指纹图谱技术在中药注射剂研究中的应用

文章通过10年来国内外相关文献的检索和归纳,回顾了指纹图谱技术在中药注射剂中的应用情况,肯定了指纹图谱技术作为中药注射液在研发过程中的检测和评价方法有着不可代替的地位,同时提出了该技术在中药注射剂存在的问题及对策,为后续开展新中药注射剂的开发及进入国际化市场提供借鉴和理论指导。     

牛黄、栀子配伍对大鼠局灶性脑缺血再灌注不同时段脂质过氧化损伤的影响

目的: 通过检测牛黄、栀子及二者配伍对大鼠局灶性脑缺血再灌注不同时段脂质过氧化损伤的影响,探讨治疗缺血性中风在该作用环节不同时段的作用特点,研究其配伍阻抑脑缺血级联反应的时序特征.方法:用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,观察牛黄、栀子及二者配伍对缺血再灌注24h和72h两个时段大鼠神经症状、脑组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的影响.结果:牛黄、栀子均能显著改善两个时段大鼠神经功能缺损症状,配伍后作用更为显著;牛黄对缺血再灌注24h、72h脑组织SOD活性和MDA含量均未见明显影响;栀子可明显升高缺血再灌注24h脑组织SOD活性、降低MDA含量,但对再灌注72h脑SOD活性和MDA含量未见明显影响;二者配伍可使缺血再灌注72h脑组织SOD活性显著升高、MDA含量降低,但对再灌注24h脑组织SOD活性和MDA含量的影响并不显著.结论:中药配伍的作用不是简单的效应累加,在同一效应环节上还表现为不同时段的配伍作用特征.     

清开灵注射液多环节阻抑脑缺血级联反应药效物质与作用机理研究

围绕表征方剂复杂物质、多层次评价生物活性成分、分析方剂与机体环境的相互作用三个相互衔接的关键环节,以清开灵解毒通络、开窍醒神功效与中风病"毒损脑络"病机相关,病症结合,方证对应,化学和药理研究密切结合,开展多环节阻抑脑缺血级联反应的药效物质及配伍原理研究.研究表明,清开灵药效物质包括8类45种主要有机成分和12种无机元素,胆酸、黄芩苷、栀子和珍珠母为主要有效部分.进而优化了有效组分阻抑脑缺血级联反应的配比关系;建立了方剂配伍过程多层次指纹图谱特征信息变化和多波长多指标成分指纹图谱的测定与评价方法;发现清开灵阻抑脑缺血级联反应的作用,以缺血启动的炎症病理过程为核心,涉及脑微灌流恶性循环损害及神经细胞损害的多个环节,胆酸、黄芩苷、栀子有效组分和珍珠母有各自相对集中的作用靶点,配伍的整合调节包括多靶点效应、组分相互作用及作用环节关联的时序效应三个作用方式;指纹图谱的特征信息结合药理结果得到的新型组方的物质成分较原方更加清楚,保留并加强了原有主要特征信息;脑脊液、血浆、血清有效组分体内过程分析,以及多环节指标的组分药理学解释,可为方剂中君臣佐使配伍的中医理论内涵提供佐证.表明从多环节病理过程设计靶点进行有效组分筛选与组成新方方法可行,由此建立的多层次指纹图谱与病理多环节药效分析相结合的方法,可成为现代复方中药创制和二次开发的理论模式和技术支持,并为中风病及严重炎症损伤类疾病的新药创制提供理论基础.     

从药物转运体入手开展中药配伍治疗脑病的思路探索

目前,针对脑血管疾病的治疗措施仍显力不从心,其主要原因是由于血脑屏障使得受损脑组织无法获得有效的药物浓度,因此促进有效药物的脑部转运便成为一个亟待解决的关键问题。而已知开启血脑屏障增加药物脑内浓度的方法均存在一定局限性,未能真正有效地应用于临床。由于中药配伍应用能发挥多环节、多靶点的作用,使其在脑系疾病的治疗中显示出明显的优势。因此,在中药复方配伍理论的指导下,从脑部药物转运体入手,开展中药有效组分配伍应用特异性的研究,有效地开启血脑屏障转运功能以提高药物进入脑组织的能力,可为突破脑病治疗药物开发的瓶颈提供新的思路。     

四物汤对红细胞免疫及骨髓干细胞增殖能力的影响

用四物汤对辐射损伤小鼠进行治疗.结果表明:电离辐射对小鼠红细胞免疫功能及骨髓干细胞增殖能力有明显的抑制作用,应用四物汤治疗后红细胞免疫功能得到恢复,说明四物汤有较明显的增强红细胞免疫功能的作用.由骨髓干细胞增殖实验中可看出四物汤可使受照小鼠的骨髓干细胞增殖能力恢复正常.该研究为四物汤治疗辐射损伤引起的红细胞免疫功能及造血功能低下提供了实验依据.     

脑缺血合并高脂血症模型大鼠脑组织的病理改变

背景：大多数脑缺血是在高血压、高脂血症、糖尿病等基础病变条件下发生的。因此,构建高脂血症复合脑缺血大鼠模型,研究基础性病变对脑缺血的影响具有重要意义。 目的：观察高脂血症复合脑缺血大鼠模型脑组织病理学改变,及其高脂血症病理因素对脑缺血的影响。 方法：实验以高脂饲料喂养大鼠制备高脂血症大鼠模型,然后线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型,建模成功后3,7 d,采用TTC染色的方法,观察各组大鼠脑组织缺血部位体积,苏木精-伊红染色观察各组大鼠脑组织缺血边缘区组织病理学改变,透射电镜观察各组大鼠脑组织缺血边缘区细胞超微结构改变。 结果与结论：TTC染色结果显示高脂+脑缺血7 d组大鼠的脑缺血部位体积明显减小。苏木精-伊红染色结果显示所有脑缺血模型都呈典型的缺血性改变,脑缺血7 d的小胶质细胞数量比3 d的明显减少,高脂+脑缺血7d相对于3 d的变化更明显。超微结构显示所有脑缺血模型的神经元和胶质细胞核膜皱缩,线粒体嵴基本完全消失,内皮细胞线粒体减少,神经突触的突触小泡大部分溶解,缺血7 d,尤其是高脂+脑缺血7 d的上述损伤减轻,神经元变性、坏死减少,线粒体损伤恢复,线粒体嵴也明显增多,神经突触的突触小泡明显恢复。说明高脂血症促进了脑缺血损伤的恢复,其原因可能是高脂血症因素激活了体内某种保护机制。     

基于“用补剂必以通络”理论指导气虚证临床用药

临床上,针对脏腑虚弱、经络不通者,采用直补、通补的方法往往事倍功半,而在使用补剂时加入或运用某些具有通络作用的药物,能够使补剂更好地发挥补益的效能,即“用补剂必以通络”之意。经络不仅是周身气血运行的主要场所,也是外邪侵袭人体的主要途径,同时还是药物发挥作用的重要通路。若经络不通,则转输不捷,终使补益不能尽其功,补药不能竭其力。治疗气虚证临证可于补气的同时,灵活配伍桃仁、红花以化瘀通络,升麻、柴胡、香附、砂仁以行气通络,半夏、陈皮以化痰通络,使络通而病解,更好地发挥补剂之作用。     

基于脑内神经递质对的拮抗关系建立新型抑郁症大鼠模型的实验研究

目的:利用脑内神经递质对的拮抗关系建立新型抑郁症大鼠模型。方法:通过海马微量注射低、中、高剂量(1、2和4 g/L)的多巴胺D1受体拮抗剂SCH23390造模后,利用糖水消耗实验、旷场实验及新环境进食抑制实验等评价动物抑郁行为表现,以筛选出最佳造模药物剂量。应用最佳造模剂量造模后,连续观察,2周后对该模型进行评价,通过行为学测试评价该模型症状的稳定性,采用ELISA法测定脑脊液中IL-1β和TNF-α的含量评价该模型的安全性,采用高效液相色谱-质谱技术(HPLC-MS)定量检测大脑皮层和海马中5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、乙酰胆碱(ACh)、谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)等神经递质的水平,以此评价该模型脑内神经递质失衡的病理特征。结果:造模结束后,各剂量造模组大鼠体重、糖水偏爱率、水平运动得分和垂直运动得分均明显降低,新环境进食抑制时间增长,表现为典型的抑郁样行为,以中剂量造模组大鼠的抑郁行为表现最为显著;造模后2周,与正常对照组相比,中剂量造模组大鼠的体重、糖水偏爱率、水平运动得分和垂直运动得分均明显降低(P0.01),新环境进食抑制时间增长(P0.05)。正常对照组、空白对照组和中剂量造模组大鼠脑脊液中IL-1β和TNF-α的含量均无显著变化,说明该模型未造成明显炎性损伤,造模方法安全。与空白对照组相比,中剂量造模组大鼠左侧海马5-HT、NE和Glu含量均显著升高(P0.01),DA和ACh含量均呈降低趋势;右侧海马5-HT、NE和Glu含量均显著升高(P0.05),DA和ACh含量均呈降低趋势;大脑皮层Glu含量显著升高(P0.05),5-HT和NE含量均呈升高趋势,DA和ACh含量均呈降低趋势,说明该模型基本符合抑郁症脑内神经递质失衡的病理特征。结论:此方法可成功复制抑郁症大鼠模型,该模型具有症状典型而持久、成模快速、操作简便安全等特点,较合适的造模药物剂量为2 g/L。     

补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血损伤血脑屏障的影响

目的观察补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血损伤血脑屏障的保护作用,阐明该方抗脑缺血的机理。方法采用线栓法复制大鼠局灶性脑缺血模型。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和补阳还五汤组,造模后24 h给药,补阳还五汤组给予补阳还五汤灌胃,假手术组、模型组给予等量生理盐水灌胃。造模后7 d,评价各组大鼠神经功能并处死取材,四氮唑红染色观察大鼠脑组织梗死体积,HE染色观察大鼠脑微血管的一般形态,ELISA检测大鼠脑组织内基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白水平及血清中血管性血友病因子(vWF)的表达。结果与模型组比较,补阳还五汤组能显著改善神经功能行为评分,减少脑梗死体积,降低MMP-9、MMP-2、VEGF、vWF水平。病理观察结果显示,补阳还五汤组脑组织病理变化较模型组减轻。结论补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血具有保护作用,其作用可能与保护血脑屏障,抑制MMP-9、MMP-2、VEGF、vWF的表达有关。     

多剂量光动力联合姜黄素治疗宫颈癌体外移植瘤及肿瘤组织中肿瘤坏死因子-α、半胱氨酸蛋白酶-8的表达研究

目的 探讨多剂量光动力联合姜黄素治疗宫颈癌体外移植瘤及肿瘤组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及半胱氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)的表达情况.方法 将宫颈癌Hela细胞接种于裸鼠背部皮下,一周后,接种部位出现黄豆大小的肿物,提示造模成功,随即分为10组,每组6只.1...