人参皂苷Rh2抑制肝癌HepG2细胞迁移的实验研究

目的:研究人参皂苷Rh2对肝癌Hep G2细胞迁移的影响及其机制。方法:取对数生长期Hep G2细胞,Rh2(10~160μmol/L)诱导,同时设空白对照组,用CCK-8检测Rh2对细胞增殖影响;Transwell检测Rh2对细胞的迁移的影响;荧光素报告基因筛选可能的信号通路;Western blot检测Hep G2细胞中P-ERK、ERK、P-P38、P-38、P-JUK、JUK、MMP3等蛋白的表达;定量PCR方法检测AP1、MMP3基因的表达;荧光显微镜分别观察AP1、MMP3蛋白在细胞内的表达及分布。结果:CCK-8检测结果显示Rh2对肝癌Hep G2细胞生长抑制呈剂量和时间依赖性;Transwell检测显示Rh2对肝癌Hep G2细胞迁移有明显的抑制作用;荧光素报告基因筛选出AP1转录因子;Western blot检测结果显示P-ERK、MMP3蛋白表达水平呈下降趋势,PJUK、P-P38蛋白表达水平明显升高,ERK、JUK、P38蛋白则无明显变化;定量PCR方法结果显示:AP1、MMP3的基因表达下降。荧光结果显示:AP1、MMP3均分布在胞质内,随药物浓度的增加其荧光表达量减弱。结论:人参皂苷Rh2可通过激活MAPK通路来抑制肝癌Hep G2细胞的迁移。     

TNF-α对大鼠离体心肌组织块单相动作电位的影响及机制研究

目的:检测TNF-α对离体心肌组织块单相动作电位时程(MAPD)及离子通道电流的影响,初步探讨心梗后TNF-α诱导电生理异质性致室性心律失常发生的可能机制。方法:在离体大鼠心脏灌流的条件下,分离心肌组织块,电生理实验技术记录在不同浓度TNF-α灌流条件下的MAPD。用酶解法分离大鼠的心室肌细胞,应用膜片钳全细胞技术记录不同浓度TNF-α对单个心室肌细胞Ito和IK1的影响。结果:与对照组相比较,离体心肌组织块心内膜和心外膜MAPD浓度依赖性地随着TNF-α浓度的增加而增大(P<0.05);相同浓度TNF-α对心内膜和心外膜MAPD有不同的影响,尤其显著延长了心内膜的MAPD。经依那西普(TNF-α受体螯合剂)预处理后,相同浓度TNF-α对心内膜和心外膜MAPD影响不同导致的差异显著降低(P<0.05)。将TNF-α作用于大鼠心室肌细胞,与对照组相比较,Ito和IK1电流密度随着TNF-α浓度的增加而降低(P<0.05)。结论:TNF-α对心内膜及心外膜单相动作电位的不同影响可能对急性心梗后室性心律失常的形成有诱导或促进作用,其机制可能与TNF-α浓度依赖性抑制Ito和IK1电流,引起动作电位复极化异常从而诱发折返性心律失常有关。     

系统性红斑狼疮患者骨髓细胞培养上清对间充质干细胞衰老作用的研究

为了探讨SLE患者骨髓局部微环境对间充质干细胞(MSC)衰老的影响及机制。首先收集性别、年龄匹配的健康对照者及SLE患者骨髓各6例,留取上清液并灭活补体;以含10%骨髓上清的DMEM/F12培养基模拟机体骨髓局部微环境,培养脐带来源的MSC;SA-β-gal染色并计数阳性MSC比例;real time PCR及western blot法分别检测MSC的p53、p21基因及蛋白表达水平;荧光显微镜观察MSC核内DNA损伤标记53BP1的表达情况;CCK8检测细胞活力;流式细胞术检测Annexin V/PI评估细胞凋亡。结果显示,与正常对照相比,SLE患者骨髓上清可显著增加β半乳糖苷酶阳性MSC细胞比例,且上调p53和p21的表达量;在SLE患者骨髓上清处理的条件下,MSC细胞内与DNA损伤反应有关的标志性蛋白53BP1的表达水平显著增高;SLE患者骨髓上清还能够明显抑制MSC的增殖能力。这提示SLE患者骨髓上清促进MSC衰老,其机制可能在于诱导MSC细胞核内DNA损伤反应。     

CMTM3表达下调参与肥厚性心肌病发病

目的 探讨CMTM3在肥厚性心肌病患者的心肌组织中的表达情况及肥厚性心肌病的发病机制.方法 研究对象包括两部分:1)按每天15 mg/kg剂量腹腔注射异丙肾上腺素(ISO)诱导的心肌肥厚小鼠模型;2)2014年1月至2014年6月在阜外医院接受手术的肥厚性心肌病患者32例及3例正常心肌组织.使用半定量RT-PCR,real-time PCR及Western blot检测CMTM3在心肌组织转录和蛋白水平的表达.结果 1)在ISO诱导的心肌肥厚小鼠组织中,CMTM3 mRNA表达下调.2)在肥厚性心肌病患者病变的心肌组织中,CMTM3在转录水平和蛋白水平表达均下调.结论 CMTM3低表达致心肌组织增殖肥厚,可能参与了肥厚性心肌病发病.     

骨髓间充质干细胞对不同时长应力刺激的力学响应

目的通过检测骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的弹性模量和表征细胞应力纤维结构,研究不同时长应力刺激下MSCs的力学响应特点。方法利用原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)和激光共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)对体外培养的大鼠MSCs细胞骨架进行高分辨成像,同时使用带有微球的微悬臂实施微区力曲线检测,进针时间分别选择为0.1、0.5、1、5、10 s,计算并比较300 nm压入深度时MSCs的弹性模量。结果大鼠MSCs的细胞骨架呈现致密交联网状结构。细胞弹性模量随应力刺激时长改变而发生明显变化,MSCs在作用时间分别为0.1、0.5、1、5、10 s时各组弹性模量中位数和4分位数(QR)间距分别为10.02(QR=9.66)、1.94(QR=7.71)、3.63(QR=19.33)、17.15(QR=35.13)、23.52 k Pa(QR=34.87)。除刺激时间极短(0.1 s)的情况,细胞弹性模量有随应力刺激时间增长而增大的趋势。结论大鼠MSCs具有完善的力学承载结构,与理想弹性体不同,可对较长时间应力刺激做出主动响应,导致弹性模量上升。研究结果可以为组织工程学通过力学刺激调控MSCs行为的研究提供基础数据。     

哮喘大鼠肺组织中Wnt5a/JNK信号通路相关分子表达增强

目的研究Wnt5a/JNK信号通路相关分子在哮喘大鼠肺组织中的表达。方法将实验大鼠随机分为正常组和哮喘组,成功复制哮喘模型后,通过HE染色观察气道病理改变,实时荧光定量PCR检测肺组织和血液中Wnt5a mRNA的表达,Western blot法检测肺组织中磷酸化的c-Jun(p-c-Jun),磷酸化的c-Jun N端激酶(JNK)蛋白的表达。结果与正常组相比,哮喘组支气管黏膜增厚,褶皱增多,管腔狭窄;气管和血管周围有炎细胞的浸润。气道壁与平滑肌层显著变厚。哮喘组大鼠肺组织和血液中Wnt5a mRNA与对照组比较表达上调,p-c-Jun,p-JNK蛋白表达增加。结论哮喘大鼠的Wnt5a、p-JNK、p-c-Jun表达增强。     

18F-FDGPET-CT误诊为肺癌的肺结核一例并文献复习

肺结核是发展中国家成年人的主要死因之一,中国是结核病负担最重的国家之一,随着医疗水平的提高,抗结核药物的广泛使用,结核杆菌产生耐药和变异,临床症状及影像学表现常不典型。18F-脱氧葡萄糖(fluorine-18 fluorodeoxyglucose,FDG)正电子发射计算机体层摄影术/CT(positron emission tomography/computed tomography,PET-CT)广泛应用于肺部病变的良恶性诊断,但18F-FDG是非特异显像剂,不是肿瘤特异性的示踪剂,一些良性病变,尤其是与感染或炎性反应性相关的病     

宫腔镜电凝辅助宫颈冷刀锥切术诊治CIN 130例临床分析

目的探讨宫腔镜电凝辅助宫颈冷刀锥切术在宫颈上皮内瘤样病变(CIN)诊治中的临床价值。方法回顾性分析因宫颈上皮内瘤样病变而行宫腔镜电凝辅助宫颈冷刀锥切术治疗的130例患者的临床资料。结果宫腔镜辅助宫颈冷刀锥切术和阴道镜多点活检病理符合者70例(53.8%);不符合者60例(46.2%),其中升级者38例(29.3%),降级者22例(16.9%)。结论宫腔镜电凝辅助宫颈冷刀锥切术在诊治宫颈上皮内瘤样病变中具有重要价值,可以提高宫颈上皮内瘤样病变诊断的准确率。     

妇科手术后肠梗阻的危险因素分析

目的探讨妇科手术后肠梗阻发生的危险因素。方法回顾分析35例北京大学人民医院诊治的术后肠梗阻的妇科住院患者的临床资料,并与具有相同年龄同期手术但术后未发生肠梗阻的140例妇科患者进行对比分析(按1∶4比例)。结果术后肠梗阻组与非肠梗阻组相关临床资料进行单因素分析显示:妇科恶性肿瘤、开腹手术、切除盆腔淋巴结、合并盆腔粘连、手术操作时间长、术后使用镇痛泵、术后合并低钾血症与妇科手术后肠梗阻相关。多因素分析显示:手术时间是妇科手术后肠梗阻的独立危险因素。结论妇科恶性肿瘤、开腹手术、切除盆腔淋巴结、合并盆腔粘连、手术操作时间长、术后使用镇痛泵、术后合并低钾血症的妇科手术患者术后发生肠梗阻的风险增加,应提高警惕和加强术后管理,其中手术操作时间与术后肠梗阻的发生最为密切,缩短手术时间是减少术后肠梗阻发生的最为有效的措施。     

主观耳鸣患者大脑局部神经功能改变的静息态功能磁共振研究

目的利用局部一致性(regional homogeneity,ReHo)和分数低频振幅(fractional amplitude of low-frequency fluctuations,fALFF)方法相结合探讨主观耳鸣患者大脑局部自发神经功能的变化。材料与方法选取25例符合纳入标准的主观耳鸣患者和25名与其相匹配的健康对照者,采集所有受试者临床、量表资料并行磁共振扫描,数据预处理后进行两组间ReHo和fALFF值比较,提取差异脑区ReHo、fALFF值与病程和耳鸣残疾量表(tinnitus handicap inventory,THI)评分进行相关分析。结果与健康对照组相比,患者组在右侧颞中回和楔叶ReHo值增高,在右侧额中回、左侧小脑前叶ReHo值降低,同时在右侧颞中回和楔叶fALFF值增高,差异有统计学意义(P0.05,GRF校正)。另外患者组右侧颞中回ReHo值与THI评分成正比(r=0.576,P=0.003)。结论通过ReHo和fALFF相结合,发现主观耳鸣患者在听觉和非听觉的部分脑区发生不同程度的局部脑功能活动改变,并主要累及默认模式网络及视听觉网络,初步证实了主观耳鸣大脑局部自发神经功能存在改变。