高糖通过活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3途径诱导人腹膜间皮细胞凋亡

目的 探讨高糖损伤人腹膜间皮细胞(HPMC)的机制。方法 (1)分离培养HPMC,以细胞形态、免疫细胞化学染色作细胞鉴定;(2)第2代HPMC分别经含1.5%、2.5%、4.25%葡萄糖的M199培养基培养48h后(以正常M199培养基和含4.25%甘露醇的M199培养基为对照),检测HPMC caspase-3活性和HPMC凋亡情况;(3)分别用25μmol/L、50μmol/L、和100μmol/LZ-VAD.fmk和4.25%葡萄糖共同刺激体外培养的HPMC(以DMSO和4.25%葡萄糖为对照),流式细胞仪观察HPMC凋亡情况,同时检测50μmol/L Z-VAD.fmk组和葡萄糖对照组caspase-3活性。结果 (1)HPMC caspase-3活性和凋亡率与葡萄糖浓度呈正相关(r分别为0.9506和0.9868,P<0.01),且HPMC caspase-3活性与凋亡率呈正相关(r=0.9860,P<0.01)。与M199对照组相比,2.5%葡萄糖组和4.25%葡萄糖组HPMC caspase-3活性和凋亡率显著增加(P<0.05),而1.5%葡萄糖组及4.25%甘露醇组HPMC caspase-3活性和凋亡率无显著差异(P>0.05)。(2)4.25%葡萄糖组caspase-3活性显著高于4.25%甘露醇组(P<0.05),但4.25%甘露醇组caspase-3活性与对照组相比无显著差异(P>0.05)。(3)与对照组相比,Z-VAD,fmk组HPMC凋亡率(P<0.05)和caspase-3活性(P<0.05)显著下降,且HPMC凋亡率与Z-VAD.fmk呈负相关(r=-0.8836,P<0.01)。结论 (1)高糖能以     

1—氰基—2—苯甲酰—1,2—二氢异喹啉的合成

采用1,1,2-三氯乙烷作溶剂,三乙胺作相转移催化剂合成了吡喹酮的重要中间体1-氰基-2-苯甲酰-1,2-二氢异喹啉。本法单耗低,产物质量好。Reissert 反应收率由文献报道的82%提高至90%。     

O-GlcNAc糖基转移酶在原核和真核细胞中的表达和提纯

目的 :本文为进一步研究蛋白 O- Glc NAc糖基化修饰提供重要资源。方法 :为了探索制备纯化具有生物学活性的重组 OGT的有效方法 ,本文用大肠杆菌和 Hi5昆虫细胞表达并纯化具有活性的重组 OGT。携带人 OGTc DNA的 PET32 a质粒在大肠杆菌中表达出带有 1个 S- Tag的重组人 OGT融合蛋白 ,然后用与 S-蛋白质偶联的琼脂糖凝胶颗粒从细菌裂解液中亲和纯化 OGT融合蛋白。结果 :其纯化的 OGT在电泳中显现单一条带并具有生物活性 ,但其活性在洗脱后丧失。在 Hi5昆虫细胞中表达的鼠肝 OGT带有一 His6 tag,经镍离子螯合柱纯化后 ,其比活性达到 0 .88nmol· min- 1 · mg- 1 OGT。结论 :在这两个表达系统中制备重组 OGT各有利弊。     

重组2型腺相关病毒-转化生长因子β3对实验性肝纤维化大鼠肝脏组织病理学和Ⅰ型胶原表达的影响

Objective To investgate the effects of TGF β 3 on rat hepatic fibrosis. Methods The TGF β 3 cDNA was cloned into rAAV2 vector. Rats were randomly divided into four groups: normal control group, model group, negative control group and TGF β 3 group. Hepatic fibrosis was induced by hypodermic injection of 40% CCI4. Recombinant AAV2-TGF β 3 viral particles were injected via the vena caudalis one week before CCh treatment. Rats were executed 8 weeks after CCI4 treatment, global histological change was observed after HE staining, the distribution of the collagen fibers was observed after masson staining, his-tochemistry was done to observe the expression of collagen Ⅰ; The positive area rate of the collagen fibers and the average optical rate of collagen Ⅰ were quantified. Results HE staining indicated that collagen fibers were reduced in the TGF β 3 group. Masson staining shown that the collagen fibers were distributed around the blood vessel, in the portal area and disse space. Compared to the model group (13.2%±2.2%) and negative control group (12.3%±1.5%), the collagen fibers in liver tissues of TGF β3 group (7.7% ± 1.5%) were significantly decreased (q = 9.456, P < 0.01; q = 8.217, P < 0.01). Histochemistry indicated that the collagen fibers of liver tissues of TGF 15 3 group (0.185±0.033) were significantly higher than those in the model group (0.252±0.042) and the negative control group (0.230±0.029), (q = 6.228, P < 0.01; q = 4.346, P < 0.01). Conclusion TGF β 3 alleviates the damage to hepatic cell and the level offibrosis in CCI4 treated rats and inhibits the expression of collagen Ⅰ.     

ApoMT对CdMT肾毒性保护作用研究

本文研究了去除金属离子的金属硫蛋白（ApoMT）对镉金属硫蛋白（CdMT）肾毒性作用的影响。结果发现，与单独给予CdMT比较，ApoMT能降低尿蛋白量和尿碱性磷酸酶（AKP）活性，并能促进尿Cd的排泄。肾组织形态学结果显示肾近曲小管损伤程度明显减轻。提示ApoMT对CdMT肾小管损伤具有保护作用。     

老龄大鼠非细菌性多器官功能不全综合征模型的建立

目的以酵母多糖腹腔注射建立老龄大鼠多器官功能不全综合征(MODSE)模型,并进一步与成年多器官功能不全综合征(MODS)模型作比较.方法成年和老龄SD大鼠,腹腔注射不同剂量酵母多糖,以血气、血生化和心、肝、脑、肺、肾等各主要脏器的光镜检查等为指标,观察上述各主要脏器的功能和形态学的变化.结果与成年和老龄正常对照组相比,成年和老龄不同酵母多糖组血气和血生化指标均出现不同程度的改变,肺、心、肝、脑、肾等主要脏器出现明显病理改变.在相同酵母多糖浓度下,老龄组呼吸功能、心脏功能和肾脏功能降低较相应成年组重;在复制模型程度相似的情况下,与成年大鼠相比,老龄大鼠有死亡时间延迟的趋势.结论酵母多糖腹腔注射可复制MODSE模型,以0.5 g/kg腹腔注射最为理想,该模型可用于MODSE机制和实验治疗学的探讨.     

丹红与疏血通结合早期康复治疗对急脑梗死患者运动及生活活动能力的影响

目的:应用丹红与疏血通结合早期康复治疗急脑梗死患者,观察其对急性脑梗死偏瘫患者运动及生活活动能力的影响。方法:选择急性脑梗死偏瘫患者80例,随机分为治疗组和对照组。治疗组在给予丹红与疏血通静脉滴注治疗的同时进行规范的康复训练,对照组给予丹参和曲克芦丁静脉滴注及未经指导的自我锻炼,在患者入组时和30天后分别进行有关的功能评定,评价两组的疗效。结果:治疗前两组的一般资料、运动功能与日常生活活动能力的评定无显著性差异(P>0.05),经过30天治疗后,两组运动能力、巴氏指数均有改善,其改善幅度康复组要明显优于对照组(P<0.01)。结论:丹红与疏血通结合早期康复治疗,有助于改善急性脑梗死偏瘫患者的运动及生活活动能力。     

心脏瓣膜手术后ICU时间延长的危险因素分析

目的 分析心瓣膜手术后患者住重症监护病房(ICU)时间延长的危险因素.方法 将2005年1月至5月间连续507例施行心瓣膜手术患者,根据术后住ICU时间是否延长(住ICU时间延长定义为≥5d)分为两组,组Ⅰ75例,术后住ICU时间延长;组Ⅱ432例,术后住ICU时间未延长.先对各变量进行单因素分析,然后将单因素分析有意义的变量纳入logistic回归进行多因素分析.结果 术后住ICU时间延长75例.单因素分析结果显示组Ⅰ中年龄、有心脏手术史、吸烟史、二次体外循环支持的比率、心胸比率、体外循环时间和主动脉阻断时间均大于或长于组Ⅱ;心功能、左心室射血分数(LVEF)和肺功能均低于或差于组Ⅱ(P＜0.05,0.01).logistic多因素分析结果显示术前年龄≥65岁(OR=4.399)、LVEF≤0.50(OR=2.788)、心胸比率≥0.68(OR=2.411)、最大通气量实测值/预计值%＜71%(OR=4.872)、有心脏手术史(OR=3.241)和术中二次体外循环支持(OR=18.656)为术后住ICU时间延长的危险因素.结论 临床上可根据年龄、LVEF、心胸比率、最大通气量、术中是否二次体外循环支持预测术后住ICU时间是否延长.对具有上述危险因素的患者采取更多的防治措施,以降低术后并发症的发生率和死亡率.     

防治果糖二磷酸钠致痛的效果比较

目的研究利百素凝胶对防治果糖二磷酸钠（FDP）致痛的效果.方法将36例静脉滴注FDP的患者随机分成盐水组、湿敷组、利百素组3组,每组各12例,每例均输注FDP 100 ml,20 min内输完,1次/天,每组共84例次.盐水组用生理盐水50 ml于输注FDP前、后输入.湿敷组用1：1的75%酒精与2%的利多卡因混合液,湿敷于穿刺点上方.利百素组在静脉穿刺前15～30min、输注FDP前、后,共3次在穿刺局部及沿静脉血管走向外涂一薄层利百素,观察记录疼痛情况.结果盐水组与湿敷组、盐水组与利百素组疼痛发生率差异有极显著意义（P＜0.01）.湿敷组与利百素组疼痛发生率差异有显著意义（P＜0.05）.结论利百素凝胶对防治FDP致痛效果显著、安全.     

大剂量免疫球蛋白治疗重型格林-巴利综合征疗效观察

目的:观察大剂量静脉滴注免疫球蛋白(HD-IVIG)治疗重型格林-巴利综合征(GBS)的疗效.方法:选择确诊为重型GBS的病例13例,于首次发病后2周内给予HD-IVIG治疗,剂量为0.4g*kg-1*d-1,连续5天为一疗程.治疗前后采用神经功能缺损评分法进行疗效评价.结果:13例GBS患者治疗前后神经功能缺损评分分别为4.23±0.44与2.54±1.45,治疗后比治疗前降低1.69±1.18,差异有显著性(P＜0.01),同时治疗前后有很高的相关性(P＜0.01).结论:HD-IVIG 治疗重型GBS疗效出现早,人工辅助通气时间短,可作为治疗重型GBS的首选方法.