庚型肝炎病毒NS_5区RT-PCR检测方法的研究(摘要)

庚型肝炎病毒(HGV)是最新通过基因研究被证实的一种肝炎病毒(非A-E病毒),该病毒为正链RNA病毒,含有9000多个核苷酸;采用RT-PCR技术检测HGV RNA是目前被公认的唯一方法,为此我们从HGV NS_5区自行设计了两个引物:NS_(5-1) 5′-TCT CTT TGT GGT AGT AGC CGA GAG,NS_(5-2)-5′-CTG TCT CAG ACT CTT GGA TG,其扩增片段为181bp。     

抗肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体8F8轻链可变区基因的克隆和序列分析

作者从抗肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体(单抗)8F8杂交瘤细胞提取RNA,逆转录成cD-NA,应用PCR快速克隆出8F8单抗的轻链可变区基因(V_L)。并对8F8单抗V_L的核苷酸序列和相应编码的氨基酸序列进行了测定和推导。     

连续博弈论中的混合策略性质及均衡存在定理

在Fudenberg和Tirole(1991,2002)相应的工作基础(技术性说明)上,提出并证明连续博弈混合策略集上相似于有限博弈中混合策略中的一些基本和重要性质,同样利用预备知识中的方法说明了混合策略纳什均衡的存在性。     

贵州省手足口病的流行病学特征及病原鉴定

目的了解贵州省手足口病的流行趋势及病原的型别分布情况。方法对2008年4-12月88例临床诊断手足口病例进行临床特征及三间分布分析,采用细胞分离结合逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）鉴定肠道病毒的病原体。结果88例患者中有、无发热症状比例约为2：1,就诊时口腔、手掌及足底同时出疹率占51．93％;患者居家与住院治疗比例约为10：1,乡村与城市发病比例约为3：1。2008年手足口病发病率以贵阳市最高（66．44／10万）,5—8月为发病高峰,高发年龄为1～5岁组,男女比例为2：1。临床标本病毒分离阳性率达35．34％（EV71：CA16为2：1）。疱疹液及咽拭子在发病2d内病毒检出率最高,占各自阳性的71．42％及52．17％。3～7d采集粪便病毒检出率高。结论手足口病的流行有明显的地域、季节及年龄界限,聚集病例以EV71感染为主,同时伴有CA16感染。     

半套式PCR扩增人抗HFRS病毒抗体基因及Fb段基因的克隆和序列分析

从肾综合征出血热恢复期患者外周血淋巴细胞(PBL)中提取细胞总RNA，反转录成cDNA。以之为模板，用半套式聚合酶链反应(PCR)扩增人IgG抗体Fd段及轻链基因，并将Fd段基因克隆入噬菌体载体pcomb3；经酶切鉴定后，再亚克隆入pGEM7zf，筛选阳性克隆测序。经计算机分析，Fd段基因的全长为639bp，编码213个氨基酸，属于人IgG2亚类。     

抗肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体8F8轻链可变区基因的克隆及序列分析

本文用基因工程技术,从8F8杂交瘤细胞提取总RNA,逆转录合成cDNA,应用PCR快速克隆出8F8单抗的轻链可变区基因V_L,并对8F8单抗V_L的核苷酸序列和相应编码的氨基酸序列进行了测定和推导。 1 杂交瘤细胞系 抗HFRSV血凝素McAb 8F8株培养于RPMI-1640培养液(含20％小牛血清)中。     

奈瑟氏菌属IgA1蛋白酶中和表位基因位点可能集中存在于iga的2601—2722序列

奈瑟氏菌属ＩｇＡ１蛋白酶中和表位基因位点可能集中存在于ｉｇａ的２６０１—２７２２序列许福明，马文煜，项秉懿，阎岩，白光春（西安第四军医大学微生物学教研室，西安第四军医大学生化教研室，西安７１００３２）ＩｇＡ１蛋白酶是病原性奈瑟氏菌属产生的一种与致病作...     

抗肾综合征出血热病毒McAb1A8单链抗体基因的构建及表达产物的检测

我们将抗肾综合征出血热（HFRS）病毒MCAbIA8重链可变区（VH）基因的3’端与轻链可变区（VI＿）基因的5’端用一编码《｝Iv。Ser）3的基因连接于（I。Inker）连接，构建f单链抗体（SCFV）表达载体，转化至五．V；；人．＊MIO9中，用辅噬菌体超感染后，用EI。ISA间接夹心法检测，结果表明在噬菌体表面成功地表达了可与HFRS病毒抗原特异结合的单链抗体。l材料和方法l．IVH和VI。基因IASVHPUC和IASVI。PUC分别为本室克隆的含抗HFRS病毒NICAbIA8的VH基因和VI。基因。l．2VH基因与l。nil’er的连接以lASVI4PUC为…     

关于对诊断一致性Kappa系统的探讨

对诊断一致性的简单Kappa系数、加权Kappa系数以及总Kappa系数进行了分析和说明,由于Kappa系数仅适用于行数和列数相等的方表,针对Kappa检验的这一局限性,给出了行数和列数不一致时使用SPSS软件实现Kappa检验的方法。     

汉滩病毒感染HUVEC细胞系炎症介质表达的检测

目的 检测汉滩病毒陈株感染HUVEC细胞系ECV304中炎症介质的表达。方法 用汉滩病毒陈株感染HUVEC细胞系ECV304,取感染后不同时间的细胞提取细胞总RNA,用半定量RT－PCR检测感染细胞中ICAM－1、eNOS和IL－6基因的表达,并将扩增的ICAM－1和eNOS基因克隆,测定核苷酸序列。结果LACM－1的表达产物在病毒感染后较未感染细胞有明显升高,序列分析结果表明扩增的基因为特异性扩增产物;用扩增eNOS的引物从病毒感染细胞可扩增出表达产物,从未感染细胞不能扩增出任何产物,但序列分析结果表明扩增的基因与一新基因高度同源。结论 汉滩病毒陈株感染ECV304细胞可上调炎症某些介质的表达。