咽部异感症与上消化道疾患关系的临床观察

咽异感症是耳鼻喉科常见的主诉之一,症状多在做吞咽动作,尤其是空吞涎液时明显.患者常诉咽部有"团块"或"异物",并企图以反复吞咽清除之,但往往均不能如愿.经专科检查,常不存在鼻、咽喉部器质性病变.并无真正的吞咽困难,临床多属于一种神经官能症表现.本文通过对67例咽部异感症的临床观察,发现本症不纯粹是一种癔病的表现,而与咽食管部的某些潜在性功能失调,胃、十二指肠炎、消化性溃疡等上消化道疾病有关.现将观察结果报告如下:     

依赖核酸序列的扩增技术在诺如病毒基因检测中的应用

目的将一种新颖的核酸扩增技术-依赖核酸序列的扩增技术(NASBA)应用于诺如病毒的快速检测与辅助诊断。方法根据NCBI诺如病毒RdRp基因保守序列设计特异性引物,建立NASBA检测方法,同时验证该方法的特异性、灵敏度和重复性,并利用所建立的NASBA检测方法对临床收集的108例病毒性腹泻患者粪便标本进行检测。结果本文建立的NASBA检测方法对诺如病毒具有高度特异性,与轮状病毒等腹泻相关病毒均无交叉反应,反应体系具有很高的稳定性;灵敏度高,即诺如病毒最低检测线为20 pg/μl;检测周期短,NASBA反应在42℃90 min即可进行有效扩增,3 h~4 h即可完成样品中目标基因的筛选。结论本研究应用的诺如病毒NASBA检测方法特异性好、灵敏度高、快速易操作,尤其适用于诺如病毒的日常监测和暴发疫情的应急诊断。     

日本血吸虫抗独特型抗体NP30对急性血吸虫病的免疫治疗作用

目的探讨日本血吸虫抗独特型抗体NP30对急性血吸虫病的免疫治疗作用。方法根据L9（3^4）正交表设计动物实验,日本血吸虫尾蚴感染C57BL／6小鼠后注射抗独特型抗体NP30,观察不同治疗方案各组小鼠的存活时间并计算不同时问段的生存率,取小鼠肝脏石蜡切片,HE染色,测量小鼠单个虫卵肉芽肿的直径及面积。结果各实验组小鼠的生存中位数为45～78d,其中第4组生存中位数为71d,比同样感染40条尾蚴的对照组2（53d）延长了33．96％。Cox回归分析显示小鼠存活时间主要与尾蚴感染水平、抗体注射途径有关（P均〈0．05）。各实验组小鼠单个虫卵肉芽肿平均直径为179．07～226．86μm,平均面积为（32．11～5t．37）×10^3μm^2;对照组各组小鼠单个虫卵肉芽肿平均直径为205．89～239．86μm,平均面积为（44．61～57．24）×10^3μm^2。极差分析及方差分析均显示抗独特型抗体NP30的注射方式和注射剂量是影响虫卯肉芽肿平均直径和面积的主效应因素。NP30的最佳免疫治疗方案为感染尾蚴28d后,以每鼠每只20μg的剂量连续3次肌肉注射。结论抗独特型抗体NP30可改善血吸虫感染小鼠的生存状况,降低血吸虫对宿主造成的免疫病理损害,具有治疗急性血吸虫病的潜能。     

抗日本血吸虫单链抗体免疫毒素的构建 表达及生物学活性鉴定

目的构建抗日本血吸虫单克隆抗体NP11-4单链抗体和绿脓杆菌外毒素衍生物PE38KDEL的原核融合表达载体,并对其表达产物进行生物学活性鉴定。方法应用PCR方法体外扩增NP11-4VH、VL、scFv和PE38KDEL基因,经测序后将scFv及PE38KDEL基因通过限制性内切酶双酶切及连接反应,构建原核表达载体pBAD/gIIIA-scFv-PE38KDEL,转化E.coliTop10F′,L-阿拉伯糖诱导表达,表达产物经Western blot及ELISA鉴定其活性。结果构建了重组免疫毒素表达载体pBAD/gIIIA-scFv-PE38KDEL,诱导表达产物主要以包涵体形式存在,分子量约为70kD;经变性、复性后的重组免疫毒素与血吸虫可溶性虫卵抗原有较好的结合活性。结论构建及表达了抗日本血吸虫单链抗体免疫毒素,为血吸虫病治疗提供了一条新思路。     

肠道病毒71型湖州分离株的遗传进化和重组分析

目的 对湖州市肠道病毒71型（EV71）进行基因特征及重组特点分析。方法 对2011-2012年湖州市EV71分离株进行全基因组测序,并与其基因型及A组肠道病毒其他血清型的原型株进行全序列比对,使用Mega 4.0软件绘制系统进化树。然后利用Simplot 3.5.1软件进行相似性分析,对基因重组加以验证。结果 P1区系统进化分析显示,2011-2012年湖州市EV71株属于C4基因型的C4a亚型。P1、P2、P3区的系统进化和相似性分析证实湖州市分离株在非结构蛋白2B编码区存在EV71 C基因型和Cox A16、14、4型间重组。结论 2011-2012年湖州市EV71分离株为C4a亚型,与2004年以来中国大陆优势株流行趋势一致。EV71 C4基因型湖州市株存在型间重组现象。     

浙江省湖州市柯萨奇病毒A组16型分离株VP1区序列测定及系统进化分析

目的了解浙江省湖州市引起手足口病(HFMD)的柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)分离株的VP1区基因特征。方法采用荧光定量反转录聚合酶链反应方法,对2011-2012年湖州市538份HFMD临床标本进行肠道病毒核酸检测;采用RD、Hep2细胞对Cox A16核酸阳性的标本进行病毒分离。选取17株具有代表性的Cox A16分离株进行VP1区的序列测定和分析。结果 2011-2012年湖州市HFMD的主要病原为Cox A16和肠道病毒71型(EV71);湖州地区Cox A16分离株VP1区的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为89.5%~100%和99.3%~100%。与Cox A16的B1基因亚型代表株核苷酸同源性最高,在系统进化树上与B1亚型代表株相聚在一起,并且同时存在B1a和B1b两个进化分支。结论湖州市的Cox A16分离株与国内其他地区类似,同属于B1基因亚型,并且有B1a和B1b两个进化分支共同进化和循环。     

卡孕栓预防产后出血的临床应用

目的 探讨卡孕栓预防产后出血的效果。方法 将我科从2003年8月至2004年8月自然阴道分娩的产妇选60例随机分为两组，一组为缩宫素组，一组为卡孕栓组，各组30例进行药效对比。结果 卡孕栓组的产后出血较缩宫素组明显的减少。     

肝细胞癌人源抗c-Met抗体Fab的筛选及鉴定

目的 从大容量人源Fab抗体库中筛选全人源抗c-Met抗体,并对抗体与肝癌细胞的结合活性进行初步鉴定.方法 利用Met-Fc融合蛋白对大容量人源Fab抗体库进行固相筛选,经过5轮固相筛选,随机挑选30个克隆经酶联免疫吸附法差减鉴定,阳性克隆进行可溶性表达,用c-Met表达阳性的人肝癌细胞株鉴定抗c-Met抗体Fab的结合活性.结果 Western blot、免疫荧光结果显示,c-Met分子表达于SMMC721、BEL7402人肝癌细胞膜上;从大容量人源Fab抗体库中筛选出1株抗c-Met抗体Fab(AM2-26),经免疫共沉淀、荧光激活细胞分类术、免疫荧光分析,结果显示AM2-26与人肝癌细胞表面c-Met分子有较好的结合活性.结论 从人源Fab抗体库中筛选的AM2-26能够与肝癌细胞表面c-Met分子特异性结合,为研制用于肝癌生物治疗的靶向药物,提供了候选分子.     

CT对颅脑外伤在临床诊断的应用

目的：评价CT对颅脑外伤的临床诊断价值。方法：病例分析98例颅脑外伤患者的CT扫描资料。结果：98例颅脑外伤患者中，颅骨骨折56例；脑挫裂伤35例；脑内血肿14例；蛛网膜下腔出血37例；硬膜外血肿8例；硬膜下血肿34例；硬膜下积液33例。结论：CT能清楚、准确的显示颅脑外伤情况，对颅脑损伤的临床诊断和指导治疗有重要价值。