小鼠CCL20 mRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立

目的:建立检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20(CC chemokine ligand 20)mRNA的实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)的方法。方法:分离小鼠脂肪组织细胞,经PMA和离子霉素刺激4 h后收集细胞提取总RNA并逆转录为cDNA。采用qRT-PCR方法检测趋化因子CCL20 mRNA的表达水平。评价该方法的特异性,同时应用该方法检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20mRNA相对表达水平。结果:建立了小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20的SYBR Green实时荧光定量PCR检测方法,结果显示该方法的熔解曲线为单峰,同时核酸电泳显示一条特异性条带。检测结果表明高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20的相对表达水平明显高于正常饮食对照组(t=3.02,P<0.05)。结论:建立了检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20 mRNA的实时荧光定量PCR方法,特异性好、灵敏性强,为进一步研究小鼠CCL20的生物学功能提供了实验基础。     

促红细胞生成素上调海马pCREB表达和改善脑缺血小鼠认知功能

目的: 探讨促红细胞生成素(EPO)对小鼠脑缺血所致的认知功能障碍和海马神经元损伤的保护作用及机制。方法: C57BL/6绿色荧光蛋白转基因小鼠随机分为假手术(sham)组、脑缺血/再灌注(I/R)组和EPO治疗组;采用双侧颈总动脉阻断(2-VO)方法复制小鼠全脑缺血模型,跳台实验测试小鼠学习记忆能力,Nissl染色检测海马神经元存活情况,Western blotting检测磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(pCREB)表达水平,激光共聚焦显微镜和Neurolucida软件分析检测海马CA1区神经元形态及树突棘的变化。结果: 脑缺血导致小鼠学习记忆能力下降,海马CA1区神经元迟发性死亡和树突棘丢失;EPO治疗能显著提高脑缺血小鼠的学习记忆能力,减少脑缺血所致的海马CA1区神经元死亡和树突棘的丢失,显著上调海马CA1区神经元pCREB蛋白的表达。结论: EPO可能通过上调pCREB的表达来保护神经元损伤、防止神经元树突棘的丢失,进而改善脑缺血小鼠的认知功能。     

大鼠线栓法局灶性脑缺血再灌注损伤模型改进的实验研究

目的提供一种比较简易的大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的制备方法。方法40只SD大鼠线栓法制作局灶性脑缺血再灌注损伤模型,选择距颈总动脉（CCA）分叉1cm处切口,不分离颈外动脉（ECA）和颈内动脉（ICA）,且不结扎颈外动脉的手术方法,通过调整进线角度使线栓从CCA顺行进入ICA,进而入颅堵塞大脑中动脉（MCA）。造模后缝合皮肤,再灌注时拔出一定长度栓线,使栓线回至CCA分叉处即可。通过神经功能检测、2,3,5-三苯基四氮唑（TTC）染色和病理学检查等方法评价该模型的可靠性。结果大鼠手术后神经功能缺损明显,神经功能评分集中,TTC染色稳定。结论该改良方法手术简单,创伤小,缺血效果可靠,可用于脑缺血再灌注损伤的研究。     

螺旋CT与超声对急性胰腺炎的诊断价值分析

目的:总结螺旋CT与超声对急性胰腺炎的诊断价值.方法:2010年3月～2011年4月收治经螺旋CT与超声确诊的急性胰腺患者55例,对螺旋CT与超声检查情况进行分析.结果:55例急性胰腺患者经CT检查,共检出急性胰腺患者51例(92.7%),其中急性水肿型34例(91.9%),急性出血性坏死型17例(94.4%).超声检查共检出急性胰腺患者43例(78.2%),其中急性水肿型31例(83.8%),急性出血性坏死型12例(66.7%).二者在急性水肿型检出发方面比较无显著性差异(P＞0.05),但急性出血性坏死型检出方面和总检出率方面比较有显著性差异(P＜0.05).结论:CT和超声是诊断急性胰腺炎主要方法,但CT具有很高的敏感性,是临床首选诊断方法.     

HPLC法测定康妇膜中盐酸小檗碱的含量

目的:建立测定康妇膜中盐酸小檗碱含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent extend C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(50:50,每100mL加十二烷基磺酸钠0.1g),柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1,检测波长为265nm,结果:盐酸小檗碱进样量在0.12825～0.76590μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9999);平均加样回收率为98.04%,RSD=1.20%(n=6)。结论:本方法简便、准确、重复性好,可用于康妇膜的质量控制。     

输卵管妊娠的非血管介入治疗

目的 探讨经输卵管途径治疗输卵管妊娠的可行性及临床疗效.方法 采用介入输卵管插管方法,插管成功后注入甲氨喋呤60 mg治疗31例输卵管妊娠.结果 28例获得成功,3例中转手术,未出现严重并发症.结论 经输卵管插管治疗输卵管妊娠方法简便,安全、有效.     

神经疾病临床研究回顾—透视2008（一）

近年来随着神经科学临床和基础研究水平的不断提高，极大推动了神经系统疾病治疗的发展。2008年大量的相关研究成果有了令人振奋的进展。本文对2008年发表的一些重要相关文献进行回顾，以利从事临床神经科学研究的同行更好了解专业进展。     

神经疾病临床研究回顾——透视2008(一)

近年来随着神经科学临床和基础研究水平的不断提高,极大推动了神经系统疾病治疗的发展.2008年大量的相关研究成果有了令人振奋的进展.本文对2008年发表的一些重要相关文献进行回顾,以利从事临床神经科学研究的同行更好了解专业进展.     

6β-乙酰氧基去甲托烷呼吸抑制效应

6β-乙酰氧基去甲托烷(6β-acetoxynortropane,6β-AN)是一种新型M2受体激动剂,兔10ug·kg^-1iv,犬2,5,20ug·kg^-1iv均导致呼吸频率、潮气量、每分通气量明显减少(P<0.05或0.01),呈剂量依赖关系。pO₂降低,pCO₂升高。较小剂量给兔0.5,1.0,2.0,4.0ug·kg^-1iva和犬0.25,0.5,1.0ug·kg^-1iva亦产生与静脉给药相似的呼吸抑制效应。AF-DX116能拮抗6β-AN的呼吸抑制作用,PZ则与6β-AN产生协同作用。表明6β-AN有呼吸抑制作用,并可能与其激动呼吸中枢M2受体有关。     

灯盏花素对去甲肾上腺素诱导的大鼠心肌c-fos表达的影响

目的了解灯盏花素对去甲肾上腺素(NE)诱导的心肌c-fos基因表达的影响.方法通过离体心脏灌流,采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法,测定左心室c-fos表达水平.结果灯盏花素明显减弱NE诱导的大鼠心肌c-fos基因表达.结论灯盏花素可抑制NE诱导的心肌c-fos基因表达.