枯草溶菌素转换酶9在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的表达变化

目的:研究枯草溶菌素转换酶9(proproteinconvertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的表达变化。方法:采用大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,大鼠分4组:对照组(n=5)、实验组分别为缺血45 min再灌注6 h、12 h及24 h组(各组n=5)。实验终点时,收集血液及缺血区心肌组织,全自动生化分析仪测定心肌酶谱(CK、CK-MB和LDH),HE染色观察心肌组织病理学改变,分别采用实时定量PCR及Western blot方法检测心肌PCSK9 mRNA及蛋白水平表达的改变。结果:与对照组相比,实验组CK、CK-MB和LDH在6 h和12 h组均明显升高有统计学意义,24 h组恢复正常;HE染色发现心肌组织病理损伤随着再灌注时间延长而加重;实验各组心肌PCSK9 mRNA及蛋白水平表达均显著高于对照组,并且随着再灌注时间的延长表达水平逐渐增高。结论:PCSK9可能参与心肌缺血再灌注损伤的病理生理过程。     

超声微泡介导血管内皮生长因子基因转染大鼠阴茎组织

目的 探讨超声靶向破坏微泡介导血管内皮生长因子165(VEGF₁₆₅)转染于高脂模型大鼠阴茎海绵体组织的可行性。方法 以含4％胆固醇及1％胆酸饲料饲养36只2月龄雄性SD大鼠3个月,建立大鼠高脂模型,将其随机均分为高脂模型组(对照组)、VEGF₁₆₅组和1.0 W/cm²超声+微泡+VEGF₁₆₅组(US+MB＋VEGF₁₆₅组)。于基因转染后7天处死大鼠,采用荧光定量PCR检测VEGF₁₆₅基因表达水平,以Western Blot检测大鼠阴茎组织VEGF蛋白质的表达水平,用免疫组织化学法(IHC)检测大鼠阴茎组织内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)蛋白质表达。结果 转基因7天后,US+MB＋VEGF₁₆₅组VEGF₁₆₅基因水平明显高于VEGF₁₆₅组及对照组(P均<0.05),其阴茎海绵体组织VEGF蛋白质表达较VEGF₁₆₅组及对照组增加(P均<0.05);IHC结果显示,US+MB＋VEGF₁₆₅组大鼠阴茎组织eNOS较其他组高表达(P均<0.05)。结论 超声靶向破坏微泡可介导VEGF₁₆₅基因在大鼠高脂模型阴茎海绵体组织的高效转移,为基因治疗高脂勃起功能障碍提供了实验依据。     

PPARγ基因修饰对兔骨髓间充质干细胞成脂分化及ADRP、LPL表达的影响

目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）基因转染对免骨髓间充质干细胞（MSCs）向脂肪细胞分化的影响,探讨PPARγ在脂肪细胞早期分化中可能的调控机制。方法原代培养新西兰大白兔MSCs,应用脂质体介导法将pEGFP-N1-PPARγ表达载体转入MSCs中,G418筛选。分成不诱导组、空转染诱导组及转染诱导组以成脂诱导剂诱导分化,每日观察细胞形态学变化,镜下计数并计算脂肪细胞分化率,采用RT-PCR方法检测脂肪分化相关蛋白（ADRP）、脂蛋白脂酶（LPL）mRNA表达,Western blot检测ADRP、LPL蛋白表达。结果不诱导组细胞内没有脂滴出现,空转染诱导组和转染诱导组部分细胞成功分化为脂肪细胞,转染诱导组分化率明显高于空转染诱导组（P〈0.05）;不诱导组ADRP、LPLmRNA及蛋白均不表达,转染诱导组ADRP、LPLmR-NA及蛋白表达水平显著高于空转染诱导组（P〈0.05）。结论PPAR-γ基因转染MSCs可促进其向脂肪细胞分化,增强其分化能力,可能与促进ADRP、LPL基因和蛋白的表达有关。     

环状RNA在三阴乳腺癌中的研究进展

三阴乳腺癌(TNBC)是乳腺癌中恶性程度最高的亚型,其特征为不表达雌激素受体、孕激素受体和人表皮生长因子受体2。TNBC具有易侵袭和转移、预后不良、对常规化疗或靶向治疗效果不佳的临床特点。研究表明,环状RNA(circRNA)在TNBC组织表达异常,并与TNBC患者的临床病理特征和预后相关。circRNA可通过调控转录和剪接、作为微小RNA海绵、与蛋白质结合以及作为翻译模板,参与TNBC肿瘤细胞增殖、转移和耐药过程。因此,circRNA在TNBC的早期诊断、临床治疗和预后监测方面有广泛的应用前景。本文阐述了circRNA的形成和作用机制,并总结了circRNA在TNBC中的生物学功能和临床意义。     

高强度聚焦超声作用于心脏组织的临床应用前景

高强度聚焦超声 (ＨＩＦＵ)是一在治疗学方面具有潜在应用价值的新技术。应用频率为 5 0 0ＫＨｚ -10ＭＨｚ的ＨＩＦＵ能在可预测的深度产生局部高温 ,而对周围组织无损伤。在神经外科、泌尿、肿瘤以及在心脏选择性传导组织消融治疗方面的应用颇具前景。用无创性手段对先天性心脏病局部组织造成定位损伤 ,以减轻其致命的血流动力学障碍 ,将会取代有创的方法。因此 ,我们进行了ＨＩＦＵ对不同哺乳动物心脏组织的离体损伤研究 ,以猪的瓣叶、犬的心包、新生儿的房间隔及左心耳为研究材料。将其用支架固定并浸泡在室温条件的水槽中 ,使用频率为 …     

超声微泡造影剂对心肌组织的生物学效应及介导VEGF基因转染大鼠心肌的实验研究

目的探讨超声微泡造影剂对心肌组织的生物学效应及其介导VEGF基因转染大鼠心肌的有效性. 方法 18只健康雄性Wistar大鼠,取3只采用超声波在鼠胸壁破坏微泡造影剂,观察对心肌组织显微结构的影响.将另15只急性心肌梗死3天后的雄性Wistar大鼠分为3组,每组5只.第一组采用超声破坏微泡造影剂的方式,将pcD2VEGF121基因转染大鼠心肌至造影剂不再显影(约6min);第二组尾静脉输入同等剂量携pcD2VEGF121基因的造影剂;第三组为对照.2周后,取缺血心肌组织行VEGF免疫组织化学染色,观察心肌组织血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达情况.结果超声波破坏微泡造影剂能使心肌组织充血,产生大量空泡,并有部分心肌细胞坏死.采用超声微泡造影剂介导的VEGF基因转染,能明显增强大鼠心肌组织VEGF蛋白的表达.结论超声微泡造影剂能明显增强对组织的空化效应,其介导的VEGF基因治疗是一种无创、新型、高效的基因转移方法.     

二烯丙基二硫对结肠癌SW480细胞系生长影响的研究

目的观察二烯丙基二硫(DADS)对人结肠癌SW480细胞系生长的抑制作用。方法体外细胞培养,用MTT法、集落形成试验进行观察,体内移植瘤抑制试验采用裸鼠移植瘤模型。结果用不同浓度DADS(30μg/mL,40μg/mL,50μg/mL,60μg/mL,70μg/mL)处理SW480细胞48小时后,测得细胞生长抑制率为23．8％、43．7％、49．7％、60．9％、66．0％,该药的I％约为50μg/mL;用不同浓度DADS(20μg/mL,30μg/mL,40μg/mL,50μg/mL)处理SW480细胞lO天后,集落形成抑制率为48．7％、56．5％、61．6％、76．2％,IC50为20—30μg/mL之间;以30mg／kgDADS对SW480细胞裸鼠移植瘤进行实验,测得瘤重抑制率为62．86％,电镜检查可见结肠癌SW480细胞有早期凋亡改变。结论DADS对结肠癌SW480细胞系生长具有明显抑制作用。