全文获取类型
收费全文 | 248篇 |
免费 | 9篇 |
国内免费 | 15篇 |
专业分类
耳鼻咽喉 | 2篇 |
妇产科学 | 1篇 |
基础医学 | 100篇 |
口腔科学 | 3篇 |
临床医学 | 8篇 |
内科学 | 7篇 |
外科学 | 5篇 |
综合类 | 109篇 |
预防医学 | 2篇 |
药学 | 15篇 |
中国医学 | 10篇 |
肿瘤学 | 10篇 |
出版年
2023年 | 2篇 |
2022年 | 3篇 |
2020年 | 1篇 |
2019年 | 4篇 |
2018年 | 2篇 |
2017年 | 1篇 |
2016年 | 1篇 |
2015年 | 2篇 |
2014年 | 2篇 |
2013年 | 1篇 |
2012年 | 2篇 |
2011年 | 2篇 |
2010年 | 1篇 |
2009年 | 4篇 |
2008年 | 5篇 |
2006年 | 5篇 |
2005年 | 6篇 |
2004年 | 1篇 |
2003年 | 13篇 |
2002年 | 16篇 |
2001年 | 10篇 |
2000年 | 17篇 |
1999年 | 15篇 |
1998年 | 8篇 |
1997年 | 17篇 |
1996年 | 18篇 |
1995年 | 15篇 |
1994年 | 27篇 |
1993年 | 18篇 |
1992年 | 4篇 |
1991年 | 4篇 |
1990年 | 11篇 |
1989年 | 14篇 |
1988年 | 6篇 |
1987年 | 1篇 |
1985年 | 1篇 |
1984年 | 1篇 |
1983年 | 5篇 |
1982年 | 6篇 |
排序方式: 共有272条查询结果,搜索用时 0 毫秒
41.
目的:构建高效真核表达载体以提高细胞因子在真核细胞中的表达效率.方法:利用基因克隆技术构建了两个新的白细胞介素-6(IL-6)真核表达载体pAdCIIL-6和P335ciil-6.将它们瞬时转染COS-7细胞后,利用IL-6依赖株7TD1对上清中的IL-6进行检测.结果:两种新建载体分别能提高IL-6在真核细胞中的表达效率5.5和3.4倍.结论:腺病毒的病毒相关Ⅰ和ⅡRNA(virus-associated Ⅰand ⅡRNA, VAⅠand VAⅡ)和腺伴随病毒(adeno associated virus, AAV) 的倒转末端重复序列(inverted terminal repeat, ITR)能提高细胞因子在真核细胞中的表达. 相似文献
42.
细胞因子基因工程新药开发研究进展 总被引:4,自引:0,他引:4
结合本实验室的相关工作,综合介绍了近年进入临床实验的一些细胞因子动物,包括IL-1,IL-1ra,IL-3,GM-CSF-IL-3融合蛋白,IL-6,IL-10,IL-11,IL-12,同时,也介绍了可能在近年进入临床的新细胞因子,包括IL-13,IL-15,IL-16,希望能对国内细胞因子药物开发研究提供启发。 相似文献
43.
白细胞介素-1(IL-1)受体拮抗剂是由单核核巨噬细胞等分泌的小分子蛋白质,通过特异地与白细胞介素-1受体结合阻粘IL-1的生物活性,在治疗败血性休克,AML,CML,移植物抗宿主反应,炎症,发热等疾病中有显著疗效,是一种很有发展前景的新型生物应签调节剂。 相似文献
44.
45.
马大龙 《医学分子生物学杂志》1989,11(4):156-158
利用基因工程,可将外源基因导入大肠杆菌或其它工程细胞,使其作为生物工厂生产人类需要的蛋白质。在利用大肠杆菌表达外源基因时,必须考虑表达的基因载体、外源基因的性质、原核细胞启动子、读码框架及宿主菌调控系统这5个基本条件。本文结合笔者工作,介绍提高外源基因在大肠杆菌表达效率的一些技术进展。为提高外源基因转录水平,可选择合适的启动子、改进宿主菌调控系统和引入转录终止区。在提高外源基因转译水平方面,需改善核糖体结合点结构,考虑密码子使用的问题和增加mRNA稳定性。为提高外源蛋白的稳定性,可选择蛋白酶缺陷的宿主菌、注意蛋白质N端规律,或利用外泌型表达基因载体。 相似文献
46.
白细胞介素-2-乙肝病毒前S抗原融合蛋白在真核细胞中的分泌表达 总被引:1,自引:0,他引:1
为了协同人白细胞介素-2(IL-2)与乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)前S抗原(preSAg)的生物学功能,探索能打破持续性感染者对HBV表面抗原(HBsAg)的免疫耐受,诱导机体对HB-sAg和preSAg产生体液和细胞免疫应答的基因免疫与治疗药物,用基因重组方法构建了IL-2和HBV完整preSAg的真核表达嵌合基因及表达质粒pCWIIP。pCWIIP转染的Cos-7细胞能分泌表达IL-2-preS融合蛋白,其表达效率与pCIIL-2转染的细胞表达IL-2一致,细胞上清中IL-2活性单位大于3×103u/ml,并用酶免疫实验法(EIA)检测了preSAg,而其细胞裂解液中IL-2活性很低,preSAg未检测到。本文结果说明preSAg2~19位氨基酸序列的滞留效应是可以克服的。该发现不仅为构建带完整preSAg的新型乙肝疫苗和特异性免疫治疗剂提供了理论与实验依据,而且对蛋白质分泌表达调控的研究也有一定意义。 相似文献
47.
将在真核细胞表达的pCD-huIL-4质粒,经EcoRV及Bam H1酶切,获人IL-4 cDNA的 EcoRV—Bam H1片段,插入经相应 EcoRV及Bam H1酶切处理的pEX-2ΔH质粒,构成pR-hlL-4质粒。此质粒包含除5’-端9个bp缺失外的编码人成熟1L-4分子的全部bp序列。pR-hlL-4质粒酶切图谱鉴定正确,转化E.colipop 2136菌,表达分子量为60 kd的融合蛋白,它占全部菌体蛋白的30%。表达的融合蛋白无可测出的人IL-4的BCGF或TCGF活性。以融合蛋白免疫小鼠及家兔制成的抗血清,在免疫斑点试验中,与人rIL-4及融合蛋白呈特异反应,表明融合蛋白中具有人IL-4抗原分子。 相似文献
48.
一种敏感的改良空斑形成细胞测定法 总被引:6,自引:0,他引:6
1963年Jerne建立的空斑形成细胞(Plaque forming-cell,PFC)测定技术(又称溶血空斑技术)“’可用于检查单个抗体分泌细胞,是研究免疫生物学与免疫药理学的重要方法之一。Jerne最初使用的方法为平皿法,以后PFC测定方法不断改进,Kennedy建立的单分子层法比较敏感,但所用的必 相似文献
49.
小鼠凋亡相关新基因TFAR15的克隆和序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的克隆人白血病细胞凋亡相关新基因TFAR15的小鼠同源序列 ,并比较其在不同种属间的序列同源性。方法利用EST(expressedsequencetag)拼排、RT PCR、DNA序列测定和计算机分析技术 ,对小鼠TFAR15进行研究。结果首次成功地进行了小鼠TFAR15全长cDNA的克隆和序列分析 ,发现小鼠TFAR15与小鼠其它cDNA没有明显的同源性 ,因此提交GenBank并被收录 ,登录号为AF159368。小鼠TFAR15和人TFAR15在核苷酸水平上有92.3 %的同源性 ,在氨基酸水平上有高达98.6 %的同源性 ;同时发现小鼠TFAR15在氨基酸水平上与线虫C14A4.11蛋白质有38 %的同源性。功能区分析发现 ,小鼠TFAR15cDNA序列含编码212个氨基酸的开放读码框架 ,有2个可能的N 糖基化位点 ,3个可能的caseinkinaseII磷酸化位点 ,4个可能的PKC磷酸化位点 ,并且可能是一种胞浆蛋白(cytoplasmicprotein)。结论小鼠TFAR15是进化上高度保守的新基因 ,可能具有重要的功能。 相似文献
50.
人白细胞介素—9cDNA的PCR扩增及其在大肠杆菌的表达 总被引:8,自引:1,他引:8
利用PCR技术从人外周血T细胞cDNA文库中扩增出人IL-9的cDNA,将其连入大肠杆菌表达载体后,可大大肠杆菌高效表达出人重组IL-9融合蛋白,表达量占菌体蛋白的25%左右,有明显的刺激正常人骨髓细胞集落形成的活性。 相似文献