EGF对真皮成纤维细胞中cyclinD1和CDK-4表达的影响

目的　探讨表皮生长因子 (EGF)对作为皮肤组织工程种子细胞之一的真皮成纤维细胞中 cyclin D1和 CDK- 4表达的影响 ,以从细胞周期探讨 EGF促进真皮成纤维细胞生长的机制 .方法　用含 10 0 m L· L- 1 胎牛血清的 DMEM,加入5 0 mg· L- 1的 EGF培养 SD大鼠的真皮成纤维细胞 ,通过MTT检测、流式细胞仪分析观察细胞的生长状态 ,免疫组化检测 cyclin D1和 CDK- 4的表达 ,结合流式细胞仪分析观察细胞的周期变化 .结果　 MTT检测、流式细胞仪结果都显示 5 0mg· L- 1 的 EGF能显著促进真皮成纤维细胞的生长增殖 ,免疫组化结果显示 ,二者一致 .结论　 5 0 mg· L- 1 的 EGF对真皮成纤维细胞的生长有极大的促进作用 ,促进了细胞周期蛋白 cyclin D1和 CDK- 4的表达 ,使细胞 G1期变短 .     

急性肠系膜上动脉栓塞的手术探讨

目的总结手术治疗急性肠系膜上动脉栓塞的临床体会,探讨常见并发血管病变的处理方法。方法1990年1月～2005年12月年收治32例急性肠系膜上动脉栓塞患者,均在全身麻醉下行肠系膜动脉切开取栓,同时处理合并的内脏血管病变。结果30例获得临床治愈,2例分别死于呼吸衰竭和心力衰竭。术后1年复查无栓塞及局部狭窄,CTA示肠系膜上动脉通畅,侧枝循环正常。30例术后随访2～15年,23例无局部狭窄或复发,7例死于心肌梗塞或脑出血。结论早期诊断、早期切开取栓同时处理伴发疾病,可显著提高急性肠系膜上动脉栓塞的临床治愈率。     

自体移植静脉内膜增殖的动态性变化

目的 观察移植后不同时期内膜增殖（ＩＨ）与平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖的变化情况。方法 建立大鼠自体静脉移植模型，分别于术后６、４８小时、１、２、４周切取移植静脉。应用免疫组织化学等动态观察移植血管ＩＨ及ＤＳＭＣ增殖情况，辅以计算机图像分析仪分析。结果 ＳＭＣ增殖程度与ＩＨ变化是一致的；均于术后逐渐增加，于１周达高峰，术后４周，ＰＣＮＡ阳性ＳＭＣ减少，与术后１周相比差异显著（Ｐ〈０．０１），ＩＨ差异无     

获取SD仔鼠角朊细胞和真皮成纤维细胞6种方法比较

目的 :探讨如何以简便快捷的方法获得大量最佳生长状态的角朊细胞和真皮成纤维细胞以作为皮肤组织工程的种子细胞 .方法 :用 2 .5 g·L -1 胰酶、35 g·L -1 热溶素和 9.0× 1 0 3 U·L-1 Dispase分别在不同条件下处理皮肤标本 ,观察表皮与真皮的分离情况 ,并分别培养角朊细胞和真皮成纤维细胞 ,观察比较细胞的贴壁率和克隆形成率 ,通过MTT和BrdU检测观察细胞的生长状态 ,并分别用不同方法获得的细胞构建组织工程皮肤 .结果 :在各种条件下 ,Dispase处理组获得的细胞数量、细胞贴壁率和克隆形成率均优于其他消化液处理组 ,细胞纯度高 ,生长状态良好 ;用其他方法获得的细胞生长状态相似 ,都可成功构建组织工程皮肤 .结论 :使用9.0× 1 0 3 U·L-1 Dispase可以简便快捷的获得大量生长状态良好的角朊细胞和真皮成纤维细胞 ,以作为皮肤组织工程的种子细胞 ,合适的消化方法、时间和温度可以最大限度保持原代细胞的活力     

SV40大T抗原对人皮肤成纤维细胞生物学行为的影响

目的：研究SV40大T抗原（LT）基因对人正常皮肤成纤维细胞体外转化作用，以及转化后细胞生物学特性的改变。方法：采用脂质体介导的方法。利用含有LTcDNA的质粒psv3-neo转染人正常皮肤成纤维细胞。G418筛选后，挑选阳性克隆扩大培养，观察基因及蛋白在细胞内的表达。以及对细胞增殖等生物学特性的改变情况。结果：分离获得转化细胞克隆，原位杂交显示LTmRNA在转染细胞质中表达。免疫组化结果显示，细胞质中有SV40大T抗原表达。细胞计数，BrdU，流式细胞仪检测表明，经过一段时间的旺盛生长，在转染后第16代，细胞即进入危机期，以一种比衰老细胞更快的速度死亡。结论：LT可以促进正常皮肤成纤维细胞增殖，但这种能力是有限的，在转染后期甚至会促进细胞死亡，所以要使人的正常皮肤成纤维细胞永生化，单纯利用LT的转染是不够的，还需要结合其它的转化方式。     

低分子量肝素对自体移植静脉内膜增殖的影响

目的 探讨低分子量肝素（ＬＭＷＨ）对移植静脉内膜增殖的影响。方法 将大鼠自体颈静脉内侧支移植于髂总动脉，应用ＬＭＷＨ（６０Ｕ／Ｈｇ）日一次皮下注射一个月。应用病理形态学及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）免疫组织化学，通过计算机图像定量分析，观察其对移植静脉内膜平滑肌细胞增殖的影响。结果 ＬＭＷＨ治疗组和空白对照组移植静脉段内膜增厚程度、ＰＣＮＡ阳性细胞数无显著性差异，ＬＭＷＨ组靠近远端吻合口处动脉增生程     

自制明胶-PVA-壳聚糖冻干膜止血效果的动物实验观察

目的探讨明胶、聚乙烯醇(PVA)、壳聚糖三者混合冻干膜对创伤出血创面的止血效果。方法制作大鼠股动脉创伤出血模型、家兔耳动脉创伤出血模型以及家犬肝创伤渗血模型,自制材料与复合胶原海绵、氧化纤维素、明胶海绵和医用纱布止血做比较,观察止血时间和计算出血量,并观察止血的可靠性。结果实验表明,明胶-PVA-壳聚糖材料止血时间短,出血量少,止血效果可靠。结论明胶-PVA-壳聚糖材料可作为创面止血修复材料。     

关于《石膏牙雕刻方法》课程的调查和思考

通过对本校77名2005级口腔医学本科学员的问卷调查,了解<石膏牙雕刻方法>课程的授课情况及效果,并在此基础上分析这门新兴课程的下一步优化方案.     

小鼠腭裂相关基因的克隆及基因表达的意义

目的:筛选并克隆正常组小鼠腭突与腭裂组小鼠腭突组织中差异表达的基因,探讨它们在腭裂发生过程中表达的意义。方法:建立C57BL/6N小鼠腭裂模型,分别提取胚胎12d的正常组及维甲酸处理组小鼠腭突组织中的mRNA,利用PCR的改良消减杂交技术,筛选并克隆小鼠腭突正常发育时期与腭裂形成过程中差异表达的基因及测序。结果:共获得差异表达的基因40个,2个为新基因。结论:克隆的新基因及fau基因可能对腭突间充质细胞的生长、分化具有重要的调控作用。