鼻咽癌血清miRNA表达谱分析

目的:探索血清中鼻咽癌特异性分子标志物,为其早期诊断提供依据.方法:采用miRNA表达谱芯片分析鼻咽癌患者和正常人的血清miRNA,应用GenePix pro V6.0软件(Axon)进行数据处理与分析,寻找差异表达的miRNA.结果:鼻咽癌患者与正常人比较,血清中2倍升高的miRNA有81个,其中5倍升高的有22个.2倍降低的miRNA有88个,其中5倍降低的有16个.鼻咽癌患者血清中有4个EB病毒相关miRNA(ebv-miRNA)的表达明显升高.结论:鼻咽癌患者血清中存在与鼻咽癌密切相关的miRNA.     

人细胞色素P450 2A13基因在舌癌中的表达

目的:比较分析细胞色素P4502A13(cytochrome P450 2A13,CYP2A13)分别在舌癌组织及其对应癌旁组织中的表达水平,探讨CYP2A13与舌癌的相关性。方法:采用实时定量PCR和Western blot技术分别检测26例舌癌组织及其对应癌旁组织中CYP2A13mRNA及蛋白表达。结果:CYP2A13 mRNA及蛋白在舌癌组织中表达量均低于对应的癌旁组织(P<0.05)。结论:CYP2A13在舌癌组织中表达降低,结合CYP2A13的功能,提示CYP2A13在癌组织中的表达降低可能是舌癌发生发展过程中的自我保护效应。     

微管不稳定蛋白stathmin基因沉默影响鼻咽癌5-8F细胞系增殖与凋亡

目的: 构建微管不稳定蛋白stathmin基因siRNA质粒表达载体,探讨stathmin沉默对鼻咽癌5-8F细胞的增殖和凋亡作用。方法: 合成的stathmin基因特异性干扰片段单链退火形成双链后,亚克隆于siRNA质粒表达载体 pGenesil-1.1,质粒经鉴定后,采用脂质体将其转入鼻咽癌5-8F细胞;Western blotting检测stathmin表达;MTT实验分析细胞增殖;流式细胞术分析细胞凋亡。结果: Stathmin沉默组5-8F细胞的抑制率为(53.01±1.12)%,与试剂对照组 和阴性对照组 比较,差异显著(P<0.05)。Stathmin沉默组5-8F细胞的凋亡率为(8.75±0.67)%,与试剂对照组 和阴性对照组 比较,差异显著(P<0.05)。结论: Stathmin沉默抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖,诱导鼻咽癌5-8F细胞凋亡。     

五没食子酰葡萄糖(PGG)诱导鼻咽癌细胞凋亡

目的:探讨五没食子酰葡萄糖(PGG)诱导鼻咽癌细胞的凋亡作用。方法:PGG孵育人鼻咽癌5-8F细胞株48h后,采用倒置相差显微镜观察细胞形态;PGG孵育人鼻咽癌5-8F细胞株24h后,采用流式细胞仪分析细胞早期凋亡。结果:25,50和75μmol/L PGG孵育5-8F细胞48h后,贴壁活细胞减少,漂浮死亡细胞增多。PGG孵育24h后,细胞早期凋亡率分别为(4.00±0.56)%、(6.97±0.25)%和(10.23±0.71)%,与对照组(1.53±0.15)%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PGG具有诱导鼻咽癌细胞凋亡的生物学作用。     

CD44重组表达抑制鼻咽癌6-10B细胞增殖

目的：探索CD44v10剪接变异体对鼻咽癌细胞增殖的生物学作用.方法：将CD44v10基因编码序列重组,构建pIRESne03-CD44v10重组质粒表达载体,重组表达载体扩增后采用脂质体转入鼻咽癌6-10B细胞系,G418筛选稳定转染细胞株;RT-PCR和蛋白印迹鉴定CD44v10重组表达6-10B细胞株;MTT法分析细胞增殖.结果：获得了CD44v10稳定重组表达的6-10B细胞株;CD44v10表达抑制6-10B细胞增殖.结论：CD44v10表达对鼻咽癌细胞的恶性增殖可能具有抑制作用.     

D-δ-三烯生育酚抗乳腺癌细胞的活性

目的探讨D δ 三烯生育酚抗人乳腺癌MCF 7细胞的生物学活性。方法将细胞分为对照组（无药物培养）和实验组,实验组设低、中、高剂量组,分别加入终浓度为30,40,50 μmol&#8226;L－1的D δ 三烯生育酚,药物干预MCF 7细胞24 h后,显微镜下观察各组细胞生长状态,四甲基偶氮唑盐（MTT）法、流式细胞仪分析细胞增殖、周期与凋亡。结果D δ 三烯生育酚抑制乳腺癌MCF 7细胞增殖,低、中、高剂量组细胞增殖抑制率分别为（9.33±1.68）%,（32.47±3.18）%和（76.63±1.00）%,与对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;低、中、高剂量组G1期细胞所占比例分别为（54.34±1.50）%,（58.24±0.81）%和（62.11±1.12）%,与对照组［（43.34±2.51）%］比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;低、中、高剂量组贴壁细胞明显减少,漂浮死亡细胞明显增多,细胞早期凋亡率Q4分别为（10.87±0.50）%,（17.87±2.40）%和（25.83±3.76）%,与对照组［（1.93±0.25）%］比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论D δ 三烯生育酚能抑制MCF 7细胞增殖,阻滞细胞于G1期,诱导细胞凋亡,具有抗乳腺癌MCF 7细胞的生物学活性。     

鼻咽癌细胞XIAP mRNA表达及其意义

目的 探讨XIAP mRNA在鼻咽癌细胞中的表达及其意义.方法 体外培养5-8F鼻咽癌细胞,RT-PCR法检测XIAP mRNA表达水平.结果 与正常鼻咽部上皮细胞相比,XIAP mRNA在鼻咽癌细胞中的表达水平显著升高(P<0.01).结论 XIAP在鼻咽癌细胞中高表达,可能与鼻咽癌发生发展有关,有可能成为鼻咽癌治疗的靶标.     

青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞系HFL-Ⅰ细胞胶原合成的影响及机制

目的进一步探讨青蒿琥酯对肺纤维化的治疗作用及机制。方法取对数生长期的人胚肺成纤维细胞（HELF）系HFL-Ⅰ细胞,随机分为观察1～3组及对照组,观察1～3组分别加入质量浓度为1、10、100 mg/L的青蒿琥酯,对照组加入等体积培养液继续培养。用天狼猩红染色法检测胶原蛋白的分泌水平,RT-PCR法测定Ⅰ型和Ⅲ型前胶原蛋白mRNA的表达。结果观察1～3组胶原表达量、Ⅰ型、Ⅲ型前胶原蛋白mRNA表达均显著低于对照组,且各观察组间两两比较有显著差异（P均〈0.05）。结论青蒿琥酯具有抗纤维化的作用,可在一定程度上降低胶原分泌,其机制可能为下调Ⅰ型和Ⅲ型前胶原蛋白mRNA表达。     

美托洛尔联合地高辛治疗心力衰竭伴永久性心房颤动患者心室率及心功能的疗效

目的观察β-受体阻滞剂美托洛尔(倍他乐克)联合小剂量地高辛治疗收缩性心力衰竭伴永久性心房颤动患者心室率及心功能的疗效。方法94例收缩性心力衰竭合并永久性房颤患者随机分为2组,地高辛合用美托洛尔组(治疗组)47例,地高辛组(对照组)47例。入选患者病情不稳定者先予静脉应用药物以改善心功能,病情稳定者常规使用利尿剂、硝酸酯类、血管紧张素转换酶抑制剂或血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂、肠溶阿司匹林或华法林等治疗,对照组予常规治疗和地高辛(0.125 mg/d)治疗,治疗组在上述治疗基础上待患者无液体潴留、体质量恒定后加美托洛尔12.5～75.0 mg/d,再予维持量并观察12周。2组均于入选时及治疗第12周末做12导联心电图测静息时心室率,步行6 min后测活动后心室率,并应用多普勒超声测左室射血分数(LVEF),评价心功能。结果(1)治疗后2组总有效率比较,治疗组高于对照组(100.0%vs91.5%),差异有统计学意义(P<0.05)。(2)治疗后2组静息心室率、LVEF比较差异均有统计学意义(P<0.05),且治疗组运动后心室率降低更明显(P<0.01)。(3)2组均无严重不良反应和并发症发生。结论适当剂量的美托洛尔联合小剂量地高辛能控制永久性房颤伴心力衰竭患者的心室率,显著改善心室功能,且安全性好。     

血小板源性生长因子-α受体沉默对人晶状体上皮细胞增生的抑制作用

背景 血小板源性生长因子(PDGF)可以影响人晶状体上皮细胞(LECs)的增生过程,而LECs可终生表达PDGF-α受体(PDGFR-α),PDGFR-α活化后与PDGF结合能促进细胞的DNA合成.反义寡核苷酸(ASODN)技术沉默PDGFR-α基因表达可抑制增生性玻璃体视网膜病变(PVR)过程中视网膜色素上皮(RPE)细胞的增生,并诱导细胞凋亡,但通过该技术是否能够抑制LECs的增生鲜见报道. 目的 研究PDGFR-α沉默对LECs增生的影响,为防治晶状体后囊膜混浊(PCO)提供实验依据.方法 用含胎牛血清的改良型α-MEM培养液体外培养人LECs系SRA01/04细胞株并传代,转染前1d用无抗生素的培养基培养细胞至30％ ～ 50％融合后将细胞以5×104个/孔的密度接种于6孔板,接种24 h后采用脂质体进行LECs转染,按照转染物的不同分为空白对照组(不加PDGFR-α ASODN的空白脂质体)、PDGFR-α错义寡核苷酸(MSODN)组(含PDGFR-α ASODN和脂质体)、0.5μmol/L PDGFR-α ASODN组(含0.5 μmol/L PDGFR-αASODN和脂质体)和1.0μmol/L PDGFR-α ASODN组(含1.0 μmol/L PDGFR-α ASODN和脂质体).转染24 h后倒置显微镜下观察各组人LECs的形态学变化,采用逆转录PCR(RT-PCR)法检测各组LECs中PDGFR-αmRNA的表达;用MTT比色法检测各组细胞的增生(A490)值,计算转染物对LECs的抑制率;采用流式细胞仪分析各组LECs的细胞周期. 结果 转染后24 h,空白对照组及PDGFR-α MSODN组LECs生长良好,细胞呈多边形,数目多;而PDGFR-α ASODN组细胞呈圆形,细胞数目明显减少.RT-PCR检测表明,空白对照组及PDGFR-α MSODN组PDGFR-α mRNA在LECs中的表达较强,而在PDGFR-α ASODN组中的表达强度明显减弱,以1.0 μmol/L PDGFR-α ASODN组更为明显.空白对照组、PDGFR-α MSODN组、0.5μmol/L PDGFR-αASODN组及1.0μmol/L PDGFR-α ASODN组的A490值分别为0.661±0.036、0.655 ±40.016、0.529±0.030和0.441 ±0.039,其中0.5μmol/L PDGFR-α ASODN组及1.0μmol/L PDGFR-α ASODN组的A490值明显低于空白对照组和PDGFR-α MSODN组,总体比较差异有统计学意义(F=34.08,P＜0.01).空白对照组、PDGFR-αMSODN组、0.5 μmol/L PDGFR-α ASODN组及1.0 μmol/L PDGFR-α ASODN组G1期细胞百分数分别为(47.73±1.18)％、(49.48±1.09)％、(53.31±1.30)％和(59.98±0.95)％,总体比较差异有统计学意义(F=68.41,P＜0.01),其中0.5 μmoL/L PDGFR-αASODN组及1.0 μmol/L PDGFR-α ASODN组G1期细胞百分数明显高于空白对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 PDGFR-α沉默能抑制人LECs的增生.