NRP1基因敲除对放射性肺纤维化进程的影响及其作用机制

目的：观察神经菌毛蛋白1（NRP1）基因对放射性肺纤维化（RIPF）进程的影响,并探讨其在Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路和转化生长因子β1（TGF-β1）/Smads通路介导的上皮间质转化（EMT）发生发展过程和细胞外基质（ECM）沉积中的作用。方法：利用Cre-LoxP重组酶系统构建肺泡Ⅱ型上皮细胞（AT-Ⅱ）特异性敲除NRP1基因的转基因C57BL/6J小鼠并进行鼠尾鉴定,将160只小鼠按照射后不同时间点随机分为4周组、8周组、16周组和24周组,每组小鼠按随机数字表法分为野生型（Con）组、野生型单纯照射（IR）组、NRP1基因特异性敲除（KO-Con）组和NRP1基因特异性敲除+照射（KO+IR）组,每亚组10只。KO-Con和KO+IR组小鼠腹腔注射他莫昔芬特异性敲除AT-Ⅱ细胞NRP1基因,IR组和KO+IR组小鼠采用20 Gy全胸照射建立RIPF小鼠模型。模型构建完成后,利用HE染色法和Masson染色法验证模型是否构建成功;利用免疫组织化学（IHC）法检测小鼠肺组织中Ⅰ型胶原（Col Ⅰ）和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的蛋白表达水平;Western blotting法检测小鼠肺组织中NRP1、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白表达水平;实时荧光定量-聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测小鼠肺组织中NRP1、Col Ⅰ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1、Smad2、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）、神经型钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）mRNA表达水平。结果：HE染色和Masson染色显示RIPF小鼠模型构建成功,IR组小鼠肺部主要为放射性肺炎病理形态表现。与Con组比较,随时间的延长,IR组小鼠肺组织中NRP1蛋白和mRNA表达水平逐渐升高（P<0.05）,24周时达到最高（P<0.01）。与Con组比较,随时间的延长IR组和KO+IR组小鼠肺组织中Col Ⅰ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白及mRNA表达水平逐渐升高（P<0.05或P<0.01）;与IR组比较,随时间的延长,KO+IR组小鼠肺组织中Col Ⅰ、α-SMA、β-catenin、TGF-β1和Smad2蛋白和mRNA表达水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）,但仍高于Con组（P<0.05或P<0.01）。与Con组比较,随时间的延长,IR组和KO+IR组小鼠肺组织中上皮细胞标志物E-Cadherin mRNA表达水平逐渐降低（P<0.05）,间质细胞标志物N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）,但KO+IR组小鼠肺组织中E-CadherinmRNA表达水平明显高于IR组（P<0.05或P<0.01）,N-Cadherin和Vimentin mRNA表达水平均明显低于IR组（P<0.05或P<0.01）。结论：NRP1基因敲除可抑制RIPF的发生发展,其机制可能与调节小鼠肺组织中Wnt/β-catenin和TGF-β1/Smads信号通路的表达进而抑制EMT进程有关。     

老年子宫内膜样腺癌癌组织神经纤毛蛋白2、E盒结合锌指蛋白1对血管生成的作用

目的检测老年子宫内膜样腺癌患者术后组织中神经纤毛蛋白(NRP)2、转录因子E盒结合锌指蛋白(ZEB)1的表达及其对白细胞分化抗原(CD)34阳性的血管生成的作用。方法 133例老年子宫内膜样腺癌患者手术后存留的蜡块及临床资料为研究组,70例老年子宫脱垂或子宫肌瘤患者行子宫全切术后的宫颈组织作为对照组,应用免疫组化方法检测两组中NRP2、ZEB-1的表达和CD34标记的微血管密度(MVD),关注其相关性及临床意义。结果研究组NRP2、ZEB-1蛋白表达阳性率和MVD明显高于对照组,研究组NRP2、ZEB-1表达和MVD均与肿瘤的TNM分期、浸润、脉管累犯和Ki67指数密切相关(P均<0.05)。NRP2、ZEB-1和MVD均具有正相关性。结论子宫内膜样腺癌组织中NRP2、ZEB-1高表达和MVD可以有效促进肿瘤的发生和进展,NRP2和ZEB-1对CD34阳性的血管生成可能有一定促进作用。     

肝硬化腹水的预后

腹水为肝硬化患者最常见的并发症之一,代偿期肝硬化患者大约60％于10年内出现腹水[1],出现腹水后,患者1年和5年内的死亡率分别为15％和44％[2].研究表明,年龄、并发症以及血清胆红素、白蛋白、肌酐等指标均影响腹水患者的预后,Child-Pugh分级、终末期肝病模型(MELD)评分、MELD-钠(MELD-Na)等模型可协助判断患者的预后.现对肝硬化腹水预后的研究进展做一综述.     

药用菊花中绿原酸合成途径关键酶基因的克隆及表达分析

目的探究淹水胁迫对杭菊绿原酸合成途径中的关键酶香豆酰基喹酸酯3’-单加氧酶(C3’H)和莽草酸羟基肉桂酰基转移酶(HCT)基因的表达和活性成分的影响。方法使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法基于杭菊转录组数据库克隆HCT和C3’H基因各2个,其中C3’H酶的2个基因CmC3’H1、CmC3’H2,HCT酶的2个基因CmHCT1、CmHCT2,并进行生物信息学分析;同时在杭菊花芽分化期进行淹水胁迫,以β-actin为内参基因,使用qRT-PCR检测以上4个基因的相对表达量;然后使用HPLC法测定杭菊这4个基因的下游产物及其他指标成分含量。结果通过研究获得了4条基因的完整开放阅读框,并且预测其氨基酸序列的相对分子质量和理论等电点(pI),同时构建蛋白质三级结构模型。qRT-PCR结果显示在花芽分化期对杭菊进行持续3 d的淹水处理会导致以上4个基因在不同生长时期内的表达显著变化。HPLC结果显示淹水处理后的杭菊C3’H和HCT所催化形成的下游产物绿原酸含量显著高于对照组,同时发现其他2种指标成分木犀草苷和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量也显著高于对照组。结论杭菊在淹水胁迫下可以通过调节4种基因的表达来调控下游产物的合成,从而对淹水胁迫做出应答,而且花芽分化期进行淹水胁迫可以显著增强杭菊活性成分的积累。     

甘草提取物对青春期后小鼠精原细胞和精母细胞的影响

为研究甘草对青春期后小鼠精原细胞和精母细胞增殖的影响,取3只健康12日龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠的睾丸进行体外培养,分别暴露于终浓度为0(溶剂对照)、0.2、2、20.μmol/L甘草溶液的培养液中培养7d,并设阳性对照组(卵泡刺激素,FSH,200μg/L)。经BrdU免疫染色,检测精原细胞的增殖情况;经抗-Mili-抗体免疫染色,检测次级精母细胞和精细胞的分化情况。结果显示,与溶剂对照组比较,各浓度甘草染毒组小鼠睾丸精原细胞的Brdu阳性细胞率较高,次级精母细胞和精细胞的Mili阳性细胞率较高,差异均有统计学意.义(P<0.01);且呈剂量-效应关系。提示甘草提取物可在青春期后小鼠减数分裂过程中促进精原细胞的增殖;促进初级精母细胞的减数分裂,分化成次级精母细胞和精细胞。     

哮喘患儿肺炎支原体和衣原体感染状况调查

目的探讨哮喘患儿肺炎支原体和衣原体感染的相关性及临床特点。方法选择2014年1月-2016年1月医院收治的哮喘患儿1286例,支原体和(或)衣原体感染哮喘患儿824例设为试验组,并与非肺炎支原体或(和)衣原体感染患儿462例设为对照组,比较两组患儿的临床资料,总结哮喘患儿肺炎支原体和衣原体感染的临床特点。结果 1286例哮喘患儿中,出现肺炎支原体或(和)衣原体感染824例,感染率为64.07%,其中单纯肺炎支原体感染583例,单纯肺炎衣原体感染201例,40例患儿同时感染肺炎支原体和衣原体;试验组患儿年龄段1岁多于对照组,对照组实验室指标嗜酸性粒细胞计数与C-反应蛋白分别为(284.24±48.33)×106/L与(6.84±0.73)mg/L低于试验组(396.34±64.63)×106/L、(7.94±0.83)mg/L;白细胞计数和前降钙素原(PCT)分别为(7.84±0.83)×109/L和(0.72±0.07)μg/L高于研究组(P0.05),两组胸片胸腔积液、云雾状改变、肺间质浸润、肺间质和肺实质混合浸润、扇形浸润、肺实质浸润,差异均有统计学意义(P0.05);试验组患儿临床表现发热96.84%、头痛60.92%、咳嗽71.48%、胸痛30.70%高于对照组(P0.05);肺炎支原体感染哮喘患儿流鼻涕22.13%、喘鸣13.38%高于衣原体感染患儿12.44%、6.97%,腹泻8.92%、呕吐8.40%均低于衣原体感染患儿17.41%、14.43%(P0.05)。结论哮喘患儿并发肺炎支原体和(或)衣原体感染率较高,且具有一定的临床特征,可为临床诊断和治疗提供一定的参考,提高患儿经验性用药选择准确性。     

慢性乙型肝炎与乙肝肝硬化HBV RNA和HBV DNA的差异及相关性分析

目的 探讨慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）与乙肝肝硬化乙型肝炎病毒RNA（HBV RNA）和乙型肝炎病毒DNA（HBV DNA）之间的差异及相关性。方法 选取33例CHB为对照组,25例乙肝肝硬化为观察组,两组患者均持续使用强效核苷及核苷酸类药物（Nucleostide Analogues,NAs）治疗半年以上,比较两组HBV RNA、HBV DNA和乙肝病毒表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBsAg）阳性率及表达水平。并采用Spearman法对HBV RNA、HBV DNA、HBsAg、肝功指标进行相关性分析,ROC曲线分析各指标在乙肝肝硬化中的诊断价值。结果 观察组HBV RNA、HBV DNA阳性率、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate transaminase,AST）的表达水平均高于CHB组,差异均有统计学意义（P<0.05）;其他指标之间均无统计学意义（P>0.05）。相关性分析显示观察组HBV RNA与HBV DNA呈正相关（r=0.715,P<0.01）,与其余肝功指标均无相关性（P>0.05）。ROC曲线分析HBV RNA、HBV DNA与AST对乙肝肝硬化的鉴别诊断曲线下面积AUC分别为0.746（95%CI：0.613~0.880）、0.729（95%CI：0.591~0.866）和0.640（95%CI：0.494~0.786）,HBV RNA联合HBV DNA鉴别诊断乙肝肝硬化的AUC为0.754（95%CI：0.623~0.885）面积最大,诊断价值最高。结论 乙肝肝硬化与CHB的HBV RNA和HBV DNA水平存在明显差异,两者联合在CHB与乙肝肝硬化的鉴别诊断价值更高,HBV RNA可考虑作为常规检测在临床推广。     

自我导向学习理论结合目标教学在产科新护士带教中的应用

目的　探讨自我导向学习理论结合目标教学在产科新护士带教中的作用。方法　选取2018年6月到2019年6月首都医科大学宣武医院产科新入职的36名护士作为对照组,另选取2019年7月到2020年7月新入职的32名护士作为观察组。对照组采取传统带教,观察组采取自我导向学习理论结合目标教学。比较两组理论知识与实践技能考核成绩、带教前后自我导向学习评定量表（self-rating scale for self-directed learning,SRSSDL）评分、产科专科护士核心能力评分及对带教的满意度。用SPSS 20.0进行t检验、秩和检验和卡方检验。结果　带教后,观察组理论知识[（92.57±5.36）vs.（85.13±6.17）]与实践技能考核成绩[（90.58±6.65）vs.（84.22±5.94）]均高于对照组（P<0.05）。带教后,两组SRSSDL量表各维度评分和总分及产科专科护士核心能力各条目评分均较带教前升高（P<0.05）,且观察组高于对照组（P<0.05）。观察组对教学的满意度[93.75%（30/32）]高于对照组[61.11%（22/36）]（P<0.05）。结论　自我导向学习理论结合目标教学应用在产科新护士带教中,可以巩固新护士理论知识,提升其实践技能水平、自我导向学习能力和产科专科护士核心能力,且教学满意度高。     

健康志愿者禁食禁饮后饮用不同液体胃排空的比较

正随着麻醉技术的不断发展与进步,目前多个国家麻醉医师学会建议麻醉诱导前2 h可选择性推荐患者进清质饮食~([1]),国内多个ERAS专家共识也建议术前2～3 h推荐无胃肠动力障碍患者可饮清流质不超过400 ml。但临床工作中由于医护人员对术前口服清流质饮料的定义缺乏统一标准,使用何种配方的溶液及饮用溶液的最大安全容量尚无定论,从而制约了该方案在临床上的广泛应用。本研究通过观察健康志愿者禁饮食后,饮用不同液体及不同容积的胃排空趋势,探索术前禁饮食