应用功能化氧化硅泡沫负载甲基化结合结构域建立一种富集甲基化DNA的方法

目的 用功能化氧化硅泡沫负载甲基化CpG结合域(methyl-CpG binding domain,MBD)建立一种用于大样本初筛时富集甲基化DNA的方法.方法 将具有超大介孔尺寸的氧化硅泡沫(mesocellular silica foam,MCF)功能化并负载融合蛋白GST-MBD以结合甲基化DNA.结果 MCF功能化后仍保持较大的笼状孔结构,孔径约为55 nm,窗口约30 nm,空隙容积高达1.0 m3/g,MBD蛋白负载量达53 wt％.具有较高的结合甲基化DNA的活性和稳定性.在缓冲液盐浓度为500～550 mmol/L时,MCF-MBD能较为专一地区分并富集混合溶液中的甲基化DNA.结论 该方法为高通量和自动化检测DNA甲基化提供了一个较好的选择和分子生物学依据,为临床应用和DNA甲基化相关疾病的研究奠定了基础.     

11q24-q25缺失2例临床表型及文献复习

目的应用全基因组微阵列芯片平台,对临床发现的多发性畸形患儿进行全基因组拷贝数变异（CNVs）的检测,并寻找基因型与临床表型的关系。方法采用cytogenetic whole genome芯片筛查全基因组CNVs,针对发现的CNVs进行分析,参照国际基因组CNVs多态性数据库除外正常人群多态性CNVs。结合本研究2例与已报道的Jacobsen综合征（JBS）患儿的临床表型进行比较。结果 2例患儿SNP芯片分析为11q24-q25缺失（7.5和5.6Mb）,均为末端的非单纯性缺失,例1存在12号染色体短臂的较大片段重复（11.5Mb）,例2存在11号染色体短臂的大片段重复（32.5Mb）。2例共同缺失的部分均为JBS的关键区段,但临床表型与已报道的JBS患儿有所区别。2例均表现为头面部畸形、心血管系统异常和头颅影像学异常,均未发现血液系统异常。例1还表现为隐睾,例2表现为脾肿大。结论对临床上难以诊断的多发性畸形可采用全基因组CNVs检测,以帮助明确诊断,对于丰富这一区段临床表型信息具有重要意义,尤其针对罕见疾病,更多的相似报道的后续出现,才能使建立表型-基因型关联性成为可能。     

Sturge-Weber综合征患者RASA1基因的突变检测

目的：检测散发性Sturge-Weber综合征（Sturge-Weber syndrome,SWS）患者是否存在RASA1基因的异常。方法：经过详细的病史询问和临床检查,采集9例散发性SWS患者的外周静脉血标本,提取基因组DNA。应用PCR技术对RASA1基因的25个外显子、外显子与内含子交界处及启动区（-1000bp）序列进行扩增,然后直接测序分析。结果：在9例SWS患者中,发现1例尚未报道的同义突变位点（c.1229G〉A）,其余均无异常。结论：RASA1基因结构变异与散发性SWS的相关性可能不大,但该基因在SWS中的致病情况还有待于进一步研究。     

组织因子途径抑制剂治疗弥散性血管内凝血的研究进展

近年来．尽管监护和治疗水平日益完善．但败血症及其并发症的发病率仍在不断上升，是临床常见的死亡原因之一。弥散性血管内凝血（disseminated intravascular coagulation．DIC）作为常发生于败血症患者的并发症，其死亡率仍居高不下。DIC不是一种独立的疾病，而是某些临床已有明确诊断的疾病伴有的、以广泛血管内凝血和出血倾向为特征的中间发病环节和并发症。DIC发病原因、发病机制复杂。但发病过程中均有凝血功能的改变。在其发病机制中天然抗凝途径功能紊乱起着重要作用，因此就大多数DIC患者而言。抗凝治疗仍是阻断DIC病理过程的最重要措施之一。     

重组链激酶治疗幼猪急性脑梗死的药效学

目的 :研究重组链激酶 (rSK)治疗急性脑梗死的药效学。方法 :幼猪 72头 ,分 7个静脉组 ,3个动脉组及 2个对照组 ,每组各 6头。幼猪脑梗死4h后分别经静脉和颈内动脉 (ICA)应用rSK ,动态检测ICA血流量及脑血管造影。 2 4h后取脑作病理检查。结果 :静脉组rSK 2万IU·kg- 1或以上剂量的血管再通率大于对照组 (差异有显著意义 ,P <0 .0 5 ) ;同一剂量动脉组再通率大于静脉组 (P >0 .0 5 )。血管完全再通 ,部分再通及不通的病理学检查脑梗死发生率分别为 7% ,5 0 %和 10 0 % (差异有显著意义 ,P <0 .0 5 )。结论 :静脉用rSK治疗急性脑梗死的最低有效剂量为 2万IU·kg- 1;局部动脉给药以 1～ 2万IU·kg- 1为宜。     

治疗性工程抗体的研究进展

单克隆抗体从问世到应用于临床，经历了一段曲折的发展历程，其中基因工程抗体是一个重要的里程碑，并伴随着一系列重大的技术革新。利用抗体工程技术可研制出性能和特点各不相同的高效治疗性抗体，如增强效应功能的全长抗体、传递细胞毒作用的免疫毒素、抗体与细胞因子连接的融合蛋白，以及锚定多种受体的双特异抗体等。本综述介绍了近年来治疗性抗体工程的进展。     

重组链激酶治疗急性脑梗死出凝血功能的动态变化

】　Objective　To observe the changes of hemostatic function in 24 hours in patients with acute cerebral infarction treated with 1,000,000IU of recombinant streptokinase(r-SK).Method　Sixty selected patients were divided into r-SK group and control group and their PT,APTT,TT,Fg,AT-ⅢAg and AT-ⅢA were surveyed.Results　After r-SK treatment,the patients' PT,TT and APTT prolonged,Fg and AT-ⅢA decreased and all of them had statistical significances compared with controls.The changes lasted for 24 hours.Conclusion　Although the dosage of r-SK could affect the hemostatic function of patients,the range and duration are limited.From this point of hemostasis,this dosage of r-SK is safe in treating early stage of acute cerebral infarction.     

基因沉默技术在斑马鱼研究中的应用

模式生物斑马鱼主要应用于探索遗传学、发育生物学和分子生物学等研究领域的分子机制,常用的研究策略是DNA诱变和基于RNA的基因沉默.但化学诱变技术和传统反义核酸技术存在缺陷,目前在应用中已受到很大限制.反义morpholino技术具有稳定、方便的特点,广泛应用于斑马鱼基因功能的研究.新兴的锌指核酶基因敲除技术不依赖于胚胎干细胞使其前景更为广阔.     

基质金属蛋白酶与充血性心力衰竭时心脏重构

充血性心力衰竭(CHF)发展过程中,心脏发生几何形状和心肌结构的改变称为心脏重构。过去曾认为心脏重构只是由于心肌细胞内源性的变化,现在认识到心肌细胞外基质(ECM)中胶原的数量、组成和结构的变化也参与了心脏重构过程〔1〕。基质金属蛋白酶(MMPs)是一组特异地降解ECM成分、参与心脏重构的酶家族。在人体与动物CHF的心肌组织中都可以发现MMPs表达〔1～4〕。MMPs是心肌间质重构中基质降解的推动力量。通过调控MMPs的表达与活性,可以影响ECM的数量、组成和结构,可能成为阻止甚至逆转心力衰竭(心衰)时心脏重构新的治疗途径。1 　…