儿茶酚胺类药物对感染性休克兔胃肠灌注的影响

Objective To assess the effects of dopamine,dobutamine and norepinephrine on the P(g-a)CO2 and superior mesenteric blood flow in septic shock.Methods Rabbit septic shock model was established by challenging with intravenous injection of lipopolysaccharides from Escherichia coil(2 mg/kg).The rabbits with septic shock were randomly assigned to 3 groups-dopamine group(n = 8),dobutamine group(n = 8) and norepinephrine group(n = 8).Apart from volume resuscitation with normal saline solution [20 ml/(kg· h)]，dopamine[5μg/(kg·min)],dobutamine[(5μg/(kg·min)]and norepinephrine [(1μg/(kg·min)]were infused in dopamine group,dobutamine group and norepinephrine group respeclively.Cardiac index(CI) and superior mesenteric blood flow index(SMBFI) were continuously monitored by doppler flowrneter.Gastric mucosal PCO2 was evaluated by gas tonometry every 10 min.Arterial and venous blood gas analyses and lactate levels were measured every 1 h.Results MAP,CI,and SMBFI significandy decreased and P(g-a) CO2 increased after lipopolysaccharides infusion in three groups.After 2-hour treatment,MAP in norepinephrine group[(70 +3) mm Hg]was higher than that of dopamine group[(66±4) mm Hg]and dobutamine group[(65±4) mm Hg](P ＜0.05).SMBFI in norepinephrine group [(18.7±2.9) ml/(kg·min)]was higher than that of dopamine group[(16.2±1.6) ml/(kg·min)]and dobutamine group[(15.8±1.9) ml/(kg·min)](P＜0.05).P(g-a) CO2 in norepinephrine group [(30±6) mm Hg]was lower than that of dobutamine group[(23±5)mm Hg](P＜0.05).Condnsion As an adjuvant therapy of volume resuscitation,norepinephrine is more effective than low dose dopamine and dobutamine in improving splanchnic perfusion.     

肝移植术后缺血型胆道病变的再移植治疗策略

目的探讨肝移植术后缺血型胆道病变的再移植的指征、手术时机的选择及免疫治疗策略。方法回顾性分析我中心自1999年7月至2007年2月10例肝移植术后缺血型胆道病变再移植治疗的病例。供肝植入均采用改良背驮式原位肝移植术,手术当天及第四天给予IL-2受体拮抗剂（舒莱）,术中不用激素冲击,术后采用他克莫司（FK506）,麦考酚酸酯（MMF）和激素（Pred）的常规三联或FK506和MMF两联免疫抑制治疗方案。结果10例病人中8例术后肝功能恢复良好,顺利痊愈出院,最长已存活42个月。2例死亡,分别于术后34、69 d死于严重的混合感染。术前MELD小于25分的7例患者无一例死亡,术前MELD大于25分的3例患者中2例死亡。结论肝移植术后发生缺血型胆道病变行再次肝移植是有效的治疗方法。术前对患者病情的准确评估,尽可能在MELD评分小于25分时进行再次肝移植治疗,有助于提高再移植的疗效。     

非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏内毒素受体表达上调

目的观察大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)伴肝纤维化模型形成过程中,肝脏内毒素受体表达的动态变化,以探讨NASH的发病机制。方法 45只雄性SD大鼠以高脂饮食喂养,分批于实验 8,12、16、24周处死。免疫组织化学法观察CD14表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法观察4型toll 样受体(TLR4)mRNA表达,RT-PCR法和酶联免疫吸附法分别测定肝脏和血清肿瘤坏死因子a(TNF a) 表达。同期正常饮食饲养大鼠作对照。结果实验8周大鼠单纯性脂肪肝阶段肝脏CD14和TLR4的表达就较正常对照上调(25．9±11．9对12．4 5．7、1．75±0．81对O．98±0．33,P<0．01和P<0．05),12周随着脂肪性肝炎的出现进行性增高(61．8±21．9和1．88±0．72,P值均<0．05),于16周达高峰(71．5±21．3 对5．64±0．87,P值均<0．01),24周略有回落(67．7±16．6和4．98±0．72,P值均<0.01)。肝脏和血清 TNF a表达也从8周开始上调,此后一直维持高水平表达。结论大鼠NASH形成过程中,肝脏内毒素受体CD14和TLR4表达逐渐上调。这可能是NASH大鼠内毒素肝损伤敏感性增强的原因之一,在NASH的发病中起了重要作用。     

CCR1趋化因子受体在人肝癌组织中表达及其临床意义

目的了解CCRl趋化因子受体在人肝癌组织中表达分布情况，探讨其表达水平与临床病理特性的关系。方法采用RT-PCR、免疫组化、Western blot技术检测45例肝癌组织及相应癌旁肝组织CCRl趋化因子受体表达及分布情况，并分析其表达水平与临床病理特性的关系。结果RT-PCR、Western blot在肝癌组织及相应癌旁肝组织中均可以检测到CCR1趋化因子受体mRNA及蛋白，肝癌组织表达水平高于癌旁肝组织。免疫组化显示CCR1趋化因子受体主要表达于肝癌细胞膜。CCR1mRNA表达水平与病人性别、年龄、血清AFP水平、肿瘤大小、分期无明显相关性，而与肿瘤是否有包膜（t=2．305，P〈0．05）、门静脉浸润显著相关（t=3．004，P〈0．01）。无门静脉浸润的肝癌组织中，47．4％免疫组化染色强度为＋＋～＋＋＋，而有门静脉浸润的肝癌组织中，80．8％染色强度为＋＋～＋＋＋，两者比较差异具有显著意义（X^2=5．511，P〈0．05）。结论肝癌细胞表达CCR1趋化因子受体，其表达水平与肝癌侵袭性尤其是门静脉浸润相关，有望成为判断肝癌侵袭性及预后的指标。     

毛发周期生物钟

毛发周期生物钟是控制毛发周期性生长的生物学定时装置。它控制着毛发从生长期、退行期、休止期再回到生长期的周期性循环。该文就其具体定位、生物学特点和分子调控机制作一综述。     

肝病患者血清诱导间充质干细胞表达肝细胞特异性标志物的实验研究

目的：观察重型肝病患者血清对人骨髓间充质干细胞（MSCs）的诱导分化作用，探讨人MSCs分离培养、体外扩增的条件和方法。方法：从肋骨分离、培养人骨髓MSCs、体外扩增培养、鉴定，并采用重型肝病患者血清诱导培养，分别在诱导培养0、7、14、21、28天时留取细胞，并采用免疫细胞化学方法检测肝特异性标志物（AFP、Alb、CK-18）、用PAS进行糖原染色实验。结果：诱导后5天、MSCs表现为肝细胞样细胞，随着诱导培养时间的延长，肝特异性标志物逐渐出现和成熟。AFP在7天时表达水平最高，培养14、21、28天时表达逐渐减弱；Alb、CK- 18和糖原随着诱导时间的延长，表达逐渐增强。结论：密度梯度离心，贴壁培养和消化时间控制相结合，是一种较为有效的分离纯化方法。重型肝病患者血清能诱导骨髓MSCs表达肝细胞的特异性标志物。     

急性缺氧对大鼠海马神经元钙激活钾通道的作用

目的:本实验采用膜片钳单通道技术研究缺氧条件下对培养新生大鼠海马神经元钙激活钾通道的作用;方法:取1 ～3天的SD大鼠海马神经元组织,制成细胞悬液,加入含80 %DMEM(dulbecco' s modified eagle' s medium)、20 %小牛血清培养基进行培养,将培养3 ～5天的形态典型的神经元置于对称性高钾溶液中,用膜钳技术记录单通道电流,其通道电流通过膜片钳放大器(CEZ -2200)放大,滤波(3KHz)后,经A/D、D/A转换器输入计算机,采用pClamp6 .0 .6软件采样分析;结果:在细胞贴附式下,应用氰化钠(20μmol/L)造成细胞急性缺氧,在缺氧早期(5 ～20 min)通道开放概率增加(P<0 .01或P<0 .05 ,n=5) ,而缺氧后期(20 ～30 min) ,通道开放概率明显降低,表明缺氧时间对通道的开放概率有明显影响。结论:缺氧早期神经元钙激活钾通道有自身激活作用,当钙激活钾通道激活时,钾离子外流增加,产生膜的复极化,使去极化不易产生,从而稳定细胞膜及降低细胞的兴奋性,这可能是缺氧早期神经元自身的一种代偿机制。     

MAGE-A3抗原肽负载树突状细胞诱导乳腺癌患者免疫应答的研究

目的研究MAGE-A3抗原肽负载对乳腺癌患者树突状细胞(DC)的功能的影响,探讨其是否可以在体外诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答.方法体外培养HLA-A2乳腺癌患者外周血来源的DC,并经孵育携带MAGE-A3抗原肽,用以刺激CTL,用3H-TdR渗入法检测抗原肽负载前后DC刺激同种淋巴细胞增殖能力(MLR),并用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测CTL对靶细胞的杀伤效应.结果DC:T为1:10时,单纯DC组刺激能力显著高于抗原肽负载组DC(DC-P)(P＜0.05),但当DC:T低于1:20时后DC-P组刺激能力显著强于单纯DC组(P＜0.05).DC-P组和单纯DC组所激发的CTL对细胞株MCF-7,Sk-Br-3,MDA-MB-435s的杀伤活性有显著性差异,而对细胞株Raji无显著性差异,DC-P组对细胞株MCF-7,Sk-Br-3,MDA-MB-435s的杀伤活性明显高于对细胞株Raji的杀伤活性.结论负载MAGE-A3抗原肽的DC在体外可以诱导乳腺癌患者特异性的CTL免疫应答,为临床以DC为基础的过继免疫治疗的应用提供理论基础.     

SARS与细菌性典型肺炎的胸部CT特征对比分析

目的：探讨重症急性呼吸综合征(SARS)与细菌性典型肺炎胸部CT特征的异同．方法：回顾性分析28例SARS胸部CT表现与细菌性典型肺炎做对比结果：本组28例患者肺部病变初期多为单发病灶，在右侧外带胸膜下常见。片状磨玻璃样密度病变影存在于各期，而细菌性典型肺炎未见、发病初期和进展期肺容积变小?而细菌性典型肺炎多无此特点。进展期大多数发展为双肺由下至上痛变、恢复期病变由最晚受侵部位消退，遗留纤维化多为最早发生病变部位?而典型肺炎多从近肺门侧开始吸收，进展期局限的肺段、肺叶发展至多个肺叶、肺段，进展较迅速。而细菌性典型肺炎多为单独的肺叶、肺段．恢复期由弥漫性多发病变转变为局限病变，部分病人有肺部纤维化发生，而细菌性典型肺炎大多数吸收较完全，不遗留肺纤维化。结论：SARS所存在的急性间质性肺炎和急性肺炎可利用CT动态检查较准确地与细菌性典型肺炙加以区别。     

D2-43病毒E蛋白在酵母细胞表面的展示

目的：在酵母细胞表面展示登革2型病毒43株(D2—43)的E基因，探索利用酵母表面展示系统建立DNA改组筛选平台的可行性。方法：通过RT-PCR扩增获得D2-43的E基因，将该基因亚克隆至T载体后，再克隆至酵母表面展示载体pYDI，于酿酒酵母EBY100中利用半乳糖进行诱导表达。表达产物采用间接免疫荧光法和FACS进行检测。结果：酵母表面展示产物可与D2-43的腹水抗体特异性地结合；在半乳糖诱导后24h，展示E蛋白的酵母细胞百分数达22．07％。结论：本研究为建立基于酵母表面展示系统的DNA改组筛选平台奠定了基础。