用流式细胞术评价一种新型人工肝材料的生物相容性

目的通过用流式细胞术(FCM)观察丙稀酰胺接枝改性聚丙烯膜 (PP-g-AAm)的生物相容性,来评价FCM在检测医用生物材料的生物相容性中的作用.方法:用材料浸提液培养L929细胞24 h后用FCM检测细胞增殖周期; 用改性前、后的膜材料分别与新提取的PRP(富含血小板血浆)和PBMC(末梢血单个核细胞)孵育培养后,用FCM分别检测血小板和PBMC的激活标志物CD62P、CD63和CD69.结果:PP-g-AAm 组的PI与阴性组及空白对照组比较差异无统计学意义(P=0.063,P=0.053),而与阳性对照组比较差异有统计学意义(P=0.002).PP-g-AAm膜组CD62P、CD63及CD69的表达率明显少于对照组(P=0.042, P=0.004,P=0.013).结论:PP-g-AAm无细胞毒性并具有良好的生物相容性,FCM在生物材料的生物相容性评价中有着广泛的应用价值.     

减毒活菌卡介苗对哮喘小鼠气道炎症及外周血Th1/Th2平衡的影响

诸多研究表明，辅助T细胞(Th2)占优势的Th1／Th2失衡是哮喘发病的重要机制。减毒活菌卡介苗(BCG)是一很强的Th1型细胞诱导剂，本研究意在观察BCG对小鼠哮喘模型气道炎症及外周血Th1／Th2平衡的影响。     

不同取代级羟乙基淀粉对血小板膜糖蛋白表达的影响

目的探讨不同取代级羟乙基淀粉对血小板凝血功能的影响。方法择期行外科小手术患者60例,ASAⅠ级,年龄25～45岁,体重51～70 kg,随机分为乳酸钠林格氏液组(LR组)、HES 200／0．5组(H组)和HES 130／0．4组(V组),每组20例。麻醉诱导后,3组患者分别静脉输注乳酸钠林格氏液、HES 200／0．5和HES 130／0．4 20 ml·k-1,30-60 min内输注完毕。采用流式细胞术测定3组患者在术前(T1,基础值)、输注完毕后15 min(T2)、输注完毕后6 h(T3)各时点静脉血中静息态血小板与活化态血小板CD42b、CD61／41、CD62p的表达。结果3组患者输注前后静息态血小板膜糖蛋白表达差异无统计学意义(P>0．05)。与基础值比较,H组和V组T1时ADP活化血小板CD42b、CD61/41、CD62p表达降低(P<0．05或0．01),H组T3时以上指标表达降低(P<0．01),V组T3时以上指标表达差异无统计学意义(P>0．05)。结论HES 130／0．4抑制血小板凝血功能的程度较HES 200／0．5低。HES 130／0．4液体治疗有助于降低术后出血的发生。     

Shp-2过度表达与人白血病细胞恶性增殖相关性研究

目的研究Shp-2酪氨酸蛋白磷酸酶对白血病细胞恶性增殖的影响。方法应用W estern b lot和RT-PCR技术分析白血病细胞和正常造血细胞样本Shp-2蛋白和mRNA表达水平;采用反义寡核苷酸技术和流式细胞术分析下调Shp-2表达对白血病细胞增殖与凋亡的影响。结果与正常造血细胞相比,磷酸化Shp-2蛋白在白血病细胞中呈过度表达状态,Shp-2与-βactin比值在白血病组(n=36)、正常骨髓造血细胞组(n=8)及正常外周血细胞组(n=12)分别为1.23±0.74、0.163±0.088和0.034±0.045。同样,Shp-2 mRNA在白血病细胞样本中呈高表达状态,其与-βactin比值在白血病组(n=26)和正常造血细胞组(n=25)分别为1.242±1.057和0.046±0.076。用Shp-2特异性反义寡核苷酸阻断Shp-2表达后,白血病细胞出现明显凋亡和生长抑制。结论Shp-2在人白血病细胞中呈过度表达状态,其表达水平可能与白血病细胞增殖程度密切相关。     

浙江蝮蛇毒诱导人白血病Jurkat细胞凋亡的体外实验研究

目的：研究浙江蝮蛇毒诱导人白血病Jurkat细胞凋亡的作用及机理，方法：采用MTT法测定IC50值及生长曲线，流式细胞仪（FCM)Annexin Ⅴ FITC/PI法检测细胞凋亡发生率，PI染色法检测细胞周期，同时用流式细胞汁FCM及Western-blot检测Bcl-2蛋白表达。结果：浙江蝮蛇毒能抑制Jurkat细胞生长，且呈剂量依赖关系，并能诱导人白血病Jurkat细胞凋亡，48h时作用最强，此时Bcl-2蛋白表达下降，随后此作用减弱，低浓度作用下细胞逐渐恢复生长，结论：浙江蝮蛇毒能诱导人白血病Jurkat细胞凋亡，且呈剂量依赖关系，此作用与Bcl-2蛋白表达下调有关。     

高剂量化疗联合双次自体外周血干细胞移植治疗骨肉瘤的疗效观察

近年来 ,骨肉瘤的治疗技术进展较快 ,生存率较以前大大提高 ,但仍有很多患者常发生远处转移 ,Ⅲ期骨肉瘤患者的 5年生存率仅 2 0 %左右[1,2 ] 。骨肉瘤对化疗较敏感 ,在一定范围内 ,增加化疗药物的剂量 ,可以增加其对肿瘤细胞的杀伤作用。自体造血干细胞移植 (ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌｔｒａｎｓｐｌａｎ ｔａｔｉｏｎ ,ＡＨＳＣＴ )使骨肉瘤患者应用高剂量化疗 (ｈｉｇｈｄｏｓｅｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ,ＨＤＣ )成为可能。我们于 2 0 0 0年 8月至 2 0 0 1年 5月运用高剂量化疗 (ＨＤＣ )联合双…     

启动子区5′CpG岛去甲基化对人结肠癌细胞生物学表型的影响

目的:探讨DNA启动子区5′CpG岛甲基化状态与人结肠癌RKO细胞增殖凋亡等生物学特征的关系。方法:应用特异性DNA甲基转移酶(DNMTs)抑制剂-5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理肠癌RKO细胞72h,甲基化特异性PCR(methylation-specificPCR,MSP)及DNA测序法分析p16/CDKN2基因CpG岛甲基化状态;MTT、FCM、荧光染色及透射电镜检测启动子区去甲基化后细胞生长、形态和细胞周期凋亡的影响。结果:DNMTs抑制剂能较好地逆转启动子区胞嘧啶甲基化状态;CpG岛去甲基化后能明显地抑制肠癌细胞的生长,增加细胞群体倍增时间(P<0.01),诱导肠癌细胞凋亡,影响肠癌细胞周期分布,并具有良好的量效依赖关系。结论:通过逆转CpG岛高甲基化能有效地抑制肠癌细胞增殖,为临床治疗大肠癌提供新的作用靶点。     

AnnexinV标记法检测骨髓增生异常综合征造血细胞凋亡

近年来 ,国外不少学者研究了骨髓增生异常综合征 (MDS)造血细胞凋亡的情况 ,但国内的研究尚少。 1 997年以来 ,我们以 Annexin V标记、流式细胞仪 (FCM)检测法 ,测定了 2 0例 MDS患者骨髓造血细胞的凋亡状况。现报道如下。1　资料和方法1 .1 　 临床资料患者组 2 0例 ,男 1 1例 ,女 9例 ;年龄 1 8～ 70岁。均为本院住院或门诊病例 ,经骨髓常规、骨髓活检和染色体检查而确诊。难治性贫血 (RA) 1 2例 ,伴原始细胞增多的 RA(RAEB) 6例 ,转化中的 RAEB(RAEB- t) 2例。对照组 1 0例 ,均为再生障碍性贫血患者的正常家属 ;男女各 5例 ;…     

激光照射对弓形虫速殖子作用的流式细胞分析

用流式细胞术 (FCM)检测分析了激光照射对弓形虫 RH株速殖子的作用。结果显示 ,激光照射后弓形虫速殖子群体 DNA含量分布发生改变 ,DNA含量的第 1道数峰值 (平均值 )左移 ,第 1峰值分布范围内速殖子数占总速殖子数百分率增加 ,3.5 W和 4.5 W剂量照射组与对照组相比差异存在显著性 (P<0 .0 5 )。提示激光照射能抑制弓形虫 DNA的合成 ,减少弓形虫群体 DNA的含量     

1,25-二羟基维生素D_3诱导HL-60细胞分化并下调nm23基因的表达

目的　观察 1,2 5 二羟基维生素D3 [1,2 5 (OH) 2 D3 ]对白血病细胞株HL 6 0的诱导分化作用并探讨其机制。方法　通过MTT试验、细胞形态观察、表面标志分析和硝基四氮唑蓝 (NBT)还原反应 ,观察 1,2 5 (OH) 2 D3 作用后HL 6 0细胞增殖的改变和分化情况 ;通过流式细胞仪和RT PCR检测细胞周期和nm2 3基因表达的变化。结果　HL 6 0细胞经 1,2 5 (OH) 2 D3 作用后增殖受抑制、向成熟单核细胞系分化、细胞被阻滞在G1 期、nm2 3基因的表达下调。结论　 1,2 5 (OH) 2 D3 对HL 6 0细胞株具有诱导分化作用 ,其作用机制可能与下调nm2 3基因的表达有关。