温乃元针灸临证理论撷菁

目的:总结温乃元主任中医师针灸临证理论。方法:通过跟诊,搜集病案,进行总结。结果:温师擅长筋伤疾病及临床疑难杂病的诊疗,擅用通法治疗实性痛证,重视遵循整体观念、辨证选穴、针药并重治疗疾病。结论:温师针灸经验确有实效,值得推广。     

主动脉瓣关闭不全法建立新西兰兔心衰模型

目的 用主动脉瓣关闭不全法致新西兰兔心衰模型。方法 运用导管术造成新西兰兔主动脉瓣膜关闭不全, 制作超容量负荷型心衰模型。观察动物的毛色、精神状态、活动情况、饲料消耗指数、体重增加指数、呼吸频率等指标对该模型进行评价;检测血清SOD活力和MDA含量, 判断模型组动物机体抗氧化能力;利用酶联免疫法检测血清中cAMP、cGMP的变化情况;利用基因芯片技术分析该模型基因表达差异。结果 模型动物SBP、DBP和LVSP著性下降, LV+dp/dt和LV±dp/dt明显下降, LVDP显著上升。模型组与正常组比较, 毛发枯槁, 活动减少, 进食减少, 反应迟钝, 精神萎靡, 抓起时反抗减轻。模型组呼吸频率加快;模型组血清SOD活性低于正常组, MDA含量高于正常组;模型组血清cAMP明显低于正常组, cGMP明显高于正常组;利用基因芯片共检测出665个差异基因, 其中与心功能较密切相关的基因主要与离子通道、肌收缩、信号转导等功能有关。结论 采用主动脉瓣关闭不全法建立兔心衰模型方法可靠。主动脉关闭不全, 使心脏前负荷增加, 造成左心室舒张末期容积增加, 导致左心室扩大肥厚及心力衰竭。心肌组织基因芯片检测结果显示, 该模型基因表达出现了一定的变化。     

黏菌素静脉滴注治疗革兰阴性菌所致重症感染患者中的群体药动学分析

黏菌素被用于治疗多耐药革兰阴性菌引起的感染。甲磺酰黏菌素（colistin methanesulfonate,CMS）静脉滴注后能被水解为具活性的黏菌素。目前关于黏菌素的药动学资料还很有限。本文报道CMS和黏菌素在危重感染患者群体中的药动学特征。多重耐药革兰阴性杆菌（MDR—GNB）感染患者（排除接受。肾功能替代治疗的患者）。     

兔股动脉粥样硬化斑块模型中TF及TFPI的变化

目的： 观察兔股动脉粥样硬化斑块发展过程中斑块内组织因子（TF）及组织因子途经抑制物-1（TFPI-1）、组织因子途经抑制物-2（TFPI-2）的变化。方法： 新西兰雄兔通过高脂饲养合并股动脉球囊损伤建立动脉粥样硬化斑块模型。在建模8周、10周和12周，分别截取球囊损伤处股动脉标本，检测斑块组织内TF、TFPI-1和TFPI-2的蛋白表达；并测定斑块内TF、TFPI-1和TFPI-2的mRNA水平。结果： 自8周、10周到12周，血管斑块中TF、TFPI-1和TFPI-2的观测区域内阳性染色面积均逐渐增加。自8周、10周到12周，血管斑块中TF的mRNA水平和TFPI-1的mRNA水平均逐渐增加；TFPI-2mRNA表现为前期无明显变化，12周时显著下调。结论： 在兔股动脉粥样硬化斑块的形成过程中，随着斑块内TF基因及蛋白表达的增加,TFPI-1和TFPI-2反应性表达增加，但其表达水平未能完全抑制斑块的进展。     

hTFPI-2的基因克隆表达及生物学性质研究

目的克隆人组织因子途径抑制物-2（human tissue factor pathway inhibitor-2，hTFPI-2）的编码基因，并在大肠杆菌中表达，获得有活性的目的蛋白。方法应用RT—PCR法从人胎盘总RNA中获得人组织因子途径抑制物也的编码基因，将该基因片段克隆至原核表达载体pETl9b中，转化表达宿主BL21，用异丙基-B—D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导目的蛋白的表达。获得的包涵体经离子交换法进行纯化，并使其在体外进行复性。采用发色底物法测定hTFPI-2对纤溶酶、胰蛋白酶的抑制作用；明胶酶谱法测定对基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）的抑制作用；采用人工基底膜法观察hTFPI-2对纤维肉瘤细胞侵袭能力的影响。结果成功获得了序列完全正确hTFPI-2的编码基因，hTFPI-2在大肠杆菌中以包涵体的形式获得高效表达，占细菌总蛋白的20％～30％。经纯化、复性后可得到纯度大于90％的目的蛋白。复性后的hTFPI-2具有抑制胰蛋白酶、纤溶酶、MMP-2和MMP-9的活性，同时亦具有抑制纤维肉瘤细胞HT-1080侵袭转移的能力。结论采用原核表达系统高效地获得了具有活性的hTFPI-2。     

公路运输对新西兰兔血液及生化指标的影响

目的观察公路运输对新西兰兔血液常规和生化指标的影响。方法选用12只健康普通级新西兰兔进行2 h公路运输,分别在运输前,运输后0、24、48、72、96 h采集血液获得检测样本。通过血液分析仪检测血常规指标:白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白量(HGB)、红细胞压积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、血小板(PLT)。通过全自动生化分析仪检测:肝功能指标:丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP);肾功能指标:尿素氮(UREA)、肌酐(CREA)、尿酸(UA);脂代谢指标:甘油三酯(TG)、总胆固醇(COHL);糖代谢指标:葡萄糖(GLU);炎性指标:超敏感C-反应蛋白(CRP);血清酶:α-淀粉酶(AMYL)、肌酸激酶(CK)。结果与运输前比较,运输结束后:血常规指标中,WBC先升高(P0.05或P0.01)后降低,RBC、HGB、HCT、PLT均先降低(P0.05或P0.01)后升高,MCV在运输结束96 h时显著高于运输前(P0.05);肝功能指标中,ALT、AST先升高(P0.05或P0.01)后降低,TP、ALB先降低(P0.05或P0.01)后升高;肾功能指标中,BUN先升高(P0.05或P0.01)后降低,CREA先降低(P0.01)后升高;脂代谢指标中,TG先降低(P0.01)后升高;糖代谢指标GLU在运输结束24 h时显著低于运输前(P0.01);除MCV外,各项指标均在运输结束96 h时与运输前无明显差异。结论公路运输会引起新西兰兔血液常规、肝肾功能指标、脂代谢指标、糖代谢指标及肌酸激酶指标的变化,且各指标在96 h内基本恢复至运输前水平。     

抗重组人组织因子途径抑制物1单抗抑制rhTFPI-1的抗凝作用

目的研制抗重组人组织因子途径抑制物1单克隆抗体(rhTFPI-1 M cAb),了解其对rhTFPI-1抗凝活性的抑制作用。方法将分泌rhTFPI-1 M cAb的杂交瘤细胞注入经降植烷预处理的Balb/C小鼠腹腔中,诱生腹水。腹水先经硫酸铵沉淀处理,再用rprote in A亲和层析柱进一步纯化。对纯化后的单克隆抗体进行SDS-PAGE检测和W estern b lot分析。并用发色底物法测定rhTFPI-1 M cAb对rhTFPI-1的活性抑制。结果纯化后的抗rhTFPI-1 M cAb经SDS-PAGE检测,其纯度为98%;W estern b lot分析显示其能特异识别rhTFPI-1抗原。发色底物法检测结果表明,其能有效阻断rhTFPI-1的抗FVIIa/TF活性,M cAb浓度为8 mg/L时FVIIa/TF剩余活性达到86%;但对rhTFPI-1的抗FXa活性作用不明显,M cAb浓度为80 mg/L时FXa的剩余活性为48.4%。结论rhTFPI-1 M cAb可明显抑制rhT-FPI-1活性,阻碍rhTFPI-1对TF/FVIIa的抑制活性。纯化后的rhTFPI-1 M cAb的各项鉴定指标均较为理想,rprote inA亲和层析柱纯化方法简便易行值得推广。     

抗厌氧菌药物PK/PD研究方法概述

随着抗菌药物药动学(PK)和药效学(PD)的不断发展,PK/PD研究在抗菌药的药效学评价、给药方案的制定和优化以及细菌耐药性等方面的作用日趋重要,必不可少.目前国内外发表了大量抗菌药物PK/PD的研究文献,但由于厌氧菌培养条件的苛刻性,限制了抗厌氧菌药物的PK/PD研究.本文综述近年来发表的为数不多的有关抗厌氧菌药物的PK/PD研究文献,介绍该类药物PK/PD体外研究、动物和人体内研究方法,为国内今后开展此方面的研究提供参考.     

温乃元主任对阿是穴的认识及临床经验

温乃元主任中医师临证30余载,学验俱丰,通过学习其对阿是穴的名称认识、取穴方法、基本性能,阿是针、阿是灸、阿是按的具体应用方法,从阿是针、阿是灸、阿是按3个方面解读温乃元对阿是穴的运用,分析温乃元临床应用阿是穴的经验,以期更好继承名中医临床经验。     

抗菌药物体外药动/药效学模型及其在抗菌药物研发中的应用

抗菌药物体外药动/药效学模型(抗菌药物体外PK/PD模型)能够模拟抗菌药物在人体内的药代动力学过程及其杀灭细菌的动态药效学过程.用该方法研究抗菌药物与病原菌的作用比用一般稳态模型更符合体内的实际情况,同时该方法与动物感染模型相比也表现出很多优点.因此抗菌药物体外PK/PD模型在国外已经成为一种很常用的研究手段,但是在我国这种方法的采用却几乎还是空白.本文就国外抗菌药物体外PK/PD模型的基本结构、原理、发展、使用及其在抗菌药物研究开发中的应用进行综述.