醒脑健神胶囊对大鼠脑缺血后海马迟发性神经元坏死的保护作用

近年来,大量文献报道短暂性脑缺血可导致海马ＣＡ1区神经元选择性坏死,并且海马ＣＡ1区神经元损伤是一个缓慢进行性过程,短暂性脑缺血后随着再灌流期延长,神经元损伤进一步加重,此现象称为迟发性神经元坏死(ｄｅｌａｙｅｄｎｅｕｒｏｎａｌｄｅａｔｈ,ＤＮＤ)。本实验目的在于阐明兴奋性氨基酸和Ｃａ2 在短暂性脑缺血后海马ＤＮＤ发生机制中的作用,并用醒脑健神胶囊进行治疗,以探讨其对该损伤的脑神经细胞的保护作用。资　　料实验动物　雄性ｗｉｓｔａｒ大鼠65只,体重170～200克,由解放军309医院动物中心提供。实验药品　醒脑健神胶囊:吉林…     

增殖细胞核抗原法研究莪术和三氧化二砷对晶状体上皮细胞增殖的抑制作用

目的:探讨用增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达法研究莪术和三氧化二砷对晶状体上皮细胞增殖的抑制作用,为防治后发性白内障提供实验依据。方法:采用重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)诱导体外培养的牛晶体上皮细胞(LEC)增殖;流式细胞术(FCM)检测莪术(RC)和三氧化二砷(As2O3)对增殖状态的牛LEC增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的抑制作用,并探讨浓度—效应关系。结果:①rhbFGF使PCNA蛋白表达率明显上升(89.82±2.79)%,与对照组(63.13±3.23)%比较有显著性差异(P<0.01);②RC和As2O3对LEC内PCNA蛋白表达有明显的下调作用,低、中、高不同浓度的RC和As2O3作用24h后,其PCNA蛋白表达率分别为(51.00±3.34)%、(34.29±3.66)%、(23.06±2.91)%和(46.67±4.63)%、(21.97±1.75)%、(13.89±1.61)%。与增殖组(89.82±2.79)%比较有显著性差异(P<0.01);③随着RC和As2O3浓度升高,PCNA蛋白表达率下降,呈明显的剂量—效应关系(P<0.01)。结论:莪术和三氧化二砷可抑制晶状体上皮细胞增殖,对防治后发性白内障具有广阔的前景。     

五味子乙素对晶状体上皮细胞内Ca2+cAMP cGMP的影响

目的研究旨在探讨五味子乙素对氧化损伤的晶状体上皮细胞内Ca2+、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,从细胞信号转导角度揭示天然药物防治白内障的细胞和分子学机制.方法采用牛晶状体上皮细胞进行晶状体上皮细胞(LEC)原代和传代培养,以含有过氧化氢(H2O2)的培养液孵育LEC复制氧化损伤模型,并加入五味子乙素单体共同孵育.分别采用四甲基偶氮唑兰(MTT)比色测定法观察在不同时间和浓度条件下LEC活性变化,采用荧光分光光度计测定不同时间细胞内钙离子浓度[Ca2+]i以及放射免疫分析法测定不同时间LEC内cAMP、cGMP的含量变化.结果①H2O2组可引起LEC吸光度值(A)明显下降(P＜0.01),五味子乙素能明显增强氧化损伤的LEC活性,并呈剂量-效应关系和时间-效应关系.②氧化损伤的LEC[Ca2+]i升高(P＜0.01);五味子乙素可以降低由H2O2引起的细胞[Ca2+]i的升高,并呈时间-效应关系.③H2O2组cAMP浓度升高;cGMP浓度下降(P＜0.01);五味子乙素使cAMP水平下调,cGMP水平上升(P＜0.01),并呈时间-效应关系.结论五味子乙素可明显抑制LEC氧化损伤及凋亡,其作用机制可能是通过钙信号系统、cAMP信号系统、cGMP信号系统及其相互作用来调节生物学效应.     

车前子对晶状体上皮细胞氧化损伤防护作用的信号转导机制

目的：研究车前子对过氧化氢（H2O2）所致氧化损伤的晶状体上皮细胞（LEC）内钙（Ca^2＋）、环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）的影响,探讨归肝经明目中药防治白内障的细胞信号转导机制。方法：将H2O2与传代培养的牛LEC共同孵育复制氧化损伤模型,同时加入车前子水提取液孵育后,用四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测LEC活性,用荧光分光光度法检测LEC内钙离子的浓度（[Ca^2＋]i）、放射免疫分析法检测LEC内cAMP和cGMP含量,并探讨不同浓度的车前子及孵育12、24、36h的影响。结果：H2O2组LEC活性下降,车前子可明显增强氧化损伤的LEC活性（P〈0.01）,呈浓度依赖关系和时间依赖关系。H2O2组LEC的[Ca^2＋]i升高,车前子可显著降低由氧化损伤所致的LEC的[Ca^2＋]i的升高（P〈0.01）,呈时间-效应关系。H2O2组LEC的cAMP浓度升高、cGMP浓度下降,车前子可使氧化损伤的LEC的cAMP水平显著降低（P〈0.01）、cGMP水平显著升高（P〈0.01）,也呈时间-效应关系。结论：车前子可明显抑制LEC氧化损伤及凋亡,[Ca^2＋]i、cAMP和cGMP信号系统及其相互作用调节生物学效应可能是其细胞和分子生物学的主要作用机制。     

解热醒神注射液对内毒素性发热家兔下丘脑cAMP、IL-1β含量的影响

目的:观察解热醒神(JRXS)注射液对内毒素(ET)性发热1h家兔体温、下丘脑cAMP、IL-1_β含量的影响。方法:复制家兔ET性发热模型,用放免法检测下丘脑及脑脊液cAMP、下丘脑IL-1_β的含量。结果:ET组的ΔT[(0.40±0.11)℃]、TRI₁(1.78±0.79)、下丘脑cAMP含量[(2.90±0.40)nmol/g]、脑脊液cAMP含量[(32.10±4.51)nmol/L]、下丘脑IL-1_β含量[(6.08±0.79)ng/g]显著高于生理盐水(NS)组及JRXS+ET组(P＜0.01)。JRXS+ET组ΔT[(0.10±0.10)℃]、TRI₁(0.36±0.64)、下丘脑cAMP含量[(1.37±0.27)nmol/g]、脑脊液cAMP含量[(14.40±3.69)nmol/L)]、下丘脑IL-1_β含量[(2.90±0.37)ng/g]接近NS组,但与ET组比较有非常显著差异(P＜0.01);4组下丘脑及脑脊液cAMP含量、下丘脑IL-1_β含量变化与体温变化呈正相关。结论:JRXS能明显抑制ET引起的发热反应,其抑制效应的机制与降低ET引起的下丘脑cAMP、IL-1_β含量增多有关。     

解毒通络方对脑缺血损伤海马区突触可塑性的影响

目的　观察解毒通络方对大鼠脑缺血损伤后海马神经毯的突触形态与突触素P38的表达的影响。方法 :本文应用超微结构分析与免疫组化方法。结果　缺血损伤引起海马CA1区突触前成分溃变、突触数密度下降、突触素P38低水平表达 ;术后 8周 ,模型组与治疗组出现数量较多的新生突触和突触素P38表达水平的提高 ,治疗组突触数密度恢复最为显著 ,已达假手术组的 87 4% ,并明显高于模型组 ;与假手术组比较 ,模型组突触素P38表达COD值提高到 80 % ,而治疗组提高到 114 7% ,治疗组COD值显著高于模型组 (P<0 0 1)。结论　解毒通络方具有促进突触再建和增强、完善再建突触效能的作用     

炎症因子及益肾活血泄浊汤对大鼠肾小球系膜细胞生长的影响

目的：探讨部分炎症因子及益肾活血泄浊汤对体外培养大鼠肾小球系膜细胞生长的影响。方法：应用脂多糖（ＬＰＳ）及白细胞介素６（ＩＬ－６）作为刺激因子，观察其促系膜细胞增殖的作用；并采用血清药理学方法，提取动物的含药血清作用于一述受刺激的系膜细胞，观察益肾活血泄浊汤对系膜细胞增殖的影响。结果：ＬＰＳ和ＩＬ－６具有明显促进系膜细胞增殖作用。结论：系膜细胞是益肾活泄浊汤发挥治疗作用的重要靶细胞，这可能是该方防     

益肾活血泄浊汤治疗大鼠系膜增生性肾小球肾炎的实验研究

采用小鼠抗大鼠Thy1.1单克隆抗体复制大鼠系膜增生性肾炎模型 ,分为益肾活血泄浊汤治疗组、模型组和正常组。每周测定大鼠 2 4h尿蛋白及尿潜血 ,于第 2、5、8周时测定血清白蛋白、肌酐及尿素氮 ,结束时测定血液流变学 ,并进行免疫荧光、光镜及电镜观察。结果表明 :与病理组结果相比 ,治疗组各项指标均有显著性差异 (P <0 .0 5～P <0 .0 1) ,形态学观察也显示治疗组较病理组损害减轻。提示益肾活血泄浊汤能够明显保护病鼠肾功能 ,有效防止血液粘度升高 ,并延缓肾硬化发展的进程     

复圣散对内皮细胞"缺血再灌注样损伤”及高脂诱导损伤的保护作用

以人脐静脉内皮细胞"缺氧-复氧”并"缺糖-高糖”和高脂攻击以模拟脑缺血再灌注造成内皮细胞损伤,观察含复圣散的血清对此损伤的作用.结果表明,"缺氧、缺糖”后"复氧、高糖”和高脂攻击对内皮细胞均可造成明显损伤,导致细胞内MDA含量明显增加、SOD活性明显下降.而含复圣散血清可以显著改善上述损伤.     

大鼠系膜增生性肾小球肾炎模型的病理形态学观察

目的 :观察大鼠系膜增生性肾小球肾炎 (MsPGN)模型的病理形态学变化。方法 :采用一次性鼠尾静脉注射小鼠抗大鼠Thy1 1单克隆抗体法复制大鼠MsPGN模型 ,应用光镜、荧光显微镜、偏振光显微镜及透射电镜观察模型大鼠肾小球系膜细胞及系膜基质的变化 ;结果 :系膜细胞明显增生 ,细胞外基质 ,包括Ⅰ、Ⅲ胶原、纤维粘连蛋白 (FN)及层粘连蛋白 (LN)增多 ,个别大鼠肾小球出现硬化及纤维化。结论 :复制出具有典型病变的大鼠MsPGN模型。