人早幼粒细胞cDNA文库的构建及其鉴定

目的：构建人早幼粒细胞HL60的cDNA文库,阐明文库内相关基因在急性早幼粒细胞白血病（APL）发生发展中的相关机制。方法：采用Trizol法提取HL60细胞总RNA,离心柱法分离纯化样本中的mRNA,逆转录PCR法合成cDNA第一链,酶促法直接合成cDNA第二链,胶回收目的长度的cDNA片段后将其与pPR3-N载体连接,通过同源重组方法在酵母Y187菌株中构建人早幼粒细胞cDNA文库。将培养的菌液涂布于LB平板进行库容量鉴定,PCR法鉴定插入片段大小及分布。结果：提取到的HL60细胞RNA条带清晰无降解且弥散度低,以纯化后的细胞mRNA为模板成功合成cDNA,经胶回收cDNA片段后顺利将其与pPR3-N载体连接。将重组载体转化至酵母菌株Y187,通过同源重组方法在菌株中成功构建人早幼粒细胞cDNA文库。在原始电转化菌稀释100倍后取10 μL涂板,共长约250个克隆子,库容量为2.5×10⁶ CFU·mL^-1,转化后原始菌液共计5 mL,总库容量为1.25×10⁷ CFU。文库的插入片段电泳检测,平均插入片段大于1200 bp,阳性率为100%。结论：成功构建人早幼粒细胞的cDNA文库,为白血病的发病机制及治疗机制的研究奠定了基础。     

公共事业管理专业认同感现状及影响因素研究

目的　了解公共事业管理专业学生专业认同感现状及影响因素。方法　采取分层整群抽样法,对哈尔滨某医科大学公共事业管理专业的１１５名本科生进行问卷调查,问卷内容包括一般情况及大学生专业认同感。采用SPSS 18.0进行t检验、单因素方差分析和多元线性回归的方法分析公共事业管理专业学生专业认同感的影响因素。对部分研究对象进行深入访谈,探寻影响公共事业管理专业学生专业认同感的深层次影响因素。结果　哈尔滨某医科大学公共事业管理专业本科生专业认同感整体水平不高,专业认同感得分为（3.25±0.56）,其中认知性维度得分为（3.41±0.69）,情感性维度得分为（3.21±0.78）,行为性维度得分为（3.24±0.71）,适切性维度得分为（3.13±0.72）。多因素分析结果显示,不同年级、学习成绩、是否自主选择本专业和是否独生子女对其专业认同感有显著影响。其中四年级、学习成绩好（b=-0.276;P<0.01）、自主选择该专业（b=-0.277;P<0.01）、独生子女学生（b=-0.233;P<0.05）专业认同感得分高。年级中,以最高年级（四年级）为参照的结果显示,二年级和三年级学生的专业认同感得分明显低于四年级（b=-0.296,b=-0.369;P<0.05）,但是一年级与四年级之间未见显著差异（b=-0.008;P>0.05）。此外,专业认同感得分高的学生未来选择本专业就业的可能性高于得分低的学生[（3.39±0.53） vs. （2.92±0.49）;t=4.414,P<0.01]。结论　应加强对公共事业管理的专业宣传,优化课程设置,增加岗位体验,继而提升公共事业管理专业学生的专业认同感,最终为公共卫生管理领域的人才储备提供保障。     

循证医学理念在血液专业学位研究生培养中的应用

以循证医学为基础的临床研究模式能有效调动学生学习主动性,培养学生获取信息、解决问题的能力,并在临床研究过程中加强临床科研创新思维的培养。此外,循证医学临床研究模式也有助于导师更新知识体系,保持旺盛的临床创新思维和持续的研究能力。将循证医学临床研究模式应用于血液病学专业学位研究生培养,通过立题、申请新技术、获得伦理号、注册临床研究号、病例入组和统计分析数据,有助于研究生掌握临床研究的主要方法和实施流程,为后续的研究奠定坚实的基础。     

过氧化物酶体增殖物PGC-1α对肝缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的 探讨过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)对肝缺血再灌注损伤的保护作用.方法 构建大鼠肝缺血再灌注损伤模型,恢复灌注后12 h,以蛋白免疫印迹(Western blot)检测PGC-1α表达情况,并检测肝脏活性氧、三磷酸腺苷(ATP)水平及血丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性变化,评估肝功能情况.另一方面,构建PGC-1α慢病毒过表达载体,并在大鼠缺血再灌注前转染,于缺血再灌注后,再以Western blot检测PGC-1α表达,肝脏活性氧、ATP水平和血肝酶活性变化,评估PGC-1α表达对肝缺血再灌注损伤的保护作用.结果 缺血再灌注肝脏PGC-1α表达较假手术组及对照组(未手术)明显降低(均P<0.05),同时肝脏活性氧族水平及ALT活性显著升高,而肝ATP产生减少(均P<0.05).PGC-1α慢病毒过表达载体转染显著上调缺血再灌注肝脏PGC-1α表达,同时肝脏活性氧族水平及ALT活性较未转染组显著降低,而肝ATP产生增加(均P<0.05).结论 PGC-1α表达有利于保护肝缺血再灌注损伤.     

妊娠期肝内胆汁淤积症患者胎盘组织中瘦素mRNA的表达及意义

目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症（ ICP）患者胎盘组织瘦素mRNA的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量（ RTQ－PCR）法检测2014年3月至2016年3月安庆市立医院收治的30例ICP孕妇和12例正常妊娠孕妇胎盘瘦素mRNA表达水平,其中ICP患者按不同临床分度、不同孕周分类。结果①瘦素mRNA在42例胎盘组织中均有表达;②15例轻度ICP组瘦素mRNA水平（0.2206±0.1701）U／μL、15例重度ICP组（0.1769±0.1470）U／μL及12例正常妊娠组的瘦素mRNA水平（0.1545±0.1773）U／μL相比,差异无统计学意义（P＞0.05）;③13例ICP足月产组瘦素mRNA水平（0.2855±0.1734）U／μL、17例ICP早产组为（0.1325±0.1087）U／μL、正常妊娠组为（0.1545±0.1773）U／μL,3组比较差异有统计学意义（F＝4.121,P＝0.024）,但两两比较, ICP早产组与正常妊娠组差异无统计意义（P＞0.05）。结论瘦素在足月产ICP患者中呈高表达趋势,缺氧可能是主要原因,胎盘组织中瘦素mRNA表达水平在一定程度上反应了胎盘功能,可能参与ICP发病。     

缺氧诱导因子-1α和PTEN、P53在急性髓性自血病骨髓基质细胞中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和PTEN、P53在急性髓性白血病骨髓基质细胞中的表达及意义.方法 分离培养28例急性髓性白血病患者和22例正常对照样本骨髓基质细胞,RT-PCR检测HIF1αmRNA的表达,免疫组织化学技术检测基质细胞HIF-1α和PTEN、P53蛋白表达和分布.结果 急性髓细胞白血病(AML)组HIF-1αmRNA和蛋白表达率显著高于对照组(P＜0.05),AML组P53蛋白表达率显著高于对照组(P＜0.05),而PTEN表达率显著低于对照组(P＜0.01).HIF-1α在骨髓基质细胞的阳性表达与P53的高表达和PTEN的低表达相关联(P＜0.05).结论 HIF-1α可能是白血病异常骨髓造血微环境形成过程中的重要调控因子,HIF-1α的表达可能与PTEN和P53基因表达调控相关.     

产科分娩镇痛的现状

分娩为一复杂的生理过程,产程中强烈的疼痛不仅可导致产妇焦虑烦躁,全身衰竭,而且可使宫缩不协调,产程延长,胎儿宫内窘迫以及母儿酸碱平衡失调等。因此,有效控制分娩疼痛是十分必要的。分娩镇痛有多种方法,归纳起来有2大类:非药物分娩镇痛法和药物分娩镇痛法,分述如下。1　非药物分娩镇痛法即精神预防性分娩镇痛法,早在1933年Ｒｅａｄ[1]就提出“自然分娩法”照顾支持产妇,消除恐惧,以后又出现按摩法,催眠术等。目前国际上推荐回归自然的Ｄｏｕｌａ[2]陪伴分娩,即产前开始宣教,在分娩过程中给予生理上、感情上、心理上的支持,在全身放松的情…     

氧化亚氮吸人分娩镇痛效果及对母儿的影响

目的研究氧化亚氮吸人分娩镇痛的效果和对母儿的影响。方法随机地选择60例产妇作为观察组;50例产妇作为对照组,对照组除不给氧化亚氮吸人外,其他产科处理措施与观察组相同。观察比较两组的产痛程度、产程时间、分娩方式、新生儿Apgar评分,产后出血量、新生儿窒息率等。结果观察组的痛度评分明显低于对照组(P<0．001)其他方面两组之间无显著差异性。结论氧化亚氮吸人镇痛对母儿均无不良影响,是一种理想的分娩镇痛方法,值得产科临床推广使用。