,反义RNA基因转染技术可使VEGF的表达明显减弱;与未转染的细胞相比,G2/M期细胞增加(0.39),而S期细胞减少(0.54);克隆形成率(2.2%)低于未转染细胞(4.0%);肿瘤细胞接种裸鼠后33 d时,VEGF反义RNA表达人胃癌细胞所致的移植瘤体积（345±136) mm3明显小于未转染细胞所致的移植瘤体积（1534±363) mm3. 结论 VEGF反义RNA可以通过抑制肿瘤组织血管生成而防治肿瘤的生长,另外VEGF的表达可能与细胞增殖能力有关.     

Upregulation of drug sensitivity of multidrug-resistant SGC79 01/VCR human gastric cancer cells by bax gene transduction

Objective To investigate the role of bax in a vincristine （VCR）-induced multidrug-resi stant （MDR） human gastric cancer cell line, SGC7901/VCR, in which the Bax prot ein expression level was significantly lower compared with that in parent cells .Methods A bax eukaryotic expression vector was constructed and transfected into SGC7901/ VCR cells by lipofectamine, and resistant clones were selected by G418. Western blotting detected Bax expression in transfectants. Tetrazolium blue (MTT) assa y evaluated the differences in drug sensitivity and cell cycle changes of transf ectants were analyzed using flowcytometry (FCM). Results The bax eukaryotic expression vector was constructed and transfected into SGC790 1/VCR cells. Through G418 selection, resistant clones were obtained. Western b lotting demonstrated that the expression of Bax protein was markedly increased i n bax transduced cells. These cells were more sensitive to adriamycin (ADR) and VCR than mock vector transducted cells. Moreover, bax transfection enhanced AD R-induced apoptosis and VCR-induced G(2)/M phase arrest of SGC7901/VCR cells. Conclusion Bax was involved in the MDR of SGC7901/VCR cells.     

Bax基因对人胃癌耐药细胞多药耐药性的逆转作用

目的　研究凋亡相关基因Bax对胃癌多药耐药性的逆转作用.方法　构建含有人BaxcDNA全长的真核表达载体pBK-Bax.经脂质体导入缺乏Bax蛋白表达的人胃癌多药耐药细胞系SGC7901/VCR中.Western印迹观察Bax基因在转导细胞中的表达,MTT法检测Bax转导细胞与空载体转导细胞对化疗药物的敏感性.结果　成功构建了Bax的真核表达载体,Bax转导细胞能稳定表达Bax蛋白,与空载体转导细胞相比,Bax转导细胞对长春新碱(P<0.01).结论　Bax基因转导对胃癌多药耐药细胞SGC7901/VCR的多药耐药性具有逆转作用Bax基因对人胃癌耐药细胞多药耐药性的逆转作…     

消化性溃疡患者生活质量及心理状态分析

研究消化性溃疡患生活质量及其治疗后的变化,初探胃及十二指肠溃疡患的心理情感状态,及可疑心理异常患在治疗前后的变化。方法采纳Ｍｃｍａｓｔｅｒ生活质量问卷,对２２例正常人及７４例十二指肠溃疡（ＤＵ）患、４４例胃溃疡患在治疗前后进行问郑调查,评价其包括一般生活能力、社交能力激心理情感状态等方面的生活在质量。     

人睾丸肿瘤抗原MAGE-E1基因的克隆测序及在原核系统中的表达

目的：扩增及克隆人的MAGE-E1基因并利用大肠杆菌进行表达。方法：从人胶质瘤细胞系BT-325中提取总RNA，用RT-PCR从中扩增出MAGE-E1基因片段。将MAGE-E1基因片段插入载体pGEM-T easy中，经全自动序列分析仪测序正确后，再克隆至表达载体pGEX-4T-2中，构建重组表达载体pGEX-4T-2-MAGE-E1，并转化大肠杆菌进行表达。结果：1mmol／L．异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导5h，MAGE-E1蛋白表达即达高峰，SDS-PAGE及凝胶密度扫描分析表明，表达出Mr约41000大小的蛋白，占菌体总蛋白的35％。结论：成功扩增、克隆MAGE-E1基因，并在大肠杆菌中得到稳定高效表达。