羊水细胞培养进行脊肌萎缩症的产前诊断

目的 应用错配聚合酶链反应-限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）方法进行脊肌萎缩症（spinal muscular atrophy,SMA)的产前诊断。方法 基于运动神经元生存基因（SMN）的两个同源拷贝碱基的差异，通过羊水细胞培养，应用错配PCR-RFLP法对2例有SMA阳性家族史的胎儿进行产前基因诊断。结果 2例均无SMN基因外显子缺失。结论 SMN基因缺失检测技术是高效、快速的SMA产前诊断的方法。     

FK506-壳聚糖膜与体外培养雪旺细胞生物相容性的研究

目的 探讨FK506-壳聚糖膜片与培养的雪旺细胞生物相容性.方法 将生长状况和纯度较好的第3代雪旺细胞,分别传代接种于含有FK506-壳聚糖膜片、单纯壳聚糖膜片的培养皿中培养,以盖玻片作为对照组.计算3组雪旺细胞倍增时间、雪旺细胞纯度;用MTT法比较不同膜片上雪旺细胞的生长活力,绘制生长曲线;S-100免疫荧光染色.结果 雪旺细胞倍增时间对照组为5.9 d,单纯壳聚糖膜片及FK506-壳聚糖膜片组均为4.0 d;雪旺细胞纯度分别为80%、89%,93%;雪旺细胞增殖情况以FK506-壳聚糖组最佳,单纯壳聚糖组次之,对照组最差;各组雪旺细胞均呈S-100阳性,FK506-壳聚糖组与单纯壳聚糖组雪旺细胞排列呈典型的漩涡状或栅栏状.结论 FK506-壳聚糖膜片具有更显著的组织相容性与生物功能性,并保持了雪旺细胞的生物学特性.     

4例SRY阳性的46,XX男性综合征患者临床及细胞分子遗传学研究

目的:探讨SRY阳性的46,XX男性综合征患者的临床及细胞分子遗传学特征。方法:分析4例SRY阳性的46,XX男性综合征患者的临床特点,并进行染色体核型分析、荧光原位杂交(FISH)、SRY基因检测、Y染色体微缺失等细胞和分子遗传学检测。结果:4例患者社会性别均为男性,身材低于正常男性均值。均因不育就诊,双侧睾丸体积小、质地软,精液检查均为无精子症。阴茎发育正常。性激素检查示高促性腺激素性性腺功能不全。染色体核型均为46,XX,Y染色体微缺失检测示AZFa,b,c区域均缺失。SRY基因均存在,FISH结果3例患者显示SRY基因易位于X染色体短臂。结论:SRY阳性的46,XX男性综合征患者常为男性表型,但睾丸发育不良,多伴有身材矮小和不育。患者的男性表型是由于基因组中存在SRY基因。无精子表型是由于缺失AZF。Y染色体长臂上可能存在与身高相关的基因。深入进行细胞、分子遗传学研究有助于揭示46,XX男性综合征基因型-表型的关系。     

CD14+单核细胞人类白细胞抗原DR表达率与脓毒症关系的研究

目的了解烧伤延迟复苏时CDl4^＋单核细胞人类白细胞抗原DR（HLA—DR）表达率的变化，分析其与脓毒症的关系。方法选择烧伤面积大于30％TBSA的25例烧伤延迟复苏患者，于伤后1、3、7、14、28d取外周血，其中7例患者住院期间并发脓毒症，于脓毒症发生后连续2d亦取其外周血。另取20例健康体检者外周血作为对照。流式细胞仪检测CD14^＋单核细胞HLA．DR表达率，酶联免疫吸附测定法检测血浆中肿瘤坏死因子α（TNF—α）、白细胞介素10（IL-10）的浓度。结果非脓毒症患者伤后1、3、7、14、28dCD14^＋单核细胞HLA—DR表达率分别为（15±6）％、（74±5）％、（264±17）％、（284-16）％、（474-16）％，明显低于健康体检者[（924±10）％，P〈0．01]；脓毒症患者发生脓毒症后1、2d，该指标亦明显低于健康体检者及非脓毒症患者伤后1、7、14、28d（P〈0．01）。脓毒症患者TNF—d检出率及TNF—α、IL-10浓度，均高于非脓毒症患者和健康体检者（P〈0．05或P〈0．01）。伤后1、7、28d，外周血CD14^＋单核细胞HLA—DR表达率与IL—10浓度呈显著负相关（r分别为-0．9963、-0．7459、-0．8474，P〈0．01）。结论烧伤延迟复苏患者免疫功能低下，促炎性介质释放量增加，并发脓毒症时则更为严重。外周血CD14^＋单核细胞HLA—DR表达率可作为动态检测患者免疫功能状态的有效指标。     

HBV转录激活蛋白HBx、MHBst78MHBst155真核重组载体构建

目的分别构建人乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白、羧基端截断的中分子表面蛋白MHBst78、MHBst155编码基因的真核重组表达载体,以便进一步研究其转录激活功能及对宿主细胞信号传导通路的影响。方法设计合成3对寡核苷酸引物,以adr亚型HBV质粒pHBVDNA为模板,采用PCR法分别扩增HBVX基因、MHBst78与MHBst155编码基因片段;用HindⅢ,KpnⅠ双酶切HBVⅩ基因;用HindⅢ和BamHⅠ双酶切MHBst78与MHBst155编码基因片段后,分别定向插入到真核表达载体pcDNA3.1相应酶切位点,转化宿主菌JM109,提取质粒,分别用上述内切酶酶切及DNA测序鉴定重组质粒。结果酶切重组体显示所切下的片段大小均与预计相符,测序结果与文献报道序列及预计结果一致。结论成功构建了HBVX基因、羧基端截断的HBV中分子表面蛋白MHBst78、MHBst155编码基因的真核重组表达载体,为进一步研究HBV转录激活蛋白HBx、MHBst78MHBst155对宿主细胞信号转导通路的影响奠定基础。     

236例无痛人工流产术的疗效观察

目的:探讨异丙酚和芬太尼混合液静脉麻醉、笑气吸入麻醉及2%利多卡因宫颈局部浸润麻醉三种镇痛方法在人工流产手术中的疗效比较。方法:自2003年8月至2004年1月对236例妇科门诊早孕要求终止妊娠的妇女实施无痛人工流产术。随机分成3组。A组:异丙酚+芬太尼静脉麻醉(85例);B组:N2O(笑气)吸入麻醉(88例);C组:2%利多卡因宫颈局部浸润麻醉(63例),观察人流术中其镇痛效果并对疼痛进行分级。结果:A组85例100%可达到完全不痛(疼痛分级为0级);B组65.90%可达到完全不痛,Ⅰ级23.86%,Ⅱ级9.09%,Ⅲ级1.15%;C组0例可达到完全不痛,Ⅰ级63.49%,Ⅱ级30.16%,Ⅲ级6.35%。结论:受术者如无心肺疾患及人流禁忌证,无痛人工流产术应选择异丙酚+芬太尼静脉麻醉可达到完全无痛,痛苦最小。     

精液白细胞与不育症之间关系探讨

目的以瑞-姬染色方法,油镜精细观察,区分精液中生精细胞与白细胞,探讨精液白细胞的检出率与不育症之间关系,以提供临床参考。方法293例精液采用瑞-姬染色,油镜进行白细胞及其他细胞形态分类,并进行统计处理。结果293例不育症精液中检出白细胞阳性136例占46.4%;阴性157例占53.6%。年度精液白细胞阳性率1990年为13.8%;1993年为21.5%;1997年为34.1%;2006年为46.4%,说明有逐渐增加趋势。对2006年136例精液白细胞数量分布统计,以≤5个者最多占70.6%;6~20个占8.9%;21~40个占3.4%;>40个占1.3%。1~4个组与5~9个组、>20个组比较,有显著差异(P<0.001)。56例精液与前列腺液进行白细胞对照观察,两者均有白细胞者为48.2%(27/56)。精液中非生精细胞检出率,以前列腺上皮细胞最高为27.3%;其次是吞噬细胞为23.5%;再次是淋巴细胞为10.8%;支持细胞和间质细胞均为8.1%。结论精液白细胞有逐年增加趋势,影响精液质量造成不育症,实验室应认真检测,以油镜观察≤5个者,可考虑来源于精液;>5个者应检查前列腺,临床应注意其来源,对症治疗。     

胫骨干骨折带锁髓内钉固定和钢板螺钉固定的对比研究

目的：对照回顾性分析带锁髓内钉和钢板内固定两种方法治疗胫骨干骨折的效果。方法：髓内钉组32例（35处骨折）,根据AO分型,42A型11处,42B型18处,42C型6处;钢板组42例（45处骨折）,42A型10处,42B型22处,42C型13处。平均伤后手术时间在髓内钉和钢板组分别为3d和3.5d。随访评估患者手术时间,活动度,愈合时间,术后并发症之间的差别。结果：术后平均随访13个月（8～26个月）。髓内钉组平均手术时间为84min,钢板螺钉组平均为93min。髓内钉组踝关节平均背屈度为13°（0°～20°）,钢板组为11°（0°～20°）;跖屈分别为41°（30°～50°）,47°（30°～50°）。愈合时间髓内钉组平均为3.3个月,钢板螺钉平均为3.5个月。术后X线片显示髓内钉固定有1例出现旋转畸形,钢板组有3例出现成角畸形,均为胫骨远端1/3骨折。结论：在治疗胫骨骨折方面,带锁髓内钉和钢板内固定两种方法都可以取得理想的效果。