UV-B辐照培养下南极冰藻的形态和超微结构及主要生化组成的变化

对从南极水样中分离到的L-4单细胞绿藻(Chlorophyceae L-4)，模拟南极的紫外辐射环境．在人工UV-B辐照下培养绿藻L-4．以滤除UV-B培养的绿藻L-4为对照组。用电镜对绿藻L-4试验组和对照组的形态和超微结构进行观察比较。结果表明：试验组细胞内积累大量的淀粉颗粒，是对照组的10～20倍；脂肪颗粒是对照组的3～4倍；试验组的细胞膜和细胞壁之间充满大量的黑色颗粒物质，而对照组很少。此外，试验组的细胞普遍较对照组大，且细胞外粘附着大量的白色黏性物质。对绿藻L-4试验组和对照组的蛋白质、脂肪、糖、无机元素的总含量进行测定，结果表明．试验组的蛋白质含量低于对照组14．16％；脂肪含量高于对照组46．65％；可溶性总糖含量高于对照组66．34％；灰分和其它物质含量分别低于对照组38．83％和33．31％。UV—B辐照下南极冰藻的细胞超微结构和生化组成的变化，部分反映了南极冰藻在长期的进化过程中对南极强辐射环境的适应。本研究将为从南极冰藻中获取抗紫外辐射活性物质提供科学依据。     

坎地沙坦,PD123319及金雀异黄素对大鼠血管平滑肌细胞迁移影响

目的:探讨血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)不同受体亚型(AT1,AT2)在血管平滑肌细胞(VSMC)迁移中的作用。方法:以体外培养VSMC为基础,采用改良Boyden小室,对不同浓度AT1拮抗剂坎地沙坦(CV)、AT2拮抗剂PD123319(PD)和酪氨酸激酶(PTKs)抑制剂金雀异黄素作用下AngII诱导产生的VSMC跨膜迁移细胞数进行评价。分对照组、AngII组、AngII+10-10～10-5mol·L-1CV组、AngⅡ+10-9～10-6mol·L-1PD组、AngⅡ+CV+PD组、AngⅡ+金雀异黄素组。结果:与对照组相比,AngⅡ组跨膜迁移细胞数明显增加,P<0.01。坎地沙坦在10-10～10-5mol·L-1的浓度范围内,呈剂量依赖性抑制由AngⅡ介导的VSMC迁移(r=0.95,P<0.05)。PD123319对此无明显的增强或抑制作用。金雀异黄素组VSMC跨膜迁移细胞数低于AngⅡ组,高于对照组。结论:AngⅡ影响VSMC迁移能力的生物学效应由AT1介导;AT2在VSMC迁移过程中不起作用或者不起主要作用。酪氨酸激酶的激活也参与了AngⅡ诱导的VSMC迁移的信号转导过程。     

嗜水气单胞菌TaqMan实时PCR检测方法的建立

Objective To develop a TaqMan real-time PCR for the detection of aeromonas hydrophila. Methods The conserved region of major adhesion gene of aeromonas hydrophila (aha) was used to design primers and TaqMan probe. A total of six concentration gradients for forward and reverse primers ranging from 200 -700 nmol/L were chosen, and four concentration gradients for probe ranging from I00 -400 nmol/L were chosen. And then the concentration of primers and probe were optimized by ANOVA of completely randomized design respectively. The specificity of the established method was evaluated by using bacteria as contrast, including 45 strains Vibrio cholerae,20 strains Vibrio parahemolyticus, 10 strains Vibrio fluvialis,4 strains Vibrio mimicus,5 strains Vibrio vulnificus, 1 strain Vibrio aiginoayticns, 1 strain Vibrio furnissii, 5 strains Salmonella, 10 strains Shigella and 2 strains Piesiomonas shigelloides. The sensitivity, bacterial sensitivity and DNA sensitivity included,were evaluated. The stool of healthy people was contaminated by aeromonas hydrephila artificially, and the ability of the established TaqMan real-time PCR system for detection of aeromonas hydrophila was also evaluated. Results The cycle threshold (Ct) value deserved from 6 groups of primers concentration gradient was (x±s) :20.69±0.33,20.72±0.21,20.81±0. 12,20.74±0.12,20.51±0. 16 and 20.69±0. 11, respectively, and the concentration of forward primer and reverse primer was determined to be 200 nmol/L (F=1.33, P=0. 28). The Ct value deserved from 4 groups of probe concentration gradient was (x±s) : 20.56±0. 08,20.82±0.05,20. 82±0. 11 and 20.93±0.09,respectively,and the concentration of probe was determined to be 100 nmol/L(F =5.26,P =O. 01 ). The bacterial sensitivity and DNA sensitivity were 80 CFU/ml and 100 fg/μl respectively,and the sensitivity to detect aeromonas hydrophila from stool was 8 × 103 CFU/ml, which might be 8 CFU/ml after 8 hours' enrichment. No amplification was observed in the templates of other bacterial. Conclusion The TaqMan real-time PCR method targeting the aha gene of aeromonas hydrophila had a high sensitivity and specificity and might be used to detect aeromonas hydrophila from pure bacterial and stool rapidly.     

小鼠四诊采集项目标准的建议

辨证论治机理实验研究主要采用的是小鼠.通过我们长期的研究和观察,初步建立了小鼠四诊采集项目标准.该标准主要有四部分内容:(1)类似于问诊采集的内容,包括一般情况、始病和治疗经过、饮食情况、脏腑病位;(2)闻诊采集的内容;(3)望诊采集的内容,包括自然望诊、胖瘦、小鼠旷场自主活动计数、爪和尾显微拍照后计算机图像处理等内容,涉及类似望形体状况、望形体虚实、望形体神、望形体寒热、望运动步态、望精力、望毛色虚实、望呼吸状况、望眼神、望耳、望鼻、望唇、望腹、望二阴、望大便、望小便、望爪、望尾、望睡眠、爪和尾显微观察等;(4)切诊采集的内容,包括体温、肿块检测、脉的至数与节律、肤之温凉、肌力等.同时,还对是否可以实现小鼠的四诊以及如何开展四诊进行了理论分析.     

DEN诱发大鼠肝癌过程中肝组织基因表达谱的演变

目的:揭示肝癌诱发过程中肝组织基因表达谱的演变,为中医药防治原发性肝癌提供参考.方法:采用DEN诱发大鼠肝癌,分别于诱癌的第4周、8周、16周、20周(肝癌形成)切取肝(合肝癌)组织,常规提取RNA,Affymetrix Rat 230A GeneChip及技术检测大鼠肝组织基因表达的差异和演变.结果:在芯片的15710个基因中,正常组有9225个基因表达,诱癌4周表达增至9396个,8周增至9872个,16周增至10496个,20周有10420个.在肝癌诱发过程中,存在大量基因表达的消长以及高表达基因数的增加,其中部分已知基因的结果.结论:DEN诱发大鼠肝癌过程中基因组变化是十分复杂的,而且文献追踪表明,国内外对在这些基因的功能及其与肝癌发生、发展的关系大多不明确.因此,如何逐一找到那些起着关键作用的基因,进一步阐释其在肝癌的发生、发展和转归中的作用,及其与中医证候演变和相应治法的关系,是今后中医基础理论实验研究的重要方向.     

室内气传真菌的呼吸道毒作用研究

[目的]研究室内常见气传真菌孢子及其代谢提取物对呼吸道的毒作用。[方法]采用现场监测和气管染毒试验以及体外试验方法试验研究室内常见气传真菌1，3-β-D-葡聚糖含量、室内常见气传真菌对大鼠肺损伤作用、真菌孢子及其代谢提取物对异型小鼠混合淋巴细胞反应的影响、对人胚肺细胞毒作用及胶元合成的影响以及真菌代谢提取物的遗传毒性。[结果]室内环境中的优势气传真菌属为芽枝菌属、曲霉属、交链孢属、镰刀霉属、青霉属等。常见气传真菌中1，3-β-D-葡聚糖含量从9．21pg／10^5个细胞到36．5pg/10^5个细胞。大鼠气管染毒试验研究结果表明常见气传真菌孢子气管染毒可以引起肺灌洗液中乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)含量增加，大鼠肺组织中超氧阴离子自由基含量明显升高。体外试验结果表明，室内气传真菌代谢提取物可以引起人胚肺细胞胶原合成量增加，大鼠外周血单个核细胞IL-4、IL-6 mRNA的表达明显增高，且都有剂量-反应关系。部分室内气传真菌(曲霉、青霉)代谢提取物可抑制异型小鼠脾细胞的混合淋巴细胞反应，在加S的情况下，部分室内气传真菌代谢提取物(曲霉、镰刀霉、青霉)可引起TA98菌株回变菌落数明显增加，可诱导大鼠肝细胞非S期DNA合成增加，曲霉、青霉的代谢提取物可以抑制IL60细胞的凋亡。[结论]室内常见真菌中含有与呼吸道炎症有关的1，3-β-D-葡聚糖。气传真菌孢子可以引起大鼠肺损伤，其代谢提取物可以引起肺组织胶原合成增加，并具有一定遗传毒性和免疫抑制作用。     

HIV感染者／病人心理状态与需求调查

目的了解HIV感染者的心理与生活状况以及社会需求。方法通过面对面交谈方式,完成预先设计好的调查表。结果感染者普遍存在心理压力大,社会歧视严重,生活贫困和就医困难等问题。结论感染者需要得到社会的关爱,感染者的生活质量应引起社会的重视。     

N-乙酰-L-半胱氨酸对二氧化硅致大鼠肺成纤维细胞基质金属蛋白酶表达升高的抑制

目的 探讨N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）对染矽尘大鼠肺成纤维细胞（LFb）基质金属蛋白酶（MMPs）MMP-2、MMP-9动态表达的影响.方法 将75只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和干预组.每组25只,模型组和干预组经气管注入SiO2粉尘悬液复制矽尘中毒模型,干预组在注入SiO2粉尘悬液前用NAC预处理;对照组给予同体积生理盐水.注射后1、3、7、14和28d分别获取LFb,用免疫细胞化学方法和逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）方法观察MMP-2、MMP-9蛋白及mRNA的动态变化.结果 （1）模型组LFb各时间点MMP-2蛋白表达高于对照组,分别是对照组的1.343、2.198、3.492、2.834和1.405倍,mRNA表达分别是对照组的2.015、4.889、7.364、3.406和2.277倍,差异均有统计学意义（P＜0.01）;在1、3、7 d MMP-9蛋白表达分别是对照组的1.372、1.286和1.306倍,在1、3 dmRNA分别是对照组的1.797和1.698倍,差异均有统计学意义（P＜0.01）.（2）干预组在各时间点MMP-2蛋白表达低于模型组,在3、7、14、28 d高于对照组（分别是对照组的1.628、2.485、2.072和1.190倍）,差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）;在各时间点mRNA表达低于模型组,高于对照组（分别是对照组的1.612、3.062、3.930、1.976和1.419倍）,差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.在1、3、7 d MMP-9蛋白表达低于模型组,在3、7d高于对照组,在1、3 d mRMA表达低于模型组,高于对照组,分别是对照组的1.304和1.331倍,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 NAC能抑制SiO2所致大鼠LFb的MMP-2、MMP-9蛋白及mRNA表达的升高.     

肺灌注显像在肺心病患者肺动脉压测定中的应用

目的探讨肺灌注显像判定肺心病患者肺动脉高压的程度及其意义。方法对28例肺心病患者及10例正常受试者行99mTc—MAA单光子发射计算机断层测定，测量肺灌注显像上、下肺野核素计数比值，同时应用超声检测收缩期三尖瓣返流压力阶差（the tricuspid valve regurgitation pressure gradient biggest，TRPG）估测肺动脉压（pulmonary artery pressure，PAP）作对照。结果肺动脉压力轻度升高时，肺上、下肺野核素计数比值高于正常对照组，组间存在有显著差异（P〈0．01），且肺上、下肺野核素计数比值与超声检测肺动脉压值呈正相关（r=0．82．t=7．31，P〈0．01）。结论肺灌注显像属先进的无创性技术，可应用来判定肺动脉高压的程度，联合心脏超声检测在肺心病的诊治上有重要意义。     

大学生网络成瘾及影响因素分析

目的：探讨大学生网络成瘾及其影响因素,了解网络对医学生带来的负效应,及早发现网络成瘾者,进一步采取干预措施.方法：于2005年2月到4月,对沈阳三所大学一年级至三年级的本科生采用统一的调查表,进行了不记名问卷调查.结果：在1 883名医学生中有1 642名学生上网,上网率87.2%,199名网络成瘾者,成瘾发生率为12.1%.网络成瘾发生有关的主要因素有学生性别、生源地、上网目的和对网恋的态度.结论：互联网的使用在医学生中已经普及,且对医学生已产生了的负面影响.对大学生开展有针对性的健康教育,培养良好的兴趣爱好,摆脱网瘾,达到促进健康的目的.