重组人角质细胞生长因子-2基因的克隆和表达

目的：克隆人KGF-2基因，并在大肠杆菌中进行表达。方法：通过PCR扩增，从人胎肝cDNA文库中获得编码人KGF-2的cDNA，并将其分别克隆入pBV220，pLEX和pGEX4T-1质粒中，研究其在不同表达质粒和大肠杆菌中的表达情况。结果：克隆得到的KGF-2cDNA经测序证明与文献报道的序列一致。将其克隆于pBV220质粒中，在E．coli JM109中表达量相对最高，约占茵体总蛋白的4％；克隆于pLEX质粒中，在E．coli G1724中的表达量约占全茵总蛋白的5％；克隆于pGEX4T-1中，在E．coli JM109中的表达量可占到全茵总蛋白的20％。结论：采用GST融合蛋白表达质粒pGEX4T-1对KGF-2进行表达，较pBV220和pLEX具有明显优势，能实现对KGF-2的高效表达，为进一步的功能研究奠定了基础。     

中药复方冬虫夏草透皮乳膏的研制及质量控制

目的：探讨复方冬虫夏草透皮乳膏的制备及其质量控制。方法：选用适宜乳膏基质，将冬虫夏草、昆明山海棠浓缩液与透皮促进剂制成O/W型乳膏，建立质量控制方法。结果：本制剂质量稳定，保湿性良好，能显著延长猪同种植皮存活期。结论：复方冬虫夏草乳膏剂的制备工艺可行，性质稳定。质量控制方法简单、可靠。     

甲壳素涂层PGLA神经导管修复兔面神经缺损的实验研究

目的:探讨甲壳素涂层PGLA神经导管修复兔面神经缺损的效果。方法:成年雄性新西兰兔24只,无菌条件下切断双侧面神经下颊支,制成15mm的兔面神经下颊支缺损模型。左侧用甲壳素涂层聚丙交脂-乙交脂共聚物[poly(L-lactide-co-glycolide),PGLA]神经导管修复;右侧用翻转自体神经修复作为对照。术后5周、10周和14周行大体观察、电生理检查、组织学、电镜观察评价修复效果。结果:术后5周观察到神经导管中有新生轴索通过,再生神经发育不成熟;右侧自体神经修复近段有髓神经纤维均匀疏散分布,远段未见明显再生神经束形成。术后14周左侧再生神经已通过神经导管长入远端,电生理检查结果表明自体神经修复侧再生神经质量优于神经导管修复侧,差异有统计学意义(P<0.01)。自体神经修复再生纤维密度优于神经导管修复侧,差异有统计学意义(P<0.01),但自体神经修复侧近段神经髓鞘部分空泡样变性及脱髓鞘改变,远段再生神经纤维束形成少,面肌联带运动程度较导管修复侧严重。结论:甲壳素涂层PGLA神经导管能有效修复周围神经缺损,有望替代自体神经移植。     

多发性骨髓瘤患者止凝血功能的临床研究

目的：观察止凝血功能在多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM)患中的变化。方法：对16例MM患进行全血粘度，血浆粘度，血小板α-颗粒膜蛋白－140（GMP－140，P－选择素），凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ活性、抗凝血酶（AT－Ⅲ）活性，纤维蛋白原（Fbg)、纤维蛋白原降解产物D－二聚体（D－D）、纤溶酶原活生（PLG）、组织型纤溶酶原激活性（t-PA)、纤溶酶原激活抑制物（PAI）、α2-抗纤溶酶抑物（α2-PI)及内皮素－1（ET－1），凝血酶调节蛋白（TM）的测定，并交这些指标检测结果与正常对照组进行比较。结果：MM患组全血粘度，血浆粘度，TM比正常对照组明显增高（P＜0．05或P＜0．001），而凝血因子Ⅱ、Ⅷ、Ⅹ活性，Fbg正常对照组明显降低（P＜0．05），其余指标虽有改变，但无统计学意义。结论：MM患存在着血小板功能和凝血功能障碍是临床出血的主要原因，但同时血液粘度增加，血液缓慢不畅，损害毛细血管，也可造成或加重出血。     

Kkay小鼠糖尿病肾病时ICAM-1的表达

目的:观察糖尿病肾病时(DN)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的变化。方法:22～24周龄:Kkay糖尿病鼠(KA)7只和Kkay非糖尿病鼠(KB)8只,测定血糖,以PAS染色观察各组:DN病变;对肾脏ICAM-1表达进行免疫组化染色和半定量图像分析;并以RT-PCR检测。肾脏ICAM-1 mRNA表达水平。结果:KA组出现明显糖尿病肾脏病变,其肾小球硬化指数(GI)240.00,明显高于KB对照组(118.36,P<0.05);免疫组化显示Kkay小鼠ICAM-1的表达与病理变化一致,其ICAM-1阳性着色面积(15.22％)高于对照组(4.38％,P<0.01),KA组ICAM-1 mRNA表达水平也高于KB组。结论:Kkay小鼠出现糖尿病肾病时伴有ICAM-1表达水平的增高,推测ICAM-1在糖尿病肾病发生发展中起一定作用。     

分子吸附再循环系统对冠心病并发重度脓毒症患者心率和动脉压的影响

目的研究分子吸附再循环系统(MARS)对冠心病并发重度脓毒症患者心率和动脉压的影响.方法对2002年11月至2004年2月在ICU治疗的冠心病并发重度脓毒症患者所进行的12次床边MARS治疗有关资料进行回顾性分析和探讨.结果MARS治疗4 h后患者心率显著减慢,收缩压、舒张压和平均动脉压明显升高.结论MARS可改善MODS患者血流动力学指标.     

膀胱肿瘤组织中端粒酶催化亚基和c-myc的表达

目的 研究膀胱肿瘤组织中端粒酶催化亚基(hTERT)和c-myc间的表达及关系。方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对27例膀胱肿瘤组织、16例癌旁组织和16例正常膀胱粘膜同时测定hTERT和c-myc表达,分析两指标在3种组织的表达差异和相关性。结果 TCC组织hTERT和c-myc的表达阳性率分别为100.0％(27/27)和66.7％(18/27);癌旁组织两指标的阳性率均为 37.5％,而正常膀胱粘膜分别为 0和 25.0％;hTERT和c-myc两指标在膀胱肿瘤组织中的阳性表达有相关性(P<0.01)。结论 hTERT较c-myc作为TCC的诊断指标更灵敏和特异;两指标在TCC中的阳性表达具有相关性。     

急性脑卒中患者医院感染病原体分析

目的 探讨脑卒中患者医院感染病原体的构成及耐药情况，旨在指导临床合理用药。方法 对1997年1月1日～2001年12月31日，5年间收治的3856例急性脑卒中患者进行监测，对确诊医院感染者486例的主要病原体进行药敏试验。结果 医院感染发病率为12．60％，主要部位为下呼吸道，占37．08％，其次为泌尿道，占34．04％；引起医院感染的病原体以G^-菌为主，占41．38％，G^-菌占30．72％，真菌占27．90％，耐药菌株不断增加。结论 加强对细菌耐药性的监测，合理选用抗菌药物，是减少或延缓耐药菌株的产生的关键措施。     

肝细胞生长因子在烟雾病发病机制中的作用

目的 探讨肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）在烟雾病发病机制中的作用.方法 采用酶联免疫吸附法检测30例烟雾病患者组、60例健康对照组、8例非烟雾病脑缺血对照组的血清HGF浓度;以2例非烟雾病患者的颞浅动脉分支作为对照,应用免疫组织化学的方法研究12例烟雾病患者的6例颞浅动脉分支和6例脑膜中动脉分支的HGF及其受体c-Met的表达情况.结果 烟雾病组和非烟雾病脑缺血对照组的血清HGF浓度分别为1154.3±348.9pg/ml和955.6±277.5pg/ml,均明显高于健康对照组（701.3±134.3pg/ml）,统计概率分别为P＜0.001和P＜0.05;烟雾病组与非烟雾病脑缺血对照组之间的差异虽尚无显著性（P＞0.05）,但前者比后者仍有升高趋势.免疫组化研究显示HGF及c-Met在烟雾病组颞浅动脉分支和脑膜中动脉分支的管壁平滑肌细胞和内皮细胞的表达均强于对照组.结论 烟雾病患者的血清HGF浓度比健康对照组明显升高,HGF及其受体c-Met在烟雾病颞浅动脉分支、脑膜中动脉分支的管壁表达增多,提示HGF在烟雾病的发病机制中可能具有重要作用.     

大鼠自体平滑肌细胞移植对心肌梗死后心功能恢复的作用

目的:研究自体平滑肌细胞移植到心肌梗死区后对心功能恢复的作用.方法:用酶消化法从SD大鼠的输精管中分离、提取自体平滑肌细胞,进行体外培养、扩增.移植组(n=12)将BrdU标记后的自体平滑肌细胞直接注射移植到左冠脉前降支结扎后2周形成的心肌梗死区瘢痕组织中;对照组(n=12)注射同等剂量的DMEM培养液.超声检查评估移植前和移植后4周的心功能状况.用免疫组化染色的方法,检测心肌瘢痕组织中是否有植入的平滑肌细胞存活以及促血管新生的情况.结果:移植的自体平滑肌细胞能在心肌梗死区内存活并形成肌样组织.与对照组比较,移植组左心室舒张末容积(LVEDV)明显减小[(0.78±0.16) vs (0.92±0.15) ml, P<0.01],左心室射血分数(LVEF)显著提高[(47.6±7.2)％ vs (29.3±6.1)％, P<0.01],心肌瘢痕组织血管新生明显[血管密度:(1.9±0.4)/(0.8 mm2) vs (0.4±0.2)/(0.8 mm2), P<0.01].结论:自体平滑肌细胞移植能防止心肌梗死后的心室腔扩大,促进梗死区血管新生,改善心功能.