构建睫状神经营养因子绿色荧光蛋白融合表达载体电穿孔转染雪旺细胞的研究

目的 构建睫状神经营养因子-绿色荧光蛋白(CNTF-GFP)融合表达质粒,以电穿孔法辅助转染培养的雪旺细胞,为优化细胞移植、促进视神经再生提供效果更好且便于观察的方法.方法 实验研究.构建重组质粒pcDNA3.1/CNTF-GFP;经测序鉴定后,电穿孔法辅助转染培养的雪旺细胞;荧光显微镜下动态观察转染效果,流式细胞计数;转染24 h后,用RT-PCR及免疫组化法检测基因转染及蛋白表达情况.结果 重组质粒经测序鉴定无误;在3 h即可见部分荧光,12 h逐渐增多,24～72 h到达高峰,持续至7 d仍有表达;流式细胞计数得转染率为44.93%±12.92%,转染24 h后,RT-PCR示目的 基因有较高转录,免疫组化示有CNTF蛋白的高表达,并与GFP蛋白表达部位完全重合.结论 成功构建了CNTF-GFP融合表达质粒;电穿孔法转染雪旺细胞后,表达良好,为制备转基因的种子细胞从而促进视神经再生的研究奠定了基础.     

睡眠呼吸暂停综合征患者纤维蛋白原Bβ448基因多态性分析

目的：研究睡眠呼吸暂停综合征（SAS）患者纤维蛋白原（Fg)含量与FgBβ448位点基因多态性及表达的关系。方法：依据睡眠呼吸监测的结果，将实验对象分为2组，正常对照组与SAS组，分别测定其血浆Fg 含量（Clauss法），FgBβ448位点基因多态性（RFLP）及mRNA表达（cDNA合成），并用SPSS软件包进行统计学分析。结果：SAS患者A／A基因型出现频率显著低于对照组，‘A／L＋L／L’基因型出现频率显著高于对照组，不同基因型对mRNA表达有不同的影响，其中L／L基因型mRNA表达最高，其次为A／L基因型，A／A基因型mRNA表达最低。mRNA的表达量与血浆Fg水平呈显著的正相关关系。结论：FgBβ448的基因型与其mRNA的表达，Fg的水平之间关系密切，SAS患者具有较高的L／L，A／L基因频率，具有较高的mRNA表达水平，Fg含量较高，所以我们认为SAS患者罹患心血管疾病的几率更高，但SAS与心血管疾病及其危险因素之间的相互关系尚待进一步研究。     

子宫内膜癌细胞中孕激素受体的甲基化对其表达及细胞生长的作用

孕激素对子宫内膜正常功能的维持起着重要作用,孕激素通过与孕激素受体(progesterone receptor,PR)结合发挥作用.子宫内膜癌组织中PR的表达下调,不仅与子宫内膜癌的发生有关,而且还可能与肿瘤细胞的侵袭生长有关,最终可影响患者的预后及对激素治疗的反应,其表达下调的机制不清.     

血栓病的防治

血栓病的防治马端山东省血栓病研究中心成立以来，在血栓病的防治及科研上取得了较显著的成绩，现将有关体会及成果介绍如下一、血栓病的预防任何疾病，只要了解了它的发病机理和病理过程，就有可能对其进行针对性预防和治疗。血栓病的发病机理基本有三点：（１）血液动力...     

特异性溶栓剂：葡激酶

葡激酶是一种从金黄色葡萄球菌中提取的具有溶栓作用的物质。初步临床应用证明它疗效好，邮血率低，是一种很有希望的新型溶栓剂 。     

不稳定性心绞痛患者的血栓前状态研究

<正> 冠状动脉血栓形成是大多数心肌梗塞的原因,但亦有人发现即使在休息状态下,不稳定性心绞痛(Unstable Angina,UA)同样可以出现冠状动脉血拴形成,血液学研究证实UA时血液中存在凝血相纤溶系统的激活。为全面了解UA患者的凝血、抗凝、纤溶、血小板和血管内皮细胞功能,我们选择了14项有关指标,旨在证实UA是否     

不同剂量重组葡激酶治疗幼猪急性脑梗死对凝血和纤溶功能的影响

目的：研究重组葡激酶（rSaK)治疗急性脑梗死对血液凝血及纤溶功能的影响。方法：幼猪48头，分为对照组和7个rSaK组（剂量0．4万－6．4万IU/kg)，每组6头，幼猪脑梗死4h后静脉用rSaK，对照组用安慰剂，治疗后30，60，90min测凝血酶原时间（PT），部分凝血活酶时间（APTT），凝血酶时间（TT），纤维蛋白原（Fg)，优球蛋白溶解时间（ELT），血浆纤溶酶原活性（Plg:A),D-二聚体（DD）。结果：rSaK延长PT，APTT，TT，缩短ELT，增加DD，剂量越大越明显，但对Fg,Plg,A影响很小，结论：rSaK 能显著增强纤溶活性，对血液凝血功能影响较小。     

兔股动脉粥样硬化斑块模型中TF及TFPI的变化规律

 目的 观察兔股动脉粥样硬化斑块发展过程中斑块内组织因子（TF）及组织因子途经抑制物-1（TFPI-1）、组织因子途经抑制物-2（TFPI-2）的变化规律。方法 新西兰雄兔通过高脂饲养合并股动脉球囊损伤建立动脉粥样硬化斑块模型。在建模8周、10周和12周，分别截取球囊损伤处股动脉标本，采用免疫组化半定量图像分析技术检测斑块组织内TF,TFPI-1和TFPI-2的蛋白表达；荧光定量PCR测定斑块内TF,TFPI-1和TFPI-2的mRNA水平。结果 自8周、10周到12周，血管斑块中TF,TFPI-1和TFPI-2的观测区域内阳性染色面积均逐渐增加。自8周、10周到12周，血管斑块中TF的mRNA水平和TFPI-1的mRNA水平均逐渐增加；TFPI-2mRNA表现为前期无明显变化，12周时显著下调（P<0.001）。结论 在兔股动脉粥样硬化斑块的形成过程中，随着斑块内TF基因及蛋白表达的增加,TFPI-1和TFPI-2反应性表达增加，但其表达水平未能完全抑制斑块的进展。     

癌症痛患者镇痛药物的选择：阿片类镇痛剂的使用

癌症痛患者镇痛药物的选择──阿片类镇痛剂的使用在阿片类药物中，可待因和吗啡为镇痛的重要药物，哌替啶则属于候选药物。在有些国家还可能有其它阿片类药物。尽管哌替啶在治疗急性剧痛方面有价值，但长期用于癌症患者却有许多缺点。如果有其它可以替代的药物时，就不应...