肝病患者的肝组织单细胞悬液与外周血中淋巴细胞亚群的分析比较

目的 探讨肝脏组织单细胞悬液的制备方法,了解慢性肝病患者的肝组织和外周血的淋巴细胞亚群差异.方法 分别选择慢性乙型肝炎（CHB）14例、自身免疫性肝炎（AIH）4例和原发性肝细胞癌（HCC）3例,在超声引导下经皮作肝脏穿刺活检,用单细胞制备仪或物理研磨方法将肝组织制备成单细胞悬液,肝组织中淋巴细胞经4种特异性荧光抗体标记,在流式细胞仪（FCM）上作四色荧光分析,并与外周血测定结果比较.结果 单细胞制备仪和物理研磨方法制备的肝组织单细胞悬液,细胞成活率分别为92.4%和91.5%;检测肝组织单细胞悬液中淋巴细胞亚群,正常对照组和慢性肝病各组间差异均有显著性（P〈0.05）,AIH组和CHB组间差异有显著性（P〈0.05）.而外周血中淋巴细胞亚群检测,HCC组和CHB组间差异有显著性（P〈0.05）.肝组织和外周血相应项目比较差异均有显著性（P〈0.05）.结论 用2种方法制备单细胞悬液能满足FCM检测的特殊需要;肝脏组织中淋巴细胞与外周血的淋巴细胞亚群比例差异有显著性.     

流行性出血热免疫发病机理研究进展

流行性出血热(Epidemic HemorrhagicFever,EHF)是由汉坦病毒(HantaanVirus,HV)引起的以发热、出血和肾脏损害为主要临床表现的急性传染病。多年来国内外学者一直致力干EHF发病机理的研究,曾先后提出过病毒直接作用学说、丘脑下部间脑炎学说、弥漫性血管内凝血学说及神经体液因素学说。随着临床免疫学的发展,又开始了对本病免疫发病机理的探讨。现已有相当多的证据表明,本病是以病毒感染为始动因素,以免疫反应为主要环节的疾     

乙肝病毒Core基因区DNA疫苗免疫原性的研究

ＤＮＡ疫苗的突出优点之一是目的基因进入机体后的表达产物属于内源性抗原物质，后者主要通过ＭＨＣ－Ⅰ类途径激发机体的免疫反应，其中特异性细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）反应尤为显著。慢性乙型肝炎患者和乙肝病毒（ＨＢＶ）慢性携带者针对ＨＢＶ的特异性ＣＴＬ反应明显低...     

甲肝患儿唾液 IgM-抗 HAV 的检测

甲肝患儿唾液ＩｇＭ┐抗ＨＡＶ的检测焦公谦黄祖瑚（南京医科大学第一附属医院传染病研究室，南京２１００２９）黄美莲（南京市传染病院检验科）关键词唾液甲肝抗体ＥＬＩＳＡ儿童我国是甲型肝炎的高发区。甲肝特异性ＩｇＭ抗体（ＩｇＭ－抗ＨＡＶ）是目前公认的甲型肝炎...     

多学科统一的肝段解剖命名新建议

１．目前不同的肝段解剖命名主要：（１）传统的解剖学命名：将肝脏分为四叶：左、右叶、尾状叶和方叶。（２）英、美命名法：将肝脏分为两叶四段。左右叶以肝中静脉为界；而左右两叶再各分为两段，即以肝右静脉将右叶分为右后、前两段，以肝左静脉将左叶分之为肝左内、外两段（图１）。（３）法、日命名法：它既考虑了出肝的肝静脉系统，同时又考虑了入肝的肝动脉、门静脉和胆管系统。命名上以区来称谓英美法的肝段。在英美法的基础上增加了一个横断面，此截面水平对应于肝门裂。于是，该平面将原来的四个段各分上下两个部分，进而从腹侧面…     

HBcAg核酸疫苗与白细胞介素表达质粒联合接种小鼠的免疫应答观察

目的观察HBcAg核酸疫苗与鼠白细胞介素12(IL12)和白细胞介素18(IL18)表达质粒联合免疫小鼠所诱导的特异性免疫应答。方法小鼠随机分为载体质粒组、HBcAg核酸疫苗组(核酸疫苗组)、HBcAg核酸疫苗 IL12组(C IL12组)、HBcAg核酸疫苗 IL18组(C IL18组)和HBcAg核酸疫苗 IL12/IL18组(C IL12/IL18组)。载体质粒、HBcAg核酸疫苗、IL12及IL18表达质粒经肌内注射法免疫各组小鼠。采用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清HBcAg特异性抗体、IgG亚类(IgG1,IgG2a)以及小鼠脾淋巴细胞培养上清液干扰素(IFN)γ含量。采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测免疫小鼠特异杀伤性T淋巴细胞(CTL)活性。结果除对照质粒组外,核酸疫苗免疫的各组小鼠均能检出血清抗HBc,C IL12组、C IL18组和C IL12/IL18组的抗HBc终点滴度与C组相比均明显增高(P<0.05)。各组小鼠抗HBcIgG亚类均以IgG2a占优。核酸疫苗免疫组除C IL12 IL18组外,小鼠脾细胞培养上清液IFNγ水平均显著高于对照质粒组(P<0.01)。C IL18组和C IL12/IL18组小鼠脾细胞HBcAg特异性CTL活性强于其他各组。结论IL12和(或)IL18表达质粒与HBcAg核酸疫苗联合免疫,具有增强HBcAg核酸疫苗所激发的免疫应答特别是细胞免疫应答的作用。     

急性乙型肝炎外周血淋巴细胞亚群动态分析

目的 探讨急性乙型肝炎(AHB)患者外周血免疫细胞包括T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞在疾病发展中的动态变化及其意义.方法 流式细胞技术检测17例AHB患者(AHB组)外周血淋巴细胞亚群动态变化和36例慢性乙型肝炎(CHB组)患者及32例正常对照组淋巴细胞亚群分布特点;动态检测AHB患者CD4~+/CD8~+变化,并探讨其与ALT改变及与HBVDNA清除的相关性.结果 AHB组人院4周内外周血CD3~+、CD4~+和CD8~+T细胞频率显著高于CHB组和对照组,NK细胞4周内均低于其余2组(P<0.05).AHB疾病早期ALT高水平异常时CD4~+/CD8~+明显低下;随着ALT恢复正常,CD4~+/CD8~+比值呈逐渐升高趋势.结论 AHB患者外周血免疫细胞的分布与对照组和CHB患者不同,淋巴细胞亚群的动态变化与疾病发展可能有一定的相关性.     

PER-1型超广谱β-内酰胺酶在铜绿假单胞菌中的流行分析

目的调查超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）以及具碳青霉烯酶活性的OXA酶在铜绿假单胞菌中的流行状况。方法针对1997—2003年间本院收集的具临床意义的铜绿假单胞菌,采用8对通用ClassA和ClassD类超广谱β-内酰胺酶基因引物对其进行聚合酶链反应（PCR）,根据结果再进行长片段引物扩增和序列测定;对PCR扩增阳性株与受体菌利福平耐药铜绿假单胞菌PU21行转移接合试验;采用琼脂平皿稀释法测定所有受试菌的MIC;运用脉冲场凝胶电泳（PFGE）方法确定菌株间的遗传相关性。结果47株临床分离铜绿假单胞菌中共检出28株PER阳性菌株,经部分长片段产物序列测定证实为PER-1型超广谱β-内酰胺酶;该产酶菌株经转移接合试验无法将耐药性传递给受体菌;药敏结果显示耐药表型与基因型间有很好相关性,对哌拉西林和头孢他啶高度耐药,同时产酶株对亚胺培南呈现100％的耐药性,对哌拉西林-三唑巴坦亦有一定程度的耐药;PFGE结果显示各菌株间存在垂直传播或有较近遗传相关性。结论本院存在产PER-1型ESBLs铜绿假单胞菌的流行。     

密码子优化对乙肝病毒表面抗原中蛋白核酸疫苗免疫原性的影响

目的:观察密码子优化能否增强乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白核酸疫苗的免疫原性.方法:根据乙型肝炎病毒(adr亚型)表面抗原中蛋白(MHBs)的氨基酸序列,在不改变其氨基酸序列的基础上,设计并人工合成了密码子优化的基因,并将该基因克隆到核酸疫苗载体pSW3891中,构建了密码子优化的表达MHBs核酸疫苗(命名为:pSW3891/MHBs/adr/opt,简称opt).用上述核酸疫苗与表达野生型MHBs核酸疫苗(命名为:pSW3891/MHBs/adr,简称adr)及空载体质粒pSW3891一起瞬时转染293T细胞,应用蛋白质印迹法检测转染细胞中MHBs的表达.采用肌肉注射法,以opt、adr及pSW3891,分别对BALB/c小鼠进行免疫.用EIJSA方法检测免疫后小鼠血清中HBs抗体的滴度,ELISPOT法检测免疫小鼠表面抗原特异性分泌IFN-γ的脾细胞.结果:opl和adr均可在体外293T细胞中高效表达,且opt的蛋白表达量要高于野生型.opt免疫组小鼠特异性抗体滴度和免疫小鼠表面抗原特异性分泌IFN-γ脾细胞数量都要显著的高于adr免疫组小鼠.结论:密码子优化可以增强乙型肝炎病毒DNA疫苗在体外的蛋白表达量及免疫小鼠的体液免疫和细胞免疫原性.