参芎葡萄糖注射液对H2O2诱导的HUVEC细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨参芎葡萄糖注射液(Shenxiong glucose injection,SGI)对H_2O_2诱导的人脐静脉上皮细胞(HUVEC)细胞氧化模型损伤的保护作用及其机制。方法:体外培养HUVEC人脐静脉内皮细胞,用H_2O_2(130 mmol·L~(-1))处理0.5 h,建立HUVEC细胞H_2O_2氧化损伤模型。SGI组HUVEC细胞用(6%,8%,10%)SGI预处理6 h后,再用H_2O_2处理0.5 h。用MTS法检测细胞存活率;用ELISA法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)技术检测凋亡相关基因及蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的mRNA和蛋白表达情况。结果:在130 mmol·L~(-1)H_2O_2作用细胞0.5 h的情况下,细胞存活率降低至50%左右,降低的程度合适,且实验结果重复性好,因此后续实验用该条件建立氧化损伤模型。与H_2O_2组比较,SGI预处理6 h能显著升高细胞存活率(P0.05,P0.01),减少LDH的外漏和MDA的生成(P0.05,P0.01),显著增加SOD,GSH-Px和CAT的活性(P0.05,P0.01)。RT-PCR和Western blot结果表明,SGI能显著上调Bcl-2的表达(P0.05,P0.01),下调Caspase-3,Bax的表达(P0.05,P0.01)。结论:参芎葡萄糖注射液能保护HUVEC细胞对抗H_2O_2诱导的氧化损伤,具有一定的剂量依赖关系,其作用机制可能与抑制细胞凋亡有关。     

毛大丁草抗卵清蛋白诱导的小鼠支气管哮喘作用的活性部位筛选

目的 通过卵清蛋白(ovalbumin，OVA)诱导的支气管哮喘小鼠模型，筛选毛大丁草抗哮喘的活性部位。方法 采用D101大孔吸附树脂法对毛大丁草50%乙醇提取物进行分段富集，依次洗脱得到水、60%乙醇、95%乙醇3个洗脱部位。小鼠通过腹腔注射OVA致敏、雾化吸入OVA激发来复制哮喘动物模型，在激发阶段连续6 d进行灌胃给药治疗。采用行为学评分考察不同部位对哮喘行为学的影响，利用酶联免疫吸附法测定血清、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中IL-5的浓度和血清免疫球蛋白IgE的浓度，采用HE染色对肺组织进行组织病理学评价。结果 模型组小鼠哮喘症状评分升高，血清中IgE和IL-5的水平显著升高，BALF中IL-5的水平显著升高；与模型组比较，60%乙醇段高剂量组小鼠哮喘症状明显改善，血清中IL-5的水平显著降低，BALF中IL-5的水平也显著降低。结合病理学切片观察，60%乙醇段治疗的小鼠较之模型组小鼠肺泡间隔增厚程度降低，血管周围和支气管周围炎症细胞浸润显著减少。结论 毛大丁草50%乙醇提取物的60%乙醇洗脱部位为其抗哮喘的活性部位，其化学成分主要是酚酸类、黄酮类和香豆素类。     

黔产铁皮石斛对阿司匹林诱导胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的保护作用研究

目的 探讨铁皮石斛全提物对阿司匹林诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1细胞损伤的药效作用.方法 体外培养人胃黏膜上皮细胞株GES-1细胞,经阿司匹林处理后,建立阿司匹林诱导GES-1细胞损伤模型;以阿司匹林联合铁皮石斛全提物各浓度预处理GES-1细胞为铁皮石斛组,以阿司匹林联合奥美拉唑预处理细胞为阳性组,并设立阴性对照组,采用MTS法检测细胞存活率,并通过比色法测定细胞上清液中LDH含量.结果 当阿司匹林的浓度为18.5 mmol/L处理GES-1细胞24 h时,细胞的抑制率为40％;铁皮石斛浓度范围0～500 μg/mL内,受损细胞存活率随铁皮石斛剂量增加而升高,LDH释放量逐渐降低(P＜0.05).结论 铁皮石斛对于阿司匹林诱导GES-1细胞损伤具有保护作用.     

对头颈癌放疗患者实施营养相关症状管理教育的效果研究

目的 探讨症状管理教育对头颈癌放疗患者营养相关症状水平和营养状况的影响。 方法 将128例头颈癌放疗患者按不同病区分为对照组与干预组各64例;对照组实施放疗常规护理,干预组在对照组基础上增加分阶段持续性症状管理教育。分别在放疗第1、4、7周和放疗后1个月应用头颈患者症状清单进行营养相关症状评估,同时测量体质量、血清白蛋白及血红蛋白。 结果 干预组不同时间点营养相关症状总分及疼痛、恶心和抑郁严重程度显著低于对照组,体质量、血清白蛋白、血红蛋白显著高于对照组（干预主效应均P＜0.05）。 结论 分阶段持续性症状管理教育能够提高头颈癌放疗患者的症状管理能力,有效减轻患者营养相关症状负荷,改善患者营养状况。     

对开放病房住院抑郁症患者自杀风险评估及防范

目的:探讨如何杜绝开放病房住院抑郁症患者自杀、自伤等行为的发生。方法:采用自制的自杀风险因素评估表,对开放病房住院抑郁症患者100例于入院时进行评估,根据评估结果着重加强相应方面的护理干预。结果:有自杀危险因素评分≥10分55例,入院时有自杀、自责或悲观厌世言行58例,既往有自杀行为30例,既往有过2次或2次以上自杀行为19例。经过干预,患者住院期间均未发生自杀、自伤等行为。结论:对住院抑郁症患者进行自杀危险因素的评估,并加强相应的护理干预措施,有利于减少自杀、自伤等行为的发生。     

基于蛋白质组学分析参芎葡萄糖注射液拮抗H2O2诱导H9c2细胞氧化损伤的作用机制

目的:利用串联质谱标记(TMT)定量蛋白质组学技术探究参芎葡萄糖注射液(SGI)拮抗过氧化氢(H₂O₂)诱导H9c2细胞氧化损伤的作用机制。方法:体外培养H9c2细胞,H₂O₂诱导H9c2细胞建立氧化损伤模型,利用细胞增殖与毒性检测法(MTS)检测细胞存活率,高效液相色谱法(HPLC)进行肽段分级,超高效液相色谱-质谱联用技术检测H9c2细胞的蛋白表达,使用MaxQuant(v1.5.2.8)进行数据检索,高分辨质谱定量分析筛选差异表达蛋白,通过基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库对差异表达蛋白进行生物信息学分析,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内脂质结合蛋白2(Plin2)和原肌球蛋白1(Tpm1)的蛋白表达水平进行验证。结果:通过谱图解析鉴定有48608个特异性肽段,5903个可定量蛋白。与模型组比较,SGI组有82个差异表达的蛋白,其中有22个蛋白上调,60个蛋白下调。GO分析结果显示,差异表达蛋白主要参与程序性细胞死亡调节、细胞增殖调控、心血管系统发育和细胞迁移等生物进程。KEGG分析结果表明,这些蛋白与过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR),黏着斑和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt),Ras相关蛋白1(Rap1)等通路有关。Western blot结果显示,与模型组比较,SGI能显著增加Plin2蛋白表达水平,显著降低Tpm1蛋白表达水平(P<0.01),与蛋白质组学结果一致。结论:提示SGI可能通过调控PPAR,黏着斑,PI3K/Akt和Rap1等通路抑制细胞凋亡,从而拮抗H₂O₂诱导细胞氧化损伤,但需要后续实验进一步验证研究。     

黑骨藤靶向TNF-α抗类风湿关节炎的药效物质基础分析

目的:应用网络药理学和实验验证,分析黑骨藤靶向肿瘤坏死因子-α(TNF-α)治疗类风湿关节炎的药效物质基础。方法:课题组前期研究发现黑骨藤醇提组分(CDLF,CQAF)具有显著抗类风湿关节炎(RA)活性,并鉴定出10个具有抗RA的活性单体。应用酶联免疫吸附测定法(ELISA),以白细胞介素-6(IL-6),一氧化氮(NO),白细胞介素-1β(IL-1β)和前列腺素E(2 PGE2)为指标比较活性单体,CDLF和CQAF组分抗RA活性;网络药理学分析黑骨藤抗RA可能的分子机制;TNF-α分子对接、表面等离子分子互作(SPR)技术和TNF-α诱导L929损伤模型验证黑骨藤化学单体靶向TNF-α能力。结果:ELISA发现,CDLF和CQAF组分抗RA活性明显高于鉴定出的10个活性单体;网络药理学分析,发现黑骨藤抗RA的核心靶点为信号传导及转录因子3(STAT3),肿瘤坏死因子(TNF)和IL-6,基因本体(GO)富集有胶原分解代谢、炎症反应,核转录因子(NF)-κB转录因子活性的正调控,B细胞增殖的正调控等,基于京都基因与基因组百科全书(EKGG)富集有TNF信号通路,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路,NF-κB信号通路,Toll样受体信号通路,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路等;TNF-α分子对接,SPR技术和TNF-α诱导L929损伤模型实验发现,CDLF和CQAF组分具有较好的结合并拮抗TNF-α的活性,但从两组分中分离鉴定的活性成分,并没有表现出与CDLF和CQAF组分一致的抗TNF-α活性。结论:黑骨藤的CDLF和CQAF组分可能通过靶向TNF-α治疗RA,实验发现已分离的化学成分与TNF-α结合活性低于CDLF和CQAF组分,同时课题组在黑骨藤药材中分离到最低质量分数为0.25 ng·g^-1的化学成分,说明与TNF-α结合而产生抗RA活性成分可能为痕量成分。     

利多卡因口腔局部麻醉致过敏性休克继发急性肺水肿1例

1病例资料患者,女,27岁,2020年4月13日因"牙疼2+天"于口腔门诊就诊。体检见左右下后牙区红肿,右侧明显;36牙、46牙大面积缺损;46牙叩痛明显。X片示:36牙、46牙底穿。临床诊断:(1)牙龈脓肿;(2)46牙残冠。患者既往体健,无药物及食物过敏史;家族史无特殊。拟在局麻下行右下第一磨牙(46牙)拔除术,于14:35给予2%盐酸利多卡因注射液(重庆迪康制药有限公司;批号:20191120) 3 ml局部浸润麻醉。浸润麻醉后约1 min,患者诉呼吸困难、听力丧失,立即予平卧并氧气枕吸氧,转入急诊观察治疗。     

灯盏细辛和赤芍配伍组方对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及对NF-κB通路的影响

目的:探讨灯盏细辛和赤芍配伍组方(辛芍)对大鼠中动脉阻断(MCAO)局灶脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:随机将SPF级SD大鼠分为假手术组、模型组、尼莫地平组(12.6 mg·kg~(-1))和辛芍组(12.5 g·kg~(-1))。给药组连续灌胃给药3 d,然后选用改良Zea Longa方法建立大鼠局灶脑缺血再灌注损伤模型,术后再连续给药7 d。采用Zea Longa5分制法对各组大鼠进行神经行为学判别;用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定脑梗死面积;用酶联免疫吸附法(ELISA)测定白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;并用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测p65和IκBα的磷酸化水平。结果:与假手术组比较,模型组出现明显神经功能缺失体征(P0.01),脑梗死面积明显增加(P0.01),说明大鼠局灶脑缺血再灌注损伤模型构建成功。与模型组比较,辛芍组方能明显改善脑缺血再灌注损伤模型大鼠的神经行为功能(P0.05),明显降低脑梗死面积比(P0.05),显著降低IL-6,IL-1β和TNF-α的水平(P0.01),并显著降低p65和IκBα的磷酸化水平(P0.01)。结论:辛芍具有减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用,其作用机制可能与抑制核转录因子-κB(NF-κB)通路激活相关。     

黔产水黄花的化学成分研究

目的:研究水黄花的化学成分。方法:采用大孔树脂、正相和反相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20等色谱方法分离纯化,根据理化性质、光谱数据等鉴定化合物的结构。结果:从水黄花乙醇提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为:东莨菪内酯(1)、没食子酸乙酯(2)、没食子酸(3)、槲皮素(4)、3,3′-二甲基鞣花酸-4′-O-β-D-吡喃木糖苷(5)、番石榴苷(6)、胡萝卜苷(7)、原儿茶酸(8)、槲皮苷(9)、金丝桃苷(10)、槲皮素-3-O-(4″-没食子酰基)-α-L-吡喃鼠李糖苷(11)。结论:其中,化合物2～11为首次从该植物中分离得到。