糖尿病肾病的早期诊断

<正>糖尿病肾病(DN)是糖尿病(DM)的严重并发症之一,也是DM患者丧失劳动力和死亡的主要原因之一。早期诊断能延缓、阻滞甚至逆转疾病的进展,具有重要意义〔1〕。DN在早期具有非常大的隐蔽性,无明显的临床症状,传统的肾功能检测也检测不到,尿蛋白定性也为阴性,这就给临床的早期诊断带来了困难。因此,发现DN的早期诊断相关指标,并及时进行监测对于早期诊断至关重要。     

夏枯草水提液对实验性自身免疫性甲状腺炎的治疗作用及机制研究

目的探讨夏枯草水提液（PVAE）对实验性自身免疫甲状腺炎（EAT）大鼠的治疗作用及机制。方法用猪甲状腺球蛋白和完全弗氏佐剂制作EAT大鼠模型,随机分为PVAE预防性治疗组(P组)、PVAE低剂量治疗组（TL组）、PVAE高剂量治疗组(TH组）、EAT模型对照组(M组）,并设立正常对照组（C组）,每组14只。P组于造模前2周开始予PVAE10g/（kg·d）灌胃给药,TL组、TH组于造模后2周开始分别予PVAE10g/（kg·d）、2.5g/（kg·d）灌胃给药,M组和C组于造模后2周开始予去离子水2ml/d灌胃,连续给药6周。实验结束后检测各组大鼠血清抗甲状腺球蛋白抗体（TgAb）、甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）-丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶B（AKt）-核转录因子（NF-资B）途经下游产物趋化因子受体3（CXCR3）和趋化因子10（CXCL10）水平;观察甲状腺组织的病理改变,检测CXCR3、CXCL10、Akt和NF-资B的mRNA、蛋白及表达水平。结果M组大鼠血清TgAb和TPOAb水平较C组呈明显升高,甲状腺组织有不同程度的滤泡结构破坏和淋巴细胞浸润,提示EAT大鼠造模成功。PVAE各干预组的甲状腺滤泡均较M组完整,间质水肿减轻,少量炎症细胞浸润,其中P组TPOAb水平较M组明显降低（P＜0.01）。PVAE各干预组的CXCL10水平均较M组下降,其中P组与C组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。PVAE治疗组（TH、TL组）的AktmRNA、CXCR3蛋白表达及TH组的NF-资BmRNA、Akt蛋白表达显著低于M组（P＜0.05或0.01）。免疫组化结果显示各组大鼠甲状腺组织Akt均呈阴性表达,NF-资B、CXCR3及CXCL10在甲状腺滤泡细胞的细胞质和细胞核中呈不同程度阳性表达。M组NF-资B表达量明显高于C组（P＜0.05）,且经PVAE干预后各组NF-资B表达量均呈不同程度下调,其中P组与C组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论PI3K途径参与EAT的形成,PVAE干预可能通过抑制PI3K途径减轻自身免疫性甲状腺炎。     

新诊断1型糖尿病患者外周血自然杀伤细胞的变化特点

目的 探讨新诊断1型糖尿病患者外周血自然杀伤细胞数目和功能的变化情况.方法 收集2009年到2011年瑞金医院收治新诊断1型糖尿病患者外周全血标本43份,同时收集性别、年龄匹配的正常对照健康志愿者外周全血标本21份,2型糖尿病对照组14例,Ficoll方法分离外周血单个核细胞( PBMC),流式细胞术(FACS)测定PBMC主要细胞亚群比例,流式细胞分选仪分离正常人和1型糖尿病患者自然杀伤细胞.实时荧光定量PCR检测自然杀伤细胞激活的主要效应分子γ-干扰素(IFN-γ)、perforin 及自然杀伤细胞激活性受体NKp46、NKp30基因mRNA表达水平.结果 与正常对照相比,自然杀伤细胞是1型糖尿病患者所有细胞亚群中改变最明显的一群细胞,细胞数目明显降低[( 102±86)/μl对(355±264)μl,P＜0.01];与正常对照自然杀伤细胞相比,1型糖尿病患者的自然杀伤细胞NKp46、perforin基因表达明显下调(P＜0.05),NKp30、IFN-γ基因在1型糖尿病患者的自然杀伤细胞中表达无明显改变(P＞0.05).结论 新诊断1型糖尿患者存在自然杀伤细胞数目和功能明显下降,自然杀伤细胞介导的免疫功能障碍可能在1型糖尿病的病程中发挥着非常重要的作用.     

川芎及其中成药抗凝血作用测定方法的研究

目的以延长活化部分凝血活酶时间(APTT)为指标,建立定量测定川芎抗凝血作用的方法,评价川芎及其中成药的质量。方法川芎先后用乙醇和水定量提取,以总提取物为供试品,体外测定延长APTT值。家兔心脏取血,制备血浆,加入APTT试剂后,测定凝结时间。以APTT延长率为抗凝血活性的评价指标,用阿魏酸钠标定川芎的延长APTT活性。根据量反应平行线法(2.2)计算川芎的抗凝血活性。并测定了9份川芎药材、饮片及中成药的抗凝血活性。结果阿魏酸钠和川芎总提取物均具有显著的抗凝血活性,且可靠性检验结果成立。阿魏酸钠的给药质量浓度(1~5 mg/m L)与其APTT延长率呈良好的线性关系(r=0.995 5)。供试品重复测定抗凝血活性的RSD为9.34%(n=6),可信限率为15.98%(n=6)。不同川芎样品的抗凝血活性不同,5份川芎药材的抗凝血效价分别为5.431~7.620 U/g,川芎饮片及川芎酒炙饮片分别为5.910、3.017 U/g,通脉颗粒和血府逐瘀丸分别为14.516、29.035 U/g。结论建立的方法能准确测定川芎药材、饮片及其中成药的抗凝血活性并评价其质量。     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中米拉贝隆缓释片的药动学特性

目的建立Beagle犬血浆中米拉贝隆浓度测定的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)分析方法,研究米拉贝隆缓释片在犬体内的药动学特征。方法选取8只Beagle犬,雌雄各半,分成两组,每组4只,双交叉试验设计进行单剂量给药,分别给予50 mg受试制剂与参比制剂,采集不同时间血浆样品,采用LC-MS/MS分析方法测定Beagle犬体内的血药浓度并计算主要药动学参数。结果与米拉贝隆缓释片市售品(商品名:Myrbetriq)相比,米拉贝隆缓释片自制品的Cmax值为市售品相应参数的132.29%(几何均值为112.67%),相对生物利用度为106.37%(几何均值为100.45%)。结论米拉贝隆缓释片自制品与市售品的药代动力学参数之间比较差异未见统计学意义,提示自制品与市售品的药代动力学行为无显著差异。     

基于超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱技术的妇可靖胶囊化学成分研究

目的：为系统阐明复方中药制剂妇可靖胶囊中的化学成分组成,采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱（UPLC-Q-Orbitrap HRMS）,对妇可靖胶囊的化学成分进行鉴定分析。方法：通过UPLC-Q-Orbitrap MS扫描提供的化合物精确相对分子质量、多级碎片离子信息,同时与对照品的的相对保留时间和质谱数据比对,并结合相关参考文献或Mass Bank、Chemical Book等数据库信息从而实现对化合物的准确定性。结果：共鉴定出67种化学成分,其中主要包括酚酸类、醌类、苯酞内酯类、黄酮类、萜类及其苷类、脂肪酸类等化学成分。结论：所建立的方法可系统、准确、快速地鉴定妇可靖胶囊中的多种化学成分,并为其药效物质基础及质量控制等研究提供了科学的理论依据。     

甜菜碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤炎症及心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨甜菜碱对大鼠心肌缺血再灌注（IR）损伤的影响及发生机制。方法 选用成年雄性SD大鼠18只,采用随机数字表分为假手术组（SO组）、缺血再灌注组（IR组）及甜菜碱组（450 mg/kg灌胃）,每组6只大鼠。SO组：开胸,前降支动脉下穿线不结扎,IR组和甜菜碱组：开胸,缺血30 min,再灌注4 h。ELISA法检测并比较3组大鼠心肌损伤标记物乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶b（CK-Mb）和肌钙蛋白I（cTnI）和检测炎症因子（HMGB1、IL-17A、IL-6以及TNF-α）的表达。Western Blot法检测并比较3组大鼠心肌组织凋亡蛋白（caspase-3,Bcl-2和Bax）的相对表达量。结果 与SO组比较,IR组中心肌损伤标记物（CK、LDH和cTnI）、炎症因子和凋亡蛋白的表达均增高,差异均有统计学意义（P<0.05）。与IR比较,甜菜碱组心肌损伤标记物、炎症因子和凋亡蛋白的表达下降,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达增加,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 甜菜碱可以通过抑制炎症反应和心肌细胞凋亡减轻大鼠心肌IR损伤。