多巴胺对体外培养神经细胞的影响

目的　研究高浓度多巴胺 (DA)对神经细胞的毒性作用。　方法　观察不同浓度、不同时间DA对体外培养神经细胞的毒性 ,并用琼脂糖凝胶电泳、原位末端标记、流式细胞仪进行细胞凋亡的检测。　结果　 (1)高浓度DA引起神经细胞凋亡 ;(2 )给予 80、16 0、32 0 μmol/LDA处理 2 4h后神经细胞凋亡率分别为 (41 49± 1 32 ) %、(6 5 6 7± 1 6 8) %、(84 6 5± 2 2 1) % ,明显高于浓度效应对照组〔(2 0 7± 0 2 6 ) % ,P <0 0 5〕 ;(3)在给予 30 0 μmol/LDA处理的条件下 ,经过 12、2 4、48h后 ,神经细胞的凋亡率分别为 (37 90± 0 39) %、(6 9 34± 3 31) %、(82 0 7± 0 86 ) % ,明显高于时间效应对照组〔(2 30± 0 11) % ,P <0 0 5〕。　结论　高浓度DA对体外培养神经细胞具有细胞毒性 ,诱导神经细胞凋亡 ,具有时间及剂量效应。     

赛庚啶对大鼠脑损伤后脑微血管5－羟色胺代谢变化的作用

赛庚啶对大鼠脑损伤后脑微血管５－羟色胺代谢变化的作用徐如祥，柯以铨，陈长才，蔡颖谦５－羟色胺（５－ＨＴ）等单胺类神经递质在脑损伤脑继发性损害中的作用引起重视。脑微血管（ＢＭＶ）壁上的５－ＨＴ受体被过度激活可使血脑屏障损害，通透性增加，引起和加剧脑继发...     

6-羟基多巴定向注射建立帕金森病大鼠模型的实验研究

目的探讨立体定向间隔注射6-羟基多巴(6-OHDA)毁损黑质致密部(SNc)和中脑腹侧被盖(VTA)建立类似于人类帕金森病(PD)中晚期的PD大鼠模型方法。方法近交系Wistar大鼠50只,脑立体定向将6-OHDA注入大鼠右侧VTA及SNc,间隔两周,对阿朴吗啡(Apo)诱发旋转后旋转不明显或无稳定左侧旋转模型再次制模,并观察大鼠行为学改变,免疫组化检测黑质多巴胺(DA)能神经元的数量以及高效液相-荧光法检测黑质纹状体中DA含量的变化。结果(1)50只大鼠中有41只经APO诱导表现为恒定左侧旋转且结果稳定,旋转圈数>210r/30min,视为成功PD大鼠模型,部分大鼠伴有震颤、活动迟缓、嗅探、觅食、竖尾等异常行为改变,并且可持续存在16周;(2)免疫组化结果:PD大鼠模型毁损侧黑质区多巴胺能神经元较对侧及对照组减少大于90%;(3)PD大鼠右侧黑质纹状体中DA含量较左侧及对照组减少90%以上。结论6-OHDA毁损SNc及VTA间隔注射法可有效建立模拟人类PD中晚期的大鼠PD模型。     

葡萄球菌蛋白A胶体金分子三维构象的原子力显微镜分析

目的　确定葡萄球菌蛋白A胶体金分子特征性构象。　方法　应用原子力显微镜扫描生理状态下分布在云母表面的葡萄球菌蛋白A胶体金分子 ,并进行理论计算。　结果　葡萄球菌蛋白A胶体金分子为 5 7.0 0nm× 33.0 0nm× 2 1.6 1nm椭圆球形“左轮手枪状”复合物。　结论　原子力显微镜可以在生理状态下直观测定生物大分子纳米尺度结构。葡萄球菌蛋白A胶体金分子的特征性结构可以作为神经细胞膜表面N -甲基 -D -天冬氨酸受体 (NMDAR)原子力显微镜观测的原位标记物。     

一种新型数据库在内镜室管理中的应用

近年来,计算机技术发展迅速,逐步进入各医院的日常管理中。我们尝试使用 Microsoft的 Access 软件建立了一个数据库系统,对内镜室的病案资料及科室人员资料进行综合管理,避免了以往低效的手工文书档案统计。现具体介绍如下:     

6-羟多巴胺诱导帕金森病模型鼠黑质神经细胞凋亡的观察

目的　探索帕金森病 ( PD)发病过程中多巴胺能神经元可能的死亡方式。　方法　采用TUNEL法、流式细胞术及免疫组化方法检测 6-羟多巴胺 ( 6-OHDA)诱导 PD模型鼠中脑黑质神经细胞凋亡情况。　结果　TUNEL法及流式细胞术均观察到 PD模型鼠中脑黑质神经细胞凋亡样改变。在 2周、1个月、3个月模型鼠中 ,TUNEL法显示黑质神经细胞凋亡率分别为 ( 48.5± 5.5) %、( 1 1 .0± 3 .0 ) %、( 6.5± 3 .0 ) %,流式细胞术检测亚 G1期细胞百分率分别为 ( 57.3± 9.7) %、( 1 1 .7±3 .6) %、( 6.5± 1 .7) %,两种方法结果具有一致性。2周模型组与 1个月、3个月模型组比较 ,差异有显著性 ( P<0 .0 0 1 )。　结论　 6-OHDA诱导 PD模型鼠中脑黑质神经元存在以细胞凋亡为主的死亡方式 ,细胞凋亡在 PD发病中可能起关键作用。     

白细胞介素1α与胶质细胞源神经营养因子不同组合对骨髓源性神经干细胞体外诱导分化的影响

目的:比较白细胞介素1α与胶质细胞源神经营养因子不同组合条件下骨髓基质细胞分化情况,探讨骨髓基质细胞诱导分化为神经干细胞及多巴胺能神经元的分化条件。方法:2005-03/09在解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所进行。①实验分组:实验分为空白对照组;胶质细胞源神经营养因子 白细胞介素1α组,后者又分为10μg/L 100ng/L,10μg/L 200ng/L,20μg/L 100ng/L,20μg/L 200ng/L,1000μg/L 100ng/L组。②细胞模型制作:用全骨髓法培养骨髓基质细胞。③骨髓基质细胞以5×108L-1接种,悬浮于本实验室配制的神经干细胞培养基中。空白对照组:血清终浓度为体积分数为0.1的胎牛血清。细胞接种48h后,胶质细胞源神经营养因子 白细胞介素1α各组分别加入相应质量浓度的胶质细胞源神经营养因子 白细胞介素1α。④应用Olympus光学显微镜观察细胞抗-神经巢蛋白和D2受体阳性染色阳性细胞数目计数。结果:①加入胶质细胞源神经营养因子、白细胞介素1α增殖培养48h可见细胞分裂相。②诱导6d,部分细胞有神经巢蛋白成分表达。③3周测出DA受体D2检测阳性,胶质细胞源神经营养因子 白细胞介素1α10μg/L 100ng/L组细胞诱导分化率显著高于10μg/L 200ng/L,20μg/L 100ng/L,20μg/L 200ng/L,1000μg/L 100ng/L组及空白对照组犤依次为:(11.70±0.55)%,(3.62±0.78)%,(4.14±0.41)%,(3.3±0.63)%,(4.92±0.34)%,(1.61±0.68)%,P<0.05或0.01犦。结论:骨髓基质细胞在体外培养条件下,经过胶质细胞源神经营养因子、白细胞介素1α诱导分化作用,配合使用高浓度(体积分数为0.1)血清可获得巢蛋白阳性的神经前体细胞及表达D2受体阳性的多巴胺能神经元;10μg/L 100ng/L为最佳诱导分化质量浓度。     

骨髓基质细胞源神经干细胞自体移植治疗脑干损伤初步观察

目的探索骨髓基质细胞源神经干细胞对脑损伤的治疗作用。方法将犬自体骨髓基质细胞在体外扩增并经BrdU标记及预分化处理后,通过脑室或循环途径将其植入脑干损伤模型组及对照组动物脑内或体内,并通过组织学方法观察其在损伤脑区及其它脑区的分布情况。结果骨髓基质细胞源神经干细胞自体移植治疗组(C、D组)BrdU阳性细胞在脑损伤区的分布明显多于(P<0.05)对侧非伤区、对照组(A组及B组)同部位、及其它非损伤脑区。结论骨髓基质细胞源神经干细胞对损伤脑区有亲合性;骨髓基质细胞源神经干细胞可通过向损伤脑区的迁移而发挥治疗作用。     

体外诱导骨髓基质细胞向神经干细胞和成熟神经细胞分化的实验研究

探索骨髓基质细胞（BMSCs）分化为神经干细胞和成熟神经细胞的可行性，为BMSCs在神经科学领域的应用提供依据。以犬的BMSCs为实验对象，利用bFGF、RA、GDNF等作为增殖或分化诱导因子，对各阶段细胞进行免疫细胞化学鉴定。结果发现，增殖培养24－72h见细胞分裂像和克隆单位；诱导培养3天，部分细胞开始表达NSE或GFAP，继续增殖培养仍可见细胞克隆（干细胞特性）；诱导培养第10天有成熟神经细胞形成（成分鉴定证实）。说明BMSCs在体外培养条件下，经过多种因子的“程序性”作用，可以向神经干细胞、成熟神经元及胶质细胞方向分化。提示BMSCs可作为“种子细胞”在神经科学领域加以利用。     

星形胶质细胞水通道4表达变化与胶质瘤性脑水肿的关系

目的研究脑胶质瘤细胞对体外血脑屏障模型水转运及星形胶质细胞水通道4的影响。方法利用重水的荧光特性及高效液相系统检测体外血脑屏障模型对水转运的变化。采用半定量RT-PCR的方法分析胶质瘤细胞作用后星形胶质细胞水通道4的表达变化。结果胶质瘤细胞可以明显增强体外血脑屏障模型对水由内皮细胞腔面至基底面的扩散。这一过程不依赖于白蛋白等大分子物质的通透性变化。同时,胶质瘤细胞明显降低了胶质细胞水通道4的表达水平。结论胶质瘤细胞可以明显增强体外血脑屏障模型对水由内皮细胞腔面向基底面的扩散。胶质瘤性脑水肿不一定是血浆中大分子物质通透性增加的结果。胶质瘤细胞对胶质细胞水通道4的影响可能是胶质瘤性脑水肿产生的分子机制之一。