补肾活血泄浊汤治疗大鼠局灶性节段性肾小球硬化的研究

目的:观察中药补肾活血泄浊汤对大鼠局灶性节段性肾小球硬化的治疗作用及作用机制。方法:采用单侧肾切除术,两次尾静脉注射阿霉素法复制局灶性节段性肾小球硬化模型,分为补肾活血泄浊汤治疗组、模型组和正常组。实验的前6周每周测大鼠24h尿蛋白,后6周隔周测大鼠24h尿蛋白,第60d\,100d时测定血清白蛋白、胆固醇、肌酐、尿素氮含量,并进行光镜、电镜、原位杂交、免疫组化等观察。结果:治疗组各项指标与模型组相比均有显著性差异,形态学观察也显示治疗组损害轻于模型组。结论:补肾活血泄浊汤能够明显保护病鼠肾功能,明显减轻病鼠细胞外基质沉积,延缓病变肾小球硬化的发生。     

益肾活血泄浊汤对大鼠系膜细胞转化生长因子β1表达的影响

探讨益肾活血泄浊汤及脂多糖 (LPS)对大鼠系膜细胞转化生长因子 β(TGF β)mRNA表达的影响。采用体外培养大鼠系膜细胞方法 ,分为益肾活血泄浊汤血清组、LPS病理组及空白组 ,并应用反转录多聚酶链反应技术 (RT PCR) ,观察TGF β1mRNA在各组间的表达情况。结果 :与空白组相比 ,LPS可显著刺激TGF β1的表达 ,而中药血清组较LPS组明显减弱。结论 :益肾活血泄浊汤能够显著降低转化生长因子 β1在系膜细胞中的表达。     

补肾活血泄浊汤对肾小球上皮细胞蛋白质和硫酸肝素蛋白多糖合成的影响

探讨脂多糖 (LPS)、硫酸鱼精蛋白及补肾活血泄浊汤对体外培养大鼠肾小球上皮细胞(GEC)蛋白质和硫酸肝素蛋白多糖 (HSPG)合成的影响。应用LPS、硫酸鱼精蛋白作为刺激因子 ,观察其对GEC蛋白质和HSPG合成的影响 ;并采用血清药理学方法 ,提取动物的含药血清作用于上述受刺激的上皮细胞 ,观察补肾活血泄浊汤对上皮细胞蛋白质和HSPG合成的影响。LPS和硫酸鱼精蛋白具有抑制GEC合成蛋白质及含硫化合物的作用 ;而补肾活血泄浊汤可显著拮抗上述因子的抑制细胞蛋白质和HSPG合成的作用。肾小球上皮细胞是补肾活血泄浊汤发挥治疗作用的重要靶细胞 ,这可能是该方防治以蛋白尿为主要临床表现的肾小球疾病的机制之一。     

Experimental Study on Effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction (补肾活血泄浊汤) in Treating Minute Lesion Nephropathy

To explore the therapeutic effect and mechanism of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction (BHXD) in treating minute lesion nephropathy (MLN) in rats. Methods: The MLN model rats established by a single intravenous injection of Adriamycin were divided into the model and the BHXD groups, and a normal group was set up for control. The effects of treatment on renal function, hemorrheologic parameters, renal tissue transforming growth factor β1 (TGF-β1) expression and poly-anion sites on glomerular basement membrane were observed dynamically. Results: After treatment, all the parameters between the BHXD group and the model group were significantly different respectively, morphological observation also showed the pathological changes in the BHXD group were milder than those in the model group. Conclusion: BHXD treatment could markedly improve the renal function, alleviate blood hypercoagulability and hyperviscosity, protect the anion barrier and delay the progression of glomerular fibrosis and sclerosis.     

大鼠肾小管间质纤维化中肾小管上皮细胞表型转化的研究

目的观察大鼠肾小管间质纤维化过程中,肾小管上皮细胞是否发生表型转化。方法以腺嘌呤150 mg·kg-1·d-1灌胃,连续17周,制作大鼠肾小管间质纤维化模型。采用光镜、透射电镜、偏振光显微镜及免疫组织化学等方法,观察病变肾组织的病理变化以及肾小管上皮细胞的表型转化情况。结果病变肾组织出现肾小管变性、萎缩和再生,肾间质淋巴和单核细胞浸润以及进行性肾间质纤维化等肾小管间质纤维化的典型的病变。偏振光显微镜观察发现,随着病变的进展,间质中以Ⅲ型和Ⅰ型胶原为主的大量胶原纤维增生,并逐渐加重。免疫组化结果显示,损伤的肾小管上皮细胞处于萎缩和再生状态,随着病变的进展,小管上皮细胞内逐渐出现d平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(vimentin)的阳性表达。透射电镜下可见肾小管上皮细胞内原纤维出现以及突破基底膜游离到肾间质中,并与肾间质中的间质细胞、胶原纤维相混合存在。结论在大鼠肾间质纤维化的发生过程中,受损并处于再生状态的肾小管上皮细胞有向肌成纤维细胞等间胚叶细胞转化并产生细胞外基质的功能。     

补肾活血泄浊汤抗大鼠微小病变肾病脂质过氧化损伤的研究

目的：探讨补肾活血泄浊汤对阿霉素所致大鼠微小病变肾病脂质过氧化损伤的影响。方法：采用阿霉素致大鼠微小病变肾病模型。治疗组灌服中药复方补肾活血泄浊汤，正常组和模型组灌服生理盐水。观察中药复方对肾组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD），丙二醛（MDA）含量，肾功能及肾脏病理损伤的影响。结果：治疗组的尿蛋白，血清胆固醇，血清白蛋白以及肾组织SOD，MDA，病理形态的改变均较模型组为轻。结论：补肾活血汤是通过升高血清白蛋白，降低血清胆固醇，改善肾组织活性，氧清除酶活性而发挥其治疗作用。     

炎症因子及益肾活血泄浊汤对大鼠肾小球系膜细胞生长的影响

目的：探讨部分炎症因子及益肾活血泄浊汤对体外培养大鼠肾小球系膜细胞生长的影响。方法：应用脂多糖（ＬＰＳ）及白细胞介素６（ＩＬ－６）作为刺激因子，观察其促系膜细胞增殖的作用；并采用血清药理学方法，提取动物的含药血清作用于一述受刺激的系膜细胞，观察益肾活血泄浊汤对系膜细胞增殖的影响。结果：ＬＰＳ和ＩＬ－６具有明显促进系膜细胞增殖作用。结论：系膜细胞是益肾活泄浊汤发挥治疗作用的重要靶细胞，这可能是该方防     

益肾活血泄浊汤治疗大鼠系膜增生性肾小球肾炎的实验研究

采用小鼠抗大鼠Thy1.1单克隆抗体复制大鼠系膜增生性肾炎模型 ,分为益肾活血泄浊汤治疗组、模型组和正常组。每周测定大鼠 2 4h尿蛋白及尿潜血 ,于第 2、5、8周时测定血清白蛋白、肌酐及尿素氮 ,结束时测定血液流变学 ,并进行免疫荧光、光镜及电镜观察。结果表明 :与病理组结果相比 ,治疗组各项指标均有显著性差异 (P <0 .0 5～P <0 .0 1) ,形态学观察也显示治疗组较病理组损害减轻。提示益肾活血泄浊汤能够明显保护病鼠肾功能 ,有效防止血液粘度升高 ,并延缓肾硬化发展的进程     

大鼠系膜增生性肾小球肾炎模型的病理形态学观察

目的 :观察大鼠系膜增生性肾小球肾炎 (MsPGN)模型的病理形态学变化。方法 :采用一次性鼠尾静脉注射小鼠抗大鼠Thy1 1单克隆抗体法复制大鼠MsPGN模型 ,应用光镜、荧光显微镜、偏振光显微镜及透射电镜观察模型大鼠肾小球系膜细胞及系膜基质的变化 ;结果 :系膜细胞明显增生 ,细胞外基质 ,包括Ⅰ、Ⅲ胶原、纤维粘连蛋白 (FN)及层粘连蛋白 (LN)增多 ,个别大鼠肾小球出现硬化及纤维化。结论 :复制出具有典型病变的大鼠MsPGN模型。     

补肾活血泄浊汤对体外培养肾小球上皮细胞增殖影响

目的:探讨脂多糖(LPS)、硫酸鱼精蛋白、表皮生长因子(EGF)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及补肾活血泄浊汤对体外培养大鼠肾小球上皮细胞生长的影响。方法:应用LPS、硫酸鱼精蛋白、EGF及TNF-α作为刺激因子,观察其对肾小球上皮细胞(GEC)增殖的影响;并采用血清药理学方法,提取动物的含药血清作用于上述受刺激的上皮细胞,观察补肾活血泄浊汤对GEC增殖的影响。结果:LPS、EGF+TNF-α和硫酸鱼精蛋白均可抑制GEC掺入[³H]-TdR,并呈一定的量效和时效关系;而补肾活血泄浊汤可使GEC掺入[³H]-TdR增加。结论:GEC是补肾活血泄浊汤发挥治疗作用的重要靶细胞,这可能是该方防治以蛋白尿为主要临床表现的肾小球疾病的机制之一。