肝癌患者CD8^＋T淋巴细胞穿孔素表达和脱颗粒特点

目的观察肝癌患者外周血CD8^＋T淋巴细胞穿孔紊表达和脱颗粒特点及与临床分期的相关性。方法采集52例肝癌患者、20例健康人的外周血，用流式细胞仪分析CD8^＋T淋巴细胞穿孔素表达百分比；以抗CD3单抗刺激后CD107a表达量代表CD8^＋T淋巴细胞脱颗粒的数量。结果肝癌患者外周血CD8^＋T淋巴细胞穿孔素表达量（32．3％±17．4％）与健康对照（31．8％±14．1％）差异无统计学意义（P〉0．05）。但是抗CD3单抗刺激5h后CD8^＋T淋巴细胞CD107a表达量（6．8％±4．2％）低于健康对照（15．0％±4．3％），差异有统计学意义（P〈0．01）。结论肝癌患者CD8^＋T淋巴细胞脱颗粒能力明显下降。     

原发性胆汁性肝硬化的发病机制及影响预后的危险因素研究进展

原发性胆汁性肝硬化(PBC)是一种原因不明的,自身免疫介导的,以肝内中、小胆管胆汁淤积为特征的肝病。本文就目前国内外已报道的PBC的发病机制及影响其预后的相关危险因素进行综述。     

HAART后血液及精液中HIV水平的比较研究

目的高效抗逆转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy,HAART)6个月后,对HIV感染者血浆及精浆中的HIV RNA水平进行比较研究,对外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)及精液细胞中的HIV DNA水平进行比较研究。方法收集HAART 6个月后血液中HIV RNA下降到检测不出的16例患者的精液和血液样本,采用实时定量PCR的方法检测其血浆及精浆中的HIV RNA水平,PBMC及精液细胞中的HIV DNA水平。结果 16例患者的精浆中有15例可检测到HIV RNA,在PBMC及精液细胞中均可检测到HIV DNA,且二者HIV DNA水平差异无统计学意义。结论 HAART 6个月后,大多数患者精液中仍可检测到HIV RNA及HIV DNA。     

肝硬化合并轻微型肝性脑病 的临床特点以及相关影响因素分析

[摘要]　目的　观察肝硬化合并轻微型肝性脑病（minimal hepatic encephalopathy, MHE）的临床特点，以及相关临床指标与MHE发生风险的关系。方法?选取87例肝硬化患者，每例患者均进行数字连接试验-A（number connection test-A, NCT-A）测试，测试结果超过正常值上限的患者确定为MHE组，否则为非MHE组。同时收集患者病史及血常规、肝功能、血氨、凝血功能等临床指标，并计算肝功能Child-Pugh评分，通过Logistic回归分析MHE发生的危险因素。结果?87例肝硬化患者中，49例（56.3%）NCT-A异常，诊断为MHE。统计学分析发现MHE组血氨水平明显高于非MHE组（P＜0.05），但MHE组的血氨水平与NCT-A异常程度无明显相关性。MHE组中，失代偿期肝硬化患者比例、既往发生显性肝性脑病的患者比例、肝功能Child-Pugh评分B&C级患者比例显著高于非MHE组（P均＜0.05）；MHE组年龄偏低，具有更高的TBIL、氨基转移酶水平，而血ALB、CHE、PTA等较非MHE组均显著下降（P均＜0.05）。单因素Logistic回归分析发现，年龄偏低、失代偿期肝硬化、Child-Pugh分级高、血氨水平高、CHE水平低、TBIL水平高、PTA降低均是MHE发生的危险因素（P均 ＜0.05）；多因素Logistic回归分析发现，TBIL水平高是判断MHE发生风险的独立预测因素。结论?肝硬化患者中MHE发生率较高，特别是肝硬化失代偿期患者和肝功能基础较差的患者发生MHE风险显著增加，总胆红素水平高是发生MHE的独立危险因素。     

中国乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群频率参考值范围

目的 调查中国乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群频率参考值范围.方法 利用流式细胞术检测2846例乙型肝炎患者和117例健康人群外周血淋巴细胞亚群数值,调查我国健康人群和乙型肝炎人群的参考值范围.结果 调查了16～60岁健康人群和HBV感染相关的急性肝炎、慢性肝炎、重型肝炎和肝硬化人群外周血CD3+T淋巴细胞、CD3+CD...     

自体CIKs治疗对乙肝病毒的抑制作用及机制分析

目的探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIKs)治疗对乙肝病毒(HBV)的抑制作用及其机制。方法选取2009年4月-2010年12月于解放军302医院住院,且未经抗病毒药物及其他免疫治疗的慢性乙肝患者16例,采集外周血单个核细胞(PBMC)经细胞因子鸡尾酒诱导培养成CIK细胞后,经静脉回输患者体内。观察CIK细胞治疗后24周内患者体内HBV DNA水平、CD3+CD56+细胞频率的变化,以及髓样树突状细胞(mDCs)和浆样树突状细胞(pDCs)频率的改变。结果自体CIK回输后,9例患者产生病毒学应答,其体内HBV DNA水平分别于第41、2及24周(分别为5.70、5.09和4.08log10拷贝/ml)出现明显降低(P<0.05或P<0.01);7例患者表现为病毒学无应答,其体内HBV DNA水平均与在基线时(6.39log10拷贝/ml)无明显差异(P>0.05)。经14d的诱导培养后,病毒学应答者CIK细胞的主要效应细胞CD3+CD56+细胞比例为17.21%,明显高于无应答者(8.97%,P<0.05)。经CIKs治疗后,病毒学应答者pDCs频率由治疗前的0.27%上升至治疗后4周的0.39%(P<0.05)和治疗后12周的0.34%(P<0.05),而病毒学无应答者无明显改变。CIK细胞回输后无明显不良反应。结论 CIK细胞治疗慢性乙肝安全性好,能抑制HBV复制,其机制部分是通过提高pDCs频率实现的。     

HAART治疗HIV-1慢性感染儿童外周血特异性CTL的反应特点

目的 观察高效抗逆转录病毒治疗(HAART)前后人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)慢性感染儿童外周血HIV-1特异性CTL的反应特点,并分析其影响因素.方法 采集24例HIV-1 慢性感染儿童外周血并分离PBMCs,常规进行CD4 T细胞绝对数和血浆病毒载量测定.应用tetramer染色技术和ELISPOT技术分别测定HIV-1表位特异性CTL频率和IFN-γ产生细胞的数量.结果 在80%的HIV-1慢性感染儿童外周血可检测到HIV-1特异性的tetramer CTL细胞和HIV-1表位肽刺激的IFN-γ产生细胞.未经HAART治疗和HAART治疗失败的儿童,其体内CTL反应明显强于HAART治疗成功的儿童,并且这种CTL反应与HAART治疗时间呈明显的负相关.结论 HAART治疗后外围血HIV-1特异性CTL反应明显降低,持续的HIV-1抗原刺激是维持外周血HIV-1特异性CTL反应的主要因素.     

乙型肝炎患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞表型与功能分析

目的 观察急、慢性乙型肝炎(AHB、CHB)患者外周血CD4+CD25 high调节性T细胞(Treg)的频率、表型和功能特点.方法 采集16例AHB急性发病期(发病后第1周)患者、72例CHB患者和32例健康人的外周血,检测Treg频率,并分析其表面CD45RO、CD45RA、HLA-DR、CD95和细胞内细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)的表达水平.应用实时荧光定量RT-PCR检测CD4+ CD25+、CD4+ CD25-、CD4+和CD4-等细胞亚群和外周血单个核细胞(PBMC)的FoxP3 mRNA表达量.通过MACS免疫磁珠分选Treg,并应用[3H]掺入法检测Treg抑制抗-CD3抗体和HBV抗原刺激的PBMC增殖能力,并观察Treg对HBV抗原或抗-CD3抗体刺激自体PBMC分泌IFNγ的影响.结果 CD4+CD25 high Treg高表达CD45RO、HLA-DR、CD95和细胞内CTLA-4,低表达CD45RA,并且较特异的高表达FoxP3 mRNA.乙型肝炎病人外周血Treg频率与健康对照(3.50±0.72)%比较无统计学差异,但CHB组(3.90±1.44)%显著高于AHB组(3.10±0.87)%,P＜0.05.Treg本身对于HBV抗原或抗-CD3抗体刺激没有明显的增殖反应和IFNγ分泌,但可抑制自体PBMC增殖和IFNγ分泌,其中对HBV抗原刺激引起的细胞反应抑制作用较强.结论 HBV感染者外周血Treg较特异地表达FoxP3分子,能抑制HBV抗原特异性细胞免疫反应,这对于深入阐明CHB发病机制具有重要意义.     

儿童慢性乙型肝炎患者树突细胞亚群的检测及其临床意义

目的 观察儿童慢性乙型肝炎患者外周血和肝内树突细胞(DC)及其亚群的特征,分析它们与乙型肝炎病毒(HBV)清除的关系.方法 选择10例免疫耐受患儿(免疫耐受组)、20例免疫激活患儿(免疫激活组)和14名健康儿童(健康组),利用流式细胞技术检测外周血髓样树突细胞(mDC)和浆样树突细胞(pDC)的百分比,分别用poly Ⅰ:C和CpG ODN2216刺激外周血单个核细胞,检测mDC产生白介素12(IL-12)和pDC产生干扰素α(IFN-α)的能力;利用免疫组化技术检测肝内mDC和pDC的数量.结果 免疫激活组mDC和pDC的百分比(分别为0.39%±0.17%和0.22%±0.13%)明显低于免疫耐受组(0.52%±0.21%和0.28%±0.10%)、健康组(0.47%±0.20%和0.36%±0.19%),差异有显著性(P＜0.05).患儿DC数量与血清ALT呈明显负相关,与HBV DNA病毒载量无明显相关性.免疫激活组CpG刺激产生IFN-α的量(464.8±381.8pg/ml)明显低于免疫耐受组(822.3±327.2pg/ml)和健康组(866.0 ± 311.1pg/ml,P＜0.05),而免疫耐受组与健康组之间无显著性差异(P＞0.05).DC在poly Ⅰ:C刺激下产生IL-12的能力三组无明显差异.同时还发现免疫激活患儿肝内的mDC和pDC数量均明显增加.结论 儿童慢性乙型肝炎患者外周DC数量的下降可能与局部的免疫反应有关.     

123例原发性胆汁性肝硬化临床表现与自身抗体谱

目的：探讨123例原发性胆汁性肝硬化患者的临床表现与自身抗体谱的关系。方法：选取2008年至2010年解放军三零二医院收治的123例原发性胆汁性肝硬化 (primary biliary cirrhosis,PBC)患者进行回顾性分析,按照临床及病理分期分为肝硬化期70例和非肝硬化期53例,采用间接免疫荧光法检测抗核抗体（anti-nuclear antibodies,ANA）和抗线粒体抗体（anti-mitochondrial antibodies,AMA）,采用免疫印记法(EUROLINE)检测抗线粒体抗体M2亚型（anti-mitochondrial antibodies-M2,AMA-M2）、抗早幼粒细胞白血病蛋白抗体(anti-promyelocytic leukemia,anti-PML)、抗核点型靶抗原蛋白100 000(anti-sp100 antibodies,anti-sp100)、抗核孔复合物210 000跨膜糖蛋白(anti-gp210 antibodies,anti-gp210）、抗重组M2融合蛋白抗体(anti-BCOADC-E2 PDC-E2 OGDC-E2 antibodies,anti-BPO）、抗52 000核颗粒蛋白 (anti-Ro-52 antibody,anti-52KD)。结果：ANA、AMA、AMA-M2、anti-PML、anti-sp100和anti-52KD阳性率,肝硬化期分别49%、47%、51%、54%、31%和49%,非肝硬化期分别为38%、37%、51%、60%、30%和51%,两组间比较差异均无统计学意义（P均＞0.05）;anti-gp210阳性率：肝硬化期27%,非肝硬化期19%,两组间比较差异有统计学意义（P＜0.01）;anti-gp210阳性的PBC患者较anti-gp210阴性的PBC患者白蛋白和胆碱酯酶偏低,转氨酶、胆红素、碱性磷酸酶和Mayo评分偏高,发展为肝衰竭概率大。结论：AMA有助于疾病的早期诊断,ANA阳性有助于AMA阴性患者的诊断;anti-gp210出现在PBC病程后期,anti-gp210阳性的PBC患者有更严重的胆汁淤积和肝功能损害。