中药独活激活Wnt/β-catenin信号通路对骨质疏松大鼠的作用

目的探讨中药独活对去卵巢所致骨质疏松SD大鼠的作用及其可能机制。方法将50只SD大鼠,体重200～250 g,随机分为假手术组、模型组、独活低剂量组(0.9 g/kg)、独活高剂量组(1.8 g/kg)、阳性药组(200 mg/kg依普黄酮),每组10只。利用双侧卵巢切除法制备大鼠骨质疏松模型,手术模型制备成功后,连续灌胃给药60d。测定股骨密度、骨灰重/干重百分比;测定大鼠血清骨钙素(OC)、骨碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、血清钙、无机磷的水平。免疫组化法测定股骨中骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(RANKL)蛋白表达;Western blot法检测大鼠骨组织中β-catenin、p-β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达。结果独活高剂量和阳性药均能够增加大鼠股骨密度、骨灰重/干重,降低BGP、ALP及TRAP的水平,并增加血清钙的水平,对无机磷的表达无显著性影响,增加骨组织中OPG蛋白表达水平,降低RANKL蛋白表达水平,增加β-catenin、p-GSK-3β蛋白表达水平,降低p-β-catenin、GSK-3β蛋白表达。结论独活高剂量(1.8 mg/kg)对去卵巢导致的骨质疏松大鼠的治疗作用,与激活Wnt/β-catenin信号通路促进骨形成相关。     

PEI修饰的氢氧化铝纳米颗粒增强DC细胞抗原递呈作用的初步研究

目的：探索聚乙烯亚胺（polyethylenimine,PEI）修饰的氢氧化铝纳米颗粒（HS）增强树突状细胞（dendritic cells,DCs）抗原提呈的作用及其机制。方法：DCs负载PEI修饰前后的HS联合卵清蛋白（ovalbum,OVA）抗原后与B3Z细胞共孵育,CPRG (Chlorophenol red-β-D-galactopyranoside)方法检测DCs对OVA的抗原提呈能力,Western blot检测DCs中泛素化OVA蛋白的表达;以不同刺激剂[干扰素(interferon, IFN)-α、R848]与负载HS/PEI-OVA的DCs混合后,收集培养上清ELISA检测白介素（interleukin, IL）-12的表达,与B3Z共孵育后CPRG方法检测不同刺激剂对HS/PEI增强DCs抗原提呈的作用;DCs负载HS/PEI-OVA后与OT-Ⅰ T细胞共孵育,检测OT-Ⅰ T细胞增殖;皮下接种小鼠黑色素瘤细胞B16.OVA构建小鼠黑色素瘤模型,探讨负载HS/PEI-OVA的DCs疫苗体内诱导CD8+IFN-γ+T细胞比率上升及特异性T细胞分泌IFN-γ的能力。结果：与未经PEI修饰的HS相比,HS/PEI能显著增强DCs对OVA抗原的提呈能力,并增加DCs中泛素化OVA蛋白的表达及IL-12的分泌;IFN-α、R848均可进一步增强DCs对HS/PEI-OVA的提呈作用;DCs负载HS/PEI-OVA可显著促进OT-Ⅰ T细胞的增殖;DCs-HS/PEI-OVA疫苗小鼠体内能诱导高效的T细胞应     

“经筋理论”指导下自拟加减葛根汤治疗神经根型颈椎病疗效分析

目的 探讨用“经筋理论”指导下自拟加减葛根汤为主综合治疗神经根型颈椎病的临床疗效。方法 选择神经根型颈椎病242例患者，随机分成治疗组及对照组。其中治疗组122例，男60例，女62例，在基础治疗基础之上，运用改良葛根汤加减中药汤剂治疗，原方基础上佐以补益肝肾，活血化瘀等中药，活血止痛通络。对照组120例，男58例，女62例，在基础治疗基础之上，给予洛索洛芬钠(乐松)60 mg/次，3次/d,连续使用2周。观察其临床治疗效果，评价标准采用中医证候及VAS视觉模拟评分法进行评分。结果 加减葛根汤对于治疗神经根型颈椎病的临床症状均有所减轻或消失，总有效率可达88%(108/122)。疼痛症状依据VAS评分对两组分别进行评定，我们通过对两组数据分析比较发现P<0.001,差异具有统计学意义，且治疗组疗效较对照好患者，VAS评分治疗后较治疗前明显改善。结论 临床基于加减葛根汤为主综合治疗神经根型颈椎病疗效显著，具有很好的临床应用价值，值得推广。     

鲍曼不动杆菌医院感染的临床分布及耐药性分析

目的研究鲍曼不动杆菌（Ab）的临床分布及药敏情况。方法分析非重复分离的524株Ab的科室分布和标本来源，采用K-B法测定17种抗菌药物的耐药性。结果Ab检出率逐年增加，最常出现在痰标本，占79．O‰主要分布在呼吸内科（21．0％）、ICU（19．5％）和神经内科（12．4％）；对鲍曼不动杆耐药率最低的是头孢哌酮／舒巴坦（2．76％），其次是阿米卡星（10．10％）和氨苄西林／舒巴坦（12．60％）。结论Ab呈多药耐药特点，应加强感染者的消毒隔离，合理使用抗生素，控制耐药菌株流行。     

重组人骨保护素与重组核因子κb活化因子受体蛋白对破骨前体细胞分化的影响

目的:对比重组人骨保护素(rhOPG-Fc)与重组核因子κb活化因子受体蛋白(rhRANK)对破骨前体细胞分化的影响.方法:采用成骨细胞与破骨前体细胞RAW264.7混合培养,在地塞米松、1,25 (OH) 2VitD3诱导下生成破骨细胞的方法.研究分3组:rhRANK组:10-5 g/L;rhOPG-Fc组:10-5 g/L;空白对照组.作用9d后观察破骨细胞数目和形态,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性细胞个数,骨磨片吸收陷窝计数.结果:在空白对照组,小鼠成骨细胞与破骨前体细胞RAW264.7混合培养6d后,开始出现多核细胞,9d时可见大量成熟多核细胞,经TRAP染色证实为成熟破骨细胞,而rhRANK组及rhOPG-Fc组TRAP染色阳性多核细胞数较对照组均减少,特别是rhRANK组减少更明显.骨片吸收陷窝计数显示rhRANK组及rhOPG-Fc组较对照组也明显减少,而相对来说,rhRANK组较rhOPG-Fc组更少.结论:rhOPG-Fc与rhRANK均可以有效抑制破骨前体细胞分化成为成熟破骨细胞,且rhRANK较rhOPG-Fc抑制效果更明显.     

重组人骨形态发生蛋白2缓释微球的制备与评价

目的:针对重组人骨形态发生蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)在体内半衰期短、易被稀释代谢的问题,探讨利用聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)制备载rhBMP-2微球的可行性和制备工艺,并观察其载药、释药特性.方法:①采用W/O/W型复乳化-溶剂挥发技术制备rhBMP-2/PLGA缓释微球,并对微球的粒径和形态、包封率和载药量,体外释放性质进行测定.②异位成骨实验:昆明小鼠12只,在右侧大腿股内侧肌袋内植入含rhBMP-2的50 mg PLGA微球,4周后取材,观察成骨情况以初步检测微球中的蛋白质活性.结果:①rhBMP-2/PLGA缓释微球形态良好,粒径主要集中在50～60 μm,包封率为(37.52±4.31)%,载药率为(5.12±1.32)%.②微球的释放存在突释,7 d内释放的药物量超过40%,大约90%的药物量于42 d内释放完全.③载药微球植入鼠股部肌袋4周,材料周围有明显的骨形成.结论:制备的rhBMP-2/PLGA微球可以缓慢释放有活性的rhBMP-2,具有临床应用的可行性.     

评价护理干预对复杂性肛瘘患者术后伤口愈合的促进作用

目的探究护理干预对复杂性肛瘘患者术后伤口愈合的促进作用。方法对照组患者采取常规护理,而实验组采用的是有针对性护理干预。结果观察组患者术后切口愈合时间、疼痛评分和住院时间方面远远强于对照组,效果存在着明显差异性。结论对复杂性肛瘘手术患者实施围手术期针对性护理干预具有重大的参考意义。     

药物联合半导体激光照射在鼻窦疾病围手术期中的治疗作用

目的探讨药物联合半导体激光在鼻窦内镜围手术期中的治疗作用。方法鼻窦内镜手术患者213例,其中96例行药物联合半导体激光治疗:以波长650nm、功率280mW、光斑直径30mm、时间8min的半导体激光照射鼻部病变部位,同时行全身抗感染治疗和鼻腔冲洗治疗;117例为对照组仅行药物治疗,方法同前组。观察两组患者术后疼痛程度、出血程度、通气程度及鼻腔黏膜上皮化时间。结果药物联合半导体激光治疗后患者术后疼痛和出血程度显著减轻(P0.05),鼻腔通气显著改善(P0.05),黏膜上皮化时间显著缩短(P0.05)。结论药物联合半导体激光治疗可以明显减轻鼻窦内镜术后患者疼痛程度、出血程度,能改善通气情况,缩短鼻腔黏膜上皮化时间。     

内毒素休克小鼠肝血管靶向性结合肽的初步研究

目的研究肽CLTTWAPAC与内毒素休克BALB/c小鼠肝血管的靶向性结合作用。方法构建pET14b-SBP和pET14b-SBP-CLTTWAPAC原核表达载体,转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达纯化蛋白SBP和SBP-CLTTWAPAC。建立内毒素休克小鼠模型,将9只内毒素休克BALB/c小鼠随机均分为3组:①PBS对照组(经尾静脉先后注射灭活空噬菌体、PBS和噬菌体CLTTWAPAC,间隔5min);②SBP对照组(经尾静脉先后注射灭活空噬菌体、SBP和噬菌体CLTTWAPAC,间隔5min);③SBP-CLT-TWAPAC组(经尾静脉先后注射灭活空噬菌体、SBP-CLTTWAPAC和噬菌体CLTTWAPAC,间隔5min)。小鼠左心室灌流后取肝匀浆称重,行噬菌体计数,计算各组肝噬菌体单位重量滴度。结果 PBS对照组与SBP对照组肝噬菌体单位重量滴度差异无统计学意义(435185±57824pfu/gvs468290±74106pfu/g,P0.05),而SBP-CLTTWAPAC组肝噬菌体单位重量滴度(176059±98506pfu/g)显著降低,与两对照组比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论 CLTTWAPAC可竞争性抑制噬菌体CLTTWAPAC与内毒素休克小鼠肝血管的结合,进一步证明CLTTWAPAC靶向性结合于内毒素休克小鼠肝血管。