注射用丹参多酚酸配伍注射用血栓通（冻干）通过抑制MMPs对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性的影响及机制

目的:探究注射用丹参多酚酸配伍注射用血栓通(冻干)通过抑制金属基质蛋白酶(MMPs)对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障(BBB)通透性的影响及机制。方法:采用线栓法建立大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO/R)模型。选取雄性Wistar大鼠60只,随机分为假手术组,模型组,依达拉奉组(6 mg·kg-1),丹参多酚酸组(21 mg·kg-1),血栓通组(100 mg·kg-1),丹参多酚酸配伍血栓通组(21 mg·kg-1+100 mg·kg-1),尾静脉注射给药每日1次,连续2 d。采用神经功能(mNSS)评分法观察大鼠神经功能缺损情况;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脑缺血半暗带组织病理学变化;Nissl染色及神经元特异核蛋白(NeuN)荧光染色检测缺血半暗带神经元损伤情况;免疫球蛋白G(IgG)/CD31免疫荧光双染观察缺血半暗带IgG渗漏情况;免疫荧光法观察紧密连接(TJs)相关蛋Occludin,Claudin-5及基底膜(BM)相关蛋白Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ),层粘连蛋白(LN),纤维连接蛋白(FN)表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测金属基质蛋白酶MMP-2,MMP-9蛋白表达情况。结果:与模型组比较,丹参多酚酸组、血栓通组、丹参多酚酸配伍血栓通组可显著改善大鼠脑缺血再灌注损伤神经功能缺损、组织形态学变化,并可抑制神经元损伤,减轻缺血半暗带IgG渗漏,明显升高TJs蛋白Claudin-5,Occludin及基底膜相关蛋白Col-Ⅳ,LN,FN表达(P0.05,P0.01),明显降低MMP-2,MMP-9蛋白表达(P0.05,P0.01);且配伍用药组疗效最佳,对各项指标均有明显的改善,改善程度优于丹参多酚酸或血栓通单独干预。结论:注射用丹参多酚酸、注射用血栓通(冻干)及两者配伍应用可减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,且配伍应用效果优于单独应用,其机制可能与通过抑制MMPs的表达减轻脑微血管内皮紧密连蛋白及基底膜损伤,进而抑制缺血后BBB损伤有关。     

五参方对疲劳紧张所致老年前期大鼠脑MAO-B活性的影响

老年前期是人类45～59岁年龄阶段,是人体由盛至衰的转折时期,老年前期的抗衰防老应该成为现代老年医学研究的一个重要方面。而老年前期的主要致衰因素存在特殊性,如心理生理的过度疲劳导致机体脏器功能失调等,本研究主要探讨疲劳紧张对老年前期大鼠脑MAO-B活性的影响和中?..     

团结一心 创建地市级一等卫生防疫站

十堰市卫生防疫站于1994年由原郧阳地区卫生防疫站和十堰市卫生防疫站合并而成。原地、市两站站建于1970年,建站时间晚,合并时间短,人员素质参差不齐,历史资料零乱,地方财政又十分吃紧,给创建工作带来较大困难。该站在市委、市政府和市卫生局的正确领导下,积极争取有关部门的支持,营造创建氛围,全站上下坚持“以创建促站建,以创建促规范,以创建促发展”的指导思想,团结拼搏、迎难而进、求真务实,在十个月的时间内,集中领导、集中财力、集中人力、集中精力搞创建。于1998年12月15日通过湖北省卫生厅组织的审评,一举达到全国地…     

注射用丹参多酚酸和血栓通注射液联合应用对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织星形胶质细胞和小胶质细胞的影响及作用机制研究

目的研究注射用丹参多酚酸(SLI)和血栓通注射液(XST)合用对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织星形胶质细胞和小胶质细胞的影响及作用机制。方法 250~300 g雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、依达拉奉(EDI,6mg/kg)组、SLI(21 mg/kg)组、XST(100 mg/kg)组、SLI+XST组(1X1S,21 mg/kg+100 mg/kg),采用Longa法建立大脑中动脉栓塞脑缺血再灌注(MCAO/R)模型,缺血1.5 h、再灌注24 h后,尾iv给药,每天1次,连续给药3 d,检测体质量、神经功能评分及死亡率;免疫荧光法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙接头蛋白抗体(IBA-1)的变化;生物反应路径分析(IPA)构建和分析SLI和XST"成分-靶点-脑卒中"复杂网络。结果与模型组相比,1X1S能明显改善脑缺血再灌注大鼠的神经功能障碍,增加大鼠体质量,显著抑制缺血半暗带区域GFAP和IBA-1的表达(P0.01);IPA揭示了SLI和XST治疗脑卒中的相关作用机制。结论 SLI和XST合用对大鼠脑缺血再灌注损伤具有明显保护作用,其机制可能与抑制GFAP和IBA-1的表达及高迁移率族蛋白通路和白细胞介素-8(IL-8)信号通路等有关。     

灯盏细辛药代动力学研究概况

本文从分析成分、测定方法、体内过程、药代动力学特点等4个方面概述了近年对灯盏细辛的药代动力学研究并进行了分析和探讨。     

灯盏细辛总咖啡酸酯对TNF-α诱导脑微血管内皮细胞ICAM-1表达的影响

目的:研究灯盏细辛中总咖啡酸酯(total Caffeoyl quinic acid ester,Caf)对离体培养的大鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cell,BMEC)细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)基因与蛋白表达的影响,初步探讨Caf抗脑缺血炎症损伤的机制。方法:采用肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)建立离体培养的大鼠BMEC炎症损伤模型,选用25μg/mL Caf处理内皮细胞,利用Real time RT-PCR方法检测实验各组ICAM-1mRNA表达,流式细胞仪测定实验各组ICAM-1蛋白荧光强度。结果:Caf可以下调TNF-α诱导的内皮细胞ICAM-1mRNA高表达,并抑制TNF-α诱导的内皮细胞膜ICAM-1蛋白高表达。结论:Caf可以降低由TNF-α诱导的内皮细胞过度表达ICAM-1,可能是其发挥抗脑缺血炎症损伤的部分机制。     

不同性别大鼠中药含药血清对成骨细胞增殖的影响

[目的]观察不同性别大鼠的中药续断含药血清对成骨细胞增殖的影响.[方法]1)制备大鼠含药血清:取雌性与雄性Wistar大鼠各12只,按性别随机分为4组,分别为:雄性给药组,雄性对照组,雌性给药组,雌性对照组,每组各6只,给药组按体质量(4.5g/kg)分别给予续断水提液灌胃、对照组按体质量分别给予等量生理盐水.灌胃1周后取血,离心提取血清.2)分离、培养大鼠的原代成骨细胞.3)将各组大鼠血清稀释为2.5%,5%和10%3个浓度分别培养大鼠成骨样细胞,采用噻唑蓝法(MTT)检测细胞增殖能力.[结果]血清浓度为2.5%时,雌性给药组(0.569 0±0.029 5)与雄性给药组(0.361 3±0.098 3)比较,有显著性差异(P<0.05),雌性给药组与雌性对照组(0.378 7±0.047 6)比较,也有显著性差异(P<0.01);当血清浓度为5%时,雌性给药组(0.879 3±0.100 7)与雄性给药组(O.356 0±0.048 2)比较,有显著性差异(P<0.01),雌性给药组与雌性对照组(0.386 3±0.018 0)比较,也存在显著性差异(P<0.01);当血清浓度为10%时,雌性给药组(0.856 0±0.017 5)与雌性对照组(0.381 7±0.198 6)比较,存在显著性差异(P<0.05).在各浓度的血清中,雄性给药组与雄性对照组之间均无显著性差异.[结论]大鼠的续断含药血清具有刺激成骨细胞增殖的作用.这种作用在雌性大鼠的血清中表达强于雄性大鼠.     

基于PI3K/AKT通路探讨水蛭、地龙提取物对MCAO/R小鼠脑缺血半暗带神经元的保护作用

[目的] 探究水蛭和地龙提取物对MCAO/R小鼠脑缺血半暗带神经元的保护作用及机制。[方法] 选用40只8周龄健康C57BL/cnc雄性小鼠,采用大脑中动脉线栓法制备脑缺血再灌注小鼠模型,造模成功后采用随机数字表法分为假手术组（Sham组）、脑缺血再灌注组（MCAO/R组）、水蛭提取物组、地龙提取物组。各给药组每日尾静脉注射给药1次,连续给药7 d。mNSS评分评价小鼠神经功能损伤,苏木精-伊红（HE）染色检测各组小鼠脑缺血半暗带组织病理变化,TUNEL染色检测小鼠脑缺血半暗带细胞凋亡率,Nissl染色观察神经元受损伤程度,蛋白免疫印迹（West-ern-Blot）法检测B淋巴细胞瘤-2 （Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、Cleaved Caspase-3、Caspase-3、磷脂酰肌醇3激醇（PI3K）、蛋白激酶B （AKT）、p-AKT、神经元核蛋白（NeuN）以及微管相关蛋白2 （MAP2）的蛋白表达情况,免疫荧光检测Bax,Bcl-2表达情况。[结果] 与MCAO/R组比较,水蛭提取物组、地龙提取物组,神经功能缺损、组织形态、神经元损伤情况均有不同程度改善,上调脑缺血半暗带PI3K、Bcl-2、NeuN、MAP2蛋白表达及升高p-AKT/AKT和Bcl-2/Bax比率。[结论] 水蛭、地龙提取物可以改善MCAO/R小鼠脑缺血半暗带神经元损伤,其机制可能是通过激活PI3K/AKT信号通路。     

Caffeic acid ester fraction from Erigeron breviscapus inhibits microglial activation and provides neuroprotection

Objective:To investigate the effects of caffeic acid ester fraction(Caf)from Erigeron breviscapus, mainly composed of dicaffeoylquinic acids(diCQAs),on microglial activation in vitro and focal cerebral ischemia in vivo.Methods:The production of nitric oxide(NO),tumor necrosis factorα(TNF-α),and interleukin-1β(IL-1β)induced by lipopolysaccharide(LPS)treatment in rat primary cultured microglia were measured by Griess reaction or enzyme-linked immunosorbent assay.Cell viability of cortical neurons was measured using AlamarBlue reagent.The behavioral tests and the infarct area of brain were used to evaluate the damage to central nervous system in rat middle cerebral artery occlusion(MCAO)model of cerebral ischemia.Real time polymerase chain reaction was used to determine the expression of inducible nitric oxide synthase(iNOS), TNF-αand IL-1βmRNA in ischemic cerebral tissues.Results:Caf inhibited the production of NO,TNF-αand IL-1βinduced by LPS treatment in primary microglia in a dose-dependent manner.Exposure of cortical neurons to conditioned medium from Caf-treated microglia increased neuronal cell viability(P<0.01)compared with conditioned medium from LPS-treated alone.In MCAO rat model of cerebral ischemia,Caf could significantly improve neurobehavioural performance and reduce percentage infarct volume compared with the vehicle group (P<0.05).Caf could also significantly inhibit the up-regulation of iNOS,TNF-α,and IL-1βgene expressions in ischemic cerebral tissues.Conclusion:Caf could suppress microglial activation,which may be one mechanism of its neuroprotective effect against ischemia.