| 药用菊花中绿原酸合成途径关键酶基因的克隆及表达分析 |
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| 引用本文： | 武立伟,汪涛,郭巧生,周欣悦,严佳敏,刘婧,邹庆军,张文燕,王蕊.药用菊花中绿原酸合成途径关键酶基因的克隆及表达分析[J].中草药,2019,50(12):2959-2966. |
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| 作者姓名： | 武立伟 汪涛 郭巧生 周欣悦 严佳敏 刘婧 邹庆军 张文燕 王蕊 |
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| 作者单位： | 南京农业大学 中药材研究所, 江苏 南京 210095,南京农业大学 中药材研究所, 江苏 南京 210095,南京农业大学 中药材研究所, 江苏 南京 210095,南京农业大学 中药材研究所, 江苏 南京 210095,南京农业大学 中药材研究所, 江苏 南京 210095,南京农业大学 中药材研究所, 江苏 南京 210095,南京农业大学 中药材研究所, 江苏 南京 210095,南京农业大学 中药材研究所, 江苏 南京 210095,南京农业大学 中药材研究所, 江苏 南京 210095 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金青年科学基金项目（81503180）；中央高校基本科研业务费专项资金资助项目（KJQN201643，KYZ201608） |
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| 摘 要： | 目的探究淹水胁迫对杭菊绿原酸合成途径中的关键酶香豆酰基喹酸酯3’-单加氧酶(C3’H)和莽草酸羟基肉桂酰基转移酶(HCT)基因的表达和活性成分的影响。方法使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法基于杭菊转录组数据库克隆HCT和C3’H基因各2个,其中C3’H酶的2个基因CmC3’H1、CmC3’H2,HCT酶的2个基因CmHCT1、CmHCT2,并进行生物信息学分析;同时在杭菊花芽分化期进行淹水胁迫,以β-actin为内参基因,使用qRT-PCR检测以上4个基因的相对表达量;然后使用HPLC法测定杭菊这4个基因的下游产物及其他指标成分含量。结果通过研究获得了4条基因的完整开放阅读框,并且预测其氨基酸序列的相对分子质量和理论等电点(pI),同时构建蛋白质三级结构模型。qRT-PCR结果显示在花芽分化期对杭菊进行持续3 d的淹水处理会导致以上4个基因在不同生长时期内的表达显著变化。HPLC结果显示淹水处理后的杭菊C3’H和HCT所催化形成的下游产物绿原酸含量显著高于对照组,同时发现其他2种指标成分木犀草苷和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量也显著高于对照组。结论杭菊在淹水胁迫下可以通过调节4种基因的表达来调控下游产物的合成,从而对淹水胁迫做出应答,而且花芽分化期进行淹水胁迫可以显著增强杭菊活性成分的积累。
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| 关 键 词： | 杭菊 C3''H HCT 基因克隆 淹水胁迫 多酚有机酸 活性成分 |
| 收稿时间： | 2018/11/25 0:00:00 |
Cloning and expression of key enzyme genes for chlorogenic acid synthesis in Chrysanthemum morifolium |
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| WU Li-wei,WANG Tao,GUO Qiao-sheng,ZHOU Xin-yue,YAN Jia-min,LIU Jing,ZOU Qing-jun,ZHANG Wen-yan and WANG Rui.Cloning and expression of key enzyme genes for chlorogenic acid synthesis in Chrysanthemum morifolium[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2019,50(12):2959-2966. |
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| Authors: | WU Li-wei WANG Tao GUO Qiao-sheng ZHOU Xin-yue YAN Jia-min LIU Jing ZOU Qing-jun ZHANG Wen-yan and WANG Rui |
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| Institution: | Institute of Chinese Medicinal Materials, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China,Institute of Chinese Medicinal Materials, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China,Institute of Chinese Medicinal Materials, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China,Institute of Chinese Medicinal Materials, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China,Institute of Chinese Medicinal Materials, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China,Institute of Chinese Medicinal Materials, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China,Institute of Chinese Medicinal Materials, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China,Institute of Chinese Medicinal Materials, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China and Institute of Chinese Medicinal Materials, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Chrysanthemum morifolium Ramat C3''H HCT gene clone flooding stress polyphenol organic acid active ingredients |
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