人程序化死亡分子5(PDCD5)核酸和蛋白质序列的数据发掘

目的：以程序化死亡分子5(PDCD5)为靶分子,对其核酸与蛋白质序列进行生物信息学分析,为PDCD5功能的实验研究提供基础,同时也为人类功能基因的生物信息学分析提供新的技术路线。方法：利用数据库相似性搜索、同源物结构比较、表达谱分析和查询基因“邻居”等技术进行数据发掘和数据综合分析。结果：发现人PDCD5在12号和5号染色体上分别存在返座假基因(retropseudogene),小鼠1号染色体也存在小鼠PDCD5 cDNA的返座假基因。热自养甲烷杆菌的PDCD5同源物、泛素及核糖体蛋白S13具有与人PDCD5相似的折叠方式。线虫的PDCD5同源物、泛素及正IAP(inhibitor of apoptosis proteins)分子等在表达谱拓扑图上属于同一基因簇成员,该基因簇与生物合成和蛋白质合成相关。PDCD5同源物在多个基因组中与多种核糖体蛋白相邻。结论：PDCD5存在2个拷贝的假基因。PDCD5除参与细胞凋亡外,预测还与泛素有功能相关性,并可能参与蛋白质的翻译调控。     

新一论的白细胞介素克隆化高潮——兼论计算机克隆的重要贡献

白细胞介素 (Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ ,ＩＬ)是一组具有介导白细胞间相互作用的细胞因子 ,在免疫系统中发挥重要的生理功能。自 1979年第一个白细胞介素被命名后 ,发现和克隆新的白细胞介素一直是国际免疫学研究的热点。但自从 1996年发现ＩＬ 18以来 ,已经有 3年多时间未有新的白细胞介素被发现 ,进入了一段黎明前的沉寂期。现在终于打破了沉寂 ,从1999年 11月开始到 2 0 0 0年底 ,仅仅一年的时间至少有 5个新的白细胞介素被报道 ,另有一些白细胞介素的同源因子被发现 (例如Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ 1 ｌｉｋｅｐｒｏ ｔｅｉｎ 1等[1] ) ,形…     

重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子双体融合分子的三级结构模建

目的：验证重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ，ＧＭＣＳＦ） 双体融合分子（Ｇ２）较ＧＭＣＳＦ单体分子具有高活性的结构机制。方法：利用ＩｎｓｉｇｈｔＩＩ软件，采用同源性模建结合手工拼接的方法模建出Ｇ２ 融合分子的空间三级结构，并将其与ＧＭＣＳＦ单体的结构相比较。结果：模建出的Ｇ２ 融合分子前后两个结构单元在空间位置上相对独立，二者各自的三级构象及二级结构组成均与ＧＭＣＳＦ非常相似。另外，从受体结合位点的分析结果来看，Ｇ２ 分子在结构上有能力同时结合两分子的ＧＭＣＳＦ 受体。结论：Ｇ２ 融合分子中的两个ＧＭＣＳＦ结构单元在结构上基本保持了ＧＭＣＳＦ 单体分子的三级结构，其空间结构允许两分子的ＧＭＣＳＦ受体同时结合，引发受体间的交联，从而产生高活性。     

制备性SDS—PAGE法纯化人重组IL—3

利用制备性SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进行人重组白细胞介素—3(IL—3)的纯化,回收率可达84.3%,纯度90%以上,保持高度生物活性,并有方法简便,实验周期短的优点,已小批量供应国内实验室进行人IL—3的体外研究.     

蓖麻毒素及其A、B链的提取分离纯化的研究

本文研究蓖麻毒素及其A、B链的提取、分离、纯化,根据B链能与Sepharose-6 B上的半乳糖结合,而A链不具有这一性质,用β-巯基乙醇使蓖麻毒素直接在Sepharose-6B柱上断链,然后分别用Tris-HCl和Tris-HCl-半乳糖溶液洗脱,首次把蓖麻毒素的制备、纯化以及A、B链的断链、分离结合起来,大大简化了工艺。     

可溶性重组CD4研究进展

CD4是单链的细胞膜表面抗原,主要存在于T辅助细胞(Th),最早是利用单克隆抗体OKT4发现,因而又称T4抗原,现已统一命名为CD4,它在MHC第二类抗原限制性的免疫应答中起重要作用。自从发现CD4为人免疫缺陷病毒(HIV)感染Th细胞的主要媒介以来,用基因工程生产可溶性重组CD4(rsCD4)来治疗爱滋病激起了科学家们的极大兴趣,近两年这方面的研究可以说是日新月异。     

抑制性底物杂交(SSH)技术研究BXSB小鼠的差异表达基因

目的：利用抑制性底物杂交技术（Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＳＳＨ），以ＢＸＳＢ狼疮小鼠为模型，研究系统性红斑狼（ＳＬＥ）发病相关基因。方法：分离ＢＸＳＢ和Ｃ５７－ＢＬ－６小鼠骨髓细胞，ｍＲＮＡ，反转录构建ｃＤＮＡ文库，利用技术研究ＢＸＳＢ小鼠差异表达基因。结果：获得了１２个阳性克隆，其中有３个克隆编码ＴＣＲ、ＭＨＣⅡ类分子及逆转录病毒基因表达产物，均     

天龙抗肿瘤小分子肽纯化工艺

目的:纯化天龙酶解液,制备小分子肽。方法:用石蜡萃取法除油脂,用Sephadex G-15除氨基酸和盐。结果:天龙酶解液中加入药材质量分数40%的石蜡,加热使完全融化,搅拌,冷藏(6℃)静置4 h,弃去石蜡,水液以每2 mL加于Sephadex G-15柱(1.6 cm×64 cm)上,用去离子水2 mL.min-1洗脱,收集第60～84 mL洗脱液。结论:所筛选的纯化工艺简便可行。     

rhIL-3和rhGM-CSF对人正常骨髓造血干细胞体外维持的作用

应用重组人白细胞介素3(rhIL-3)和重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)对18例正常人骨髓造血干细胞体外悬浮培养1周后,用琼脂集落培养测定CFU-CM的增殖程度。rhIL-3组的CFU-GM增至4.9±1.9倍;rhGM-CSF组增至4.7±1.6倍;rhIL-3+GM-CSF组增至11.5±5.4倍,均高于对照组(P<0.001)。rhIL-3+GM-CSF组的CFU-GM增殖量明显高于rhlL-3组和rhGM-CSF组。结果表明:rhIL-3和rhGM-CSF均能促使造血干细胞在体外短期维持中大量增殖,二者联合应用有协同作用。