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实时荧光定量PCR法鉴别川贝母掺伪 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立实时荧光定量PCR法检测川贝母样品中掺伪程度.方法 利用川贝母ITS1区序列的特点,设计4条用于特异性鉴别川贝母的正向引物1~4.同时,设计相应的反向引物,配合正向引物组成引物对,进行实时荧光定量PCR扩增.利用川贝母、浙贝母、平贝母、伊贝母和湖北贝母对照品以及市售川贝母样品,通过PCR扩增来考察引物对1~4鉴别川贝母的准确性.通过实时荧光定量PCR法,考察引物检测川贝母掺伪程度的准确性.结果 引物对1~4可以准确检测川贝母的真伪;通过荧光定量PCR法,可准确检测出川贝母样品中的伪品的掺伪程度.结论 该方法简便、快捷、准确,可用于川贝母样品中掺伪程度的定量鉴别. 相似文献
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目的探讨紫金龙氯仿-甲醇组分对脂多糖诱导RAW264. 7细胞炎症的抑制作用。方法脂多糖刺激RAW264. 7细胞建立体外炎症模型后,加入不同质量浓度(50、100、200、400 mg/L)紫金龙氯仿-甲醇组分,ELISA法或比色法检测白介素-6 (IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)含有量,Western blot法测定诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、环氧化酶-2 (COX-2)蛋白表达,以及核转录因子κ转抑制蛋白α(IκBα)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)、c-Jun氨基端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶1/2(Erk1/2)磷酸化水平。结果紫金龙氯仿-甲醇组分可显著抑制TNF-α、IL-6、IL-1β、NO、PGE2释放(P 0. 05,P 0. 01),下调i NOS、COX-2蛋白水平(P 0. 01),降低p38、JNK、Erk1/2、IκBα磷酸化水平(P 0. 05,P 0. 01)。结论紫金龙氯仿-甲醇组分可有效抑制脂多糖诱导RAW264. 7细胞炎症,其机制可能与抑制NF-κB、MAPKs信号通路激活、减少炎症因子释放有关。 相似文献
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目的:研究芭蕉根的化学成分。方法:采用大孔吸附树脂、硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱等多种色谱技术进行分离纯化,通过波谱数据鉴定化合物结构。结果:从芭蕉根70%乙醇提取物中分离鉴定得到15个化合物,分别为:(1R*,2S*,3R*)-2,3-dihydro-1,2,3-trihydroxy-4-(4′-methoxyphenyl)-1H-phenalene(1)、4-hydroxy-2-methoxy-9-phenyl-1H-phenalen-1-one(2)、trans-(1S,2S)-3-(4′-methoxyphenyl)-acenaphthene-1,2-diol(3)、(4E,6E)-1,7-bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)hepta-4,6-dien-3-one(4)、irenolone(5)、bis-demethoxycurcumin(6)、rel-(3S,4aR,10bR)-8-hydroxy-3-(4-hydroxyphenyl)-9-methoxy-4a,5,6,10b-tetrahydro-3H-naphtho[2,1-b]pyran(7)、cis-3-phenyl-acenaphthene-1,2-diol(8)、2-methoxy-9-phenyl-phenalen-l-one(9)、bis-(2-ethylhexyl)terephthalate(10)、胡萝卜苷(11)、2-(4-methoxyphenyl)naphthalene-1,8-dicarboxylic anhydride(12)、lasiodiplodin(13)、4′-dehydroxy-irenolone(14)、2-hydroxy-4-(p-methoxyphenyl)-phenalen-1-one(15)。结论:其中,化合物4、6、10、13为首次从芭蕉科植物中分离得到,化合物3为首次从芭蕉属植物中分离得到,化合物1、2、7、9、12、15为首次从该植物中分离得到。 相似文献
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植物雌激素金雀异黄酮通过p38MAPK通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化 总被引:4,自引:5,他引:4
目的研究丝裂原激活的蛋白激酶(m itogen-activatedprote in k inases,MAPKs)的亚型p38 MAPK在植物雌激素金雀异黄酮(Gen iste in)促进小鼠骨髓间充质干细胞(bone m ar-row-derived m esenchym al stem cells,BMSCs)向成骨细胞分化过程中的作用。方法BMSCs用无酚红-αMEM(含经活性碳吸附的10%FBS、β-磷酸甘油、维生素C)培养,先用Gen iste in处理细胞,观察BMSCs向成骨细胞分化情况,然后用SB203580(p38 MAPK通路阻断剂)以及PD98059(p44/42MAPK通路阻断剂)阻断相应的通路后,再用Gen iste in处理细胞,观察BMSCs向成骨细胞分化情况,并同时观察上述处理后MAPK通路的变化。测定碱性磷酸酶(ALP)活性和钙(Ca)沉积量反映BMSCs向成骨细胞分化状况,用W esternb lot来检测MAPK通路是否激活。结果Gen iste in(0.01,0.1,1μmol.L-1)剂量依赖性增加小鼠BMSCs细胞内ALP活性和细胞外Ca沉积量,并同时引起p38MAPK通路的激活和p44/42MAPK通路的抑制。SB203580预处理能减弱Gen iste in刺激引起的p38MAPK通路的激活并同时阻止Gen iste in诱导的BMSCs向成骨细胞分化。结论Gen iste in在0.01~1μmol.L-1剂量范围内可通过p38MAPK通路促进小鼠BMSCs向成骨细胞分化。 相似文献
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生物技术制药作为一门新兴的交叉学科,其涉及基因工程技术、细胞工程技术、微生物工程技术、酶工程技术、蛋白质工程技术和分子生物学技术等来研究和开发药物,以此来诊断、治疗和预防疾病的发生。因此,生物技术制药实验课程要求学生具备扎实的基础理论知识和熟练的实验操作技能。PBL教学模式作为当前流行的教学模式,重在发展学生发现问题解决问题的能力。笔者尝试将PBL教学模式引入生物技术制药实验课程的教学当中,并且对生物制药实验课程的教学内容和教学方法进行适当改革,为探索更有效的培养高素质药学人才的教学方法提供可借鉴的经验。 相似文献
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传统的生物技术制药实验教学已经不能满足生物技术发展的需求。本文以OBE教学模式为理论指导,以加强学生的道德修养、提高学生的创新及论文撰写能力为出发点,对生物技术制药实验课程的实验内容、教学方式和考核方式进行改革。加强了对实验技能及安全意识的培训;增设了综合性实验,强调课中、课后的汇报及交流;注重学生实验报告及论文撰写的规范性、逻辑性;并建立了一个综合性考核方式,对学生的综合素质进行考核。通过以上改革,不仅能培养学生对科研的兴趣,并且还能提高学生的实验技能、写作能力和创新能力,为培养高质量的创新型、应用型人才打下基础。 相似文献
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目的:探讨酢浆草水提物对体外培养的成骨细胞增殖、分化和矿化的影响。方法:不同质量浓度酢浆草水提物(10,100,200 mg·L-1)作用人成骨肉瘤细胞株SaOS-2后,MTT法测定细胞增殖情况、磷酸对硝基苯酯(PNPP)法检测碱性磷酸酶(ALP)活性,酶联免疫吸附法(ELISA)法检测钙离子(Ca2+)和骨钙素(OTC)的分泌以及用茜素红染色法测定成骨细胞矿化结节数。结果:与空白组比较,酢浆草水提物能明显促进SaOS-2细胞的生长(P<0.01);ALP活性呈时间依赖性增加(P<0.05),以100 mg·L-1剂量组最为显著(P<0.01);增强了细胞分泌Ca2+(P<0.05)和OTC的能力(P<0.01);并且酢浆草中、高剂量组可以明显促进矿化结节形成(P<0.05)。结论:酢浆草水提物在体外可以促进成骨细胞的增殖、分化和矿化,提示酢浆草可能具有促进骨形成的能力。 相似文献
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目的:研究酢浆草70%乙醇和水提取物的急性毒性、抗炎和镇痛作用,分析HPLC图中峰信息量。方法:采用急性毒性最大耐受量试验评价酢浆草70%乙醇和水提取物的急性毒性;冰乙酸致腹腔毛细血管通透性试验考察抗炎作用,冰醋酸致扭体反应考察镇痛作用;使用HPLC对不同溶剂提取物进行分析。结果:在35~1 120 mg·kg-1的剂量范围内各组小鼠活动正常,未见死亡,MTD大于1 120 mg·kg-1;与水提取物比较,70%乙醇提取物能更好地抑制冰乙酸引起的毛细血管通透性增高及扭体反应,HPLC峰信息更丰富,共有峰的提取率更高。结论:酢浆草70%乙醇和水提取物的致死剂量较高,毒性较小,70%乙醇提取物的抗炎镇痛作用优于水提取物,并且能够更充分的富集有效成分。 相似文献