CFSE和AnnexinV双标记技术检测细胞毒性T淋巴细胞的杀伤效应

目的 利用CFSE和AnnexinV对靶细胞进行染色,建立一种通过流式细胞仪技术检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤效应的新方法.方法 应用磁珠分 OT-Ⅰ T细胞受体(TCR)转基因小鼠CD8+CTL细胞和脾脏树突状细胞(sDC),将2种细胞和鸡卵蛋白(OVA)抗原肽共培养65 h后分析其细胞分裂增殖、IFN-γ和IL-4细胞内因子及穿孔素、颗粒酶等效应分子的表达特性,收获具备杀伤效应的CD8+CTL细胞.利用预先激活的小鼠CD8+CTL细胞作为效应细胞,CFSE标记的同系小鼠脾细胞作为靶细胞,体内体外2种条件下利用AnnexinV染色靶细胞检测特异性CTL杀伤效应,并与CFSEhigh和CFSElow标记靶细胞检测体内CTL杀伤效应的经典方法进行比较.结果 OT-Ⅰ初始CD8+CTL细胞体外活化培养后有4个分裂峰,54.1%的CTL细胞表达IFN-γ,0.78%的细胞表达IL-4,穿孔素、颗粒酶2种CTL效应分子均为阳性表达,CD8+CTL细胞已经具备CTL杀伤活性.体外实验结果显示OVA+靶细胞在共培养条件下,AnnexinV阳性细胞比例明显高于分离培养条件下[(62.4±3.5)%比(28.3±2.2)%,P＜0.01],OVA-的AnnexinV阳性靶细胞比例在不同培养条件下差异无统计学意义[(20.3±4.8)%比(17.3±2.9)%,P＞0.05].共培养条件下OVA+靶细胞其AnnexinV阳性细胞比例也明显高于OVA-靶细胞(P＜0.01),在分离培养条件下差异则无统计学意义(P＞0.05).活化的CD8+CTL细胞所介导的杀伤效应具有抗原依赖性和部分的细胞接触依赖性.体内CTL实验中,利用CFSE和AnnexinV双标记的方法检测出靶细胞的杀伤率高于未孵育OVA抗原肽的对照组靶细胞[(52.63±8.12)%比(13.84±4.37)%,P＜0.01].而同等条件下利用CFSEhigh和CFSElow双标记的方法检出靶细胞杀伤率为41%.结论 CFSE和AnnexinV双标记靶细胞的方法检测CTL杀伤效应与单纯的使用CFSEhigh和CFSElow标记靶细胞方法有很好的可比性,该策略为利用流式细胞仪技术检测细胞杀伤功能的方法学提供了新的选择.     

新型口腔修复用钛锆铌锡合金的摩擦性能

背景:目前用于牙科修复体制作的钛合金特别是纯钛因其表面硬度较低、耐磨性较差,尤其在固定义齿修复时与天然牙不匹配,限制了其在口腔修复领域的应用.目的:探索新型口腔修复用钛锆铌锡合金的耐磨损性能.方法:使用MMV-1立式万能摩擦磨损试验机,以天然牙釉质为对照,滑石瓷为对磨物,在人工唾液,37℃试验工况下,对口腔修复用Ti-Zr-Nb-Sn、纯钛(TA2)进行二体摩擦磨损试验.采用扫描电镜观察表面磨损形貌,X射线衍射能谱仪分析磨屑成分,显微硬度仪测试表面硬度,电子天平得出磨损量.结果与结论:Ti-Zr-Nb-Sn合金、天然牙釉质的磨损体积量、显微硬度>纯钛(TA2)(P<0.05).Ti-Zr-Nb-Sn合金磨损机制主要为磨粒磨损;纯钛磨损机制主要为黏着磨损,同时伴有磨粒磨损;牙釉质磨损主要为黏着磨损和磨粒磨损.磨屑成分分析Ti-Zr-Nb-Sn合金磨屑元素成分为Ti、Zr、Sn元素,未见Nb元素;纯钛磨损后磨屑成分主要为Ti元素.结果表明Ti-Zr-Nb-Sn合金较纯钛(TA2)具有更好耐磨损性性能,可以初步认为Ti-Zr-Nb-Sn合金是一种理想口腔修复用金属材料.     

探索在本科教学中腹腔镜操作培训的规范化流程

  目的  探索在本科教学中腹腔镜操作培训的规范化流程。  方法  选取2017年6月至2019年6月在昆明医科大学第一附属医院胃肠与疝外科实习的90名本科实习生，分3期培训，每期30人，培训4周，每期培训30学时。培训内容包括腹腔镜基础理论学习、手术视频学习、体外模拟箱基本技能操作训练（拾豆、缝合打结、动物组织缝合）以及腹腔镜手术虚拟训练系统培训。根据每期学员的反馈意见调整下期课时安排，对比3期不同课时安排下学员理论考核成绩、操作技能考核成绩及学员培训满意度。  结果  3期所有培训学员理论考核成绩均合格，差异无统计学意义（P > 0.05）。学员完成培训后，完成体外模拟箱基本技能操作训练（拾豆、缝合打结、动物组织缝合）操作用时均短于培训前，差异有统计学意义（P < 0.05）。体外模拟箱基本技能操作训练、腹腔镜手术虚拟训练系统培训分配课时较多学员在第 2、3 期培训后完成拾豆、缝合打结、动物组织缝合用时均短于分配课时少的第1期，差异有统计学意义（P < 0.05）；第 2、3期学员完成拾豆、缝合打结、动物组织缝合用时比较，差异无统计学意义（P > 0.05）。培训后反馈结果提示，第3期学员满意度和参与积极性最高。  结论  科学的安排培训时间及培训方法可以提高本科实习医学生的腹腔镜微创技能，具有推广价值。     

单采血浆后自身抗体阳性慢性丙型肝炎患者肝组织的病理学特点

目的观察单采血浆后慢性丙型肝炎(CHC)患者自身抗体的检出率及其特点,了解自身抗体阳性CHC患者肝组织病理学特点。方法收集1992年1月-1995年12月甘肃省定西县医院和定西传染病专科医院的120例单采血浆后感染HCV的患者为试验组,另外选取同地区健康人群11例作为对照组。对CHC患者进行自身抗体检测;将自身抗体阳性组(n=44)与阴性组(n=76)肝组织病理学特点进行对比分析。计量资料组间比较采用t检验,计数资料组间比较采用χ~2检验。结果 120例单采血浆后CHC患者自身抗体检出率为36.7%(44/120),主要的自身抗体为抗核抗体,占21.7%。自身抗体阳性组较阴性组肝小叶内点灶状坏死炎症评分(2.11±0.88 vs 1.64±0.88,t=2.349,P=0.021)及汇管区内部细胆管反应评分(1.86±0.71 vs 1.13±0.66,t=4.217,P<0.001)明显升高;自身抗体阳性组肝小叶间胆管损伤比例较阴性组升高,差异有统计学意义(86.4%vs 55.3%,χ~2=12.129,P=0.001);而2组肝纤维化和肝脂肪变性程度差异无统计学意义(P值均>0.05)。结论单采血浆后CHC患者常见自身抗体阳性,自身抗体阳性者部分肝脏病理损伤较重。     

7 E教学模式联合SP在普外科护理实习教学中的应用研究

目的 探讨7E教学模式[激发（elicit）、参与（engage）、探索（explore）、解释（explain）、精制（elaborate）、评价（evaluate）、延伸（extend）]联合标准化病人（standardized patients,SP）在普外科护理实习教学中的应用。方法 将分配到解放军总医院普外科实习的80名护生作为研究对象,按进科先后顺序分为对照组和观察组,每组40人。对照组采用传统教学,观察组运用7E教学模式联合SP开展教学。考核两组实习护生理论和实践操作成绩,比较组间非技术性技能评分。采用SPSS 22.0进行t检验。结果 观察组实习护生理论成绩[（89.36±2.13） vs. （87.64±2.07）]和实践操作考核成绩[（92.07±4.33） vs. （85.19±3.46）]均优于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。观察组护生的非技术性技能评分（人文关怀能力、能激发学习兴趣、与患者沟通交流能力、对疾病的理解深度和护理能力、知识延伸能力、团队协作能力、临床思维能力、临床问题决策能力）均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 7E教学模式联合SP应用于普外科护理实习带教,能更好地提升实习护生的理论知识和实践操作能力,有利于提高护生非技术性技能水平。     

抗骨质疏松药物治疗联合骨关节护理对绝经后骨质疏松患者疼痛和生活质量的影响

【摘要】 目的 探讨抗骨质疏松药物干预联合骨关节护理对绝经后骨质疏松伴腰背痛患者疼痛程度和生活质量 的临床疗效。方法 选取2018年1月?2018年10月期间绵阳市第三人民医院妇科收治的70例绝经后骨质疏松伴腰 背痛患者,按随机数字表法分为对照组和观察组,每组各35例。对照组给予常规止痛药物干预和常规护理,观察组在常 规护理基础上给予抗骨质疏松药物干预加骨关节护理。1月后对比分析两组患者的疼痛情况以及生活质量。结果 干预1月后两组患者疼痛程度和生活质量均有显著改善(P<0.05);与对照组比较,观察组疼痛程度降低更显著(P<0.05),生活质量评分升高更明显(P<0.05)。结论抗骨质疏松药物治疗联合骨关节护理对绝经后骨质疏松伴腰背痛 的女性疼痛程度减轻和生活质量提高效果显著优于常用止痛药物加常规护理,可在临床推广应用。     

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者血液流变学指标检测

目的 探讨阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(Obstrctive sleep apnea syndrome,OSAS)血流变学指标的变化。方法 对50例阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者及50例健康人血液流变学指标进行检测。结果 阻塞性睡眠呼吸暂停综合征组血流变学各项指标明显高于对照组(P<0.01,0.05)。结论 阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者血液流变性有异常改变,对此类患者进行血流变学检测具有重要意义。     

柚皮苷通过抑制CYP450基因表达保护药物所致HL-7702细胞

目的探讨肝爽颗粒主要成分柚皮苷是否具有预防药物性肝损伤的功能以及保护作用的机制。方法选取具有肝毒性的药物(曲格列酮和双氯芬酸钠)制造体外模型,预防性地应用不同浓度的柚皮苷,通过半数抑制率(IC_(50))、转氨酶水平、乳酸脱氢酶水平、Caspase3基因水平评价HL-7702细胞的损伤情况。评价不同浓度的柚皮苷对细胞色素P450(CYP450)家族基因的改变情况。结果柚皮苷能够明显升高曲格列酮和双氯芬酸钠的IC_(50),具有降低转氨酶、Caspase3表达的作用。但这种改善具有剂量依赖性,其中100μmol/L柚皮苷的保护作用最明显,1μmol/L柚皮苷和10μmol/L柚皮苷的保护作用不明显。比较CYP代谢酶基因改变情况发现,100μmol/L柚皮苷能明显抑制其表达(P0.05),1μmol/L柚皮苷和10μmol/L柚皮苷的抑制作用不明显。结论肝爽颗粒主要成分柚皮苷能够通过抑制CYP450酶的功能,从而起到预防作用。     

脓毒性心肌病临床诊治进展

自1984年提出脓毒性心肌病(SICM)的概念以来,目前仍然没有SICM统一的诊断、治疗标准。近20年有越来越多关于SICM的发病机制、诊断以及管理策略的研究,认识到SICM可能诊断不足,并且与预后不良相关。目前对于SICM没有基于高质量临床证据的管理建议,SICM的治疗是以脓毒性休克的治疗为基础,以血流动力学和组织灌注为导向的支持性措施。连续动态床旁超声心动图有利于早期识别SICM,有助于实施个体化治疗和管理,以改善预后。