基于RNA-Seq探讨玉竹多糖对D-半乳糖诱导衰老小鼠的保护作用

目的 探讨玉竹多糖对D-半乳糖诱导衰老小鼠认知功能保护作用的分子机制.方法 采用水提醇沉法提取玉竹总多糖组分并进行含量测定;将30只昆明小鼠随机分为正常组、模型组、玉竹多糖组(2 g/kg).模型组及玉竹多糖组小鼠每日皮下注射D-半乳糖(150 mg/kg),正常组及模型组每日灌胃等体积生理盐水,同时玉竹多糖组小鼠灌胃...     

不同中医临床证型下行型鼻咽癌组织细胞核蛋白质差异表达的初步研究

目的： 研究下行型鼻咽癌不同中医临床证型患者原发病灶组织细胞核差异表达蛋白质,为中医证型分类的科学性提供依据。方法：采用双向凝胶电泳及基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法 (MALDI-TOF-MS)对下行型鼻咽癌火毒困结型、气阴两虚型和气血凝结型患者的鼻咽癌组织细胞核蛋白进行分离和表达谱研究,利用生物信息学方法鉴定差异蛋白质。结果：与下行型鼻咽癌气阴两虚型细胞核蛋白点相比,气血凝结型有28个蛋白点表达上调、12个蛋白点表达下调,火毒困结型有9个点表达上调,19个蛋白点表达下调;与下行型鼻咽癌气血凝结型细胞核蛋白点相比,火毒困结型有25个蛋白点表达上调、18个蛋白点表达下调。MALDI-TOF-MS成功鉴定出3个差异蛋白质,来源于气血凝结型鼻咽癌患者的瘤组织细胞不均一性核糖核蛋白H (heterogeneous nuclear ribonucleoprotein H,hnRNP H)和微管蛋白β链1 (tubulin beta-1 chain,TUB1)表达上调,来源于火毒困结型鼻咽癌患者瘤细胞的核蛋白Ⅵ型胶原蛋白α2链 (type Ⅵ collagen alpha 2 chain,COLⅥA2)前体表达下调。结论：下行型气血凝结型鼻咽癌患者的瘤细胞核蛋白hnRNP H和TUB1表达上调,下行型火毒困结型鼻咽癌患者的瘤细胞核蛋白中COLⅥA2前体表达下调。     

响应面法优选铁皮石斛总多糖脱蛋白工艺

目的:优选铁皮石斛总多糖的胰蛋白酶联合Sevage法脱蛋白工艺,为该有效部位的深度开发和综合利用提供参考。方法:以总多糖保存率和蛋白脱除率为评价指标,通过单因素试验比较Sevage法、木瓜蛋白酶法、胰蛋白酶法和胰蛋白酶联合Sevage法;以蛋白脱除率为指标,酶解时间、酶用量、酶解温度和粗多糖溶液与Sevage试剂体积比为考察因素,利用BoxBehnken响应面法优化条件。结果:胰蛋白酶联合Sevage法具有较高的总多糖保存率及蛋白脱除率;最佳工艺条件为酶解时间1.5 h,酶用量0.21 g·m L-1,酶解温度63.25℃,总多糖溶液-Sevage试剂(4.27∶1);蛋白脱除率(87.15±7.93)%,总多糖保存率(81.32±8.54)%。结论:不同方法对铁皮石斛总多糖的脱蛋白效果有明显差异,胰蛋白酶联用Sevage法的效果最佳。     

金粉蕨素对溶血性磷脂酰胆碱损伤血管内皮依赖性舒张功能的保护作用及机制

为了观察金粉蕨素对溶血性磷脂酰胆碱损伤血管内皮依赖性舒张功能的保护作用及机制 ,采用离体血管环张力实验法 ,用金粉蕨素和溶血性磷脂酰胆碱共同孵育血管环 ,发现乙酰胆碱诱导的血管舒张百分比由损伤时的 16 .1%± 3.5 %上升到 42 .1%± 8.0 %。一氧化氮合酶抑制剂N -硝基 -L -精氨酸和环氧酶抑制剂吲哚美辛可阻断金粉蕨素的保护作用。此外 ,在培养的人脐静脉内皮细胞上 ,采用DGKC法测定乳酸脱氢酶 ,观察到金粉蕨素使内皮细胞乳酸脱氢酶含量由溶血性磷脂酰胆碱损伤时的 115 .3± 48.3IU/L下降到 30 .8± 5 .4IU/L。同样 ,N -硝基 -L -精氨酸和吲哚美辛可阻断金粉蕨素的保护作用 ,使乳酸脱氢酶释放分别恢复到 91.3± 2 7.6IU/L和 10 4.5± 15 .7IU/L。结果提示 :金粉蕨素保护血管内皮依赖性舒张功能可能与促进内皮细胞释放一氧化氮和前列环素有关。     

血管内皮细胞生长因子促进培养的血管内皮细胞胶原Ⅱ型基因mRNA的表达(摘要)

1　材料和方法1.1　内皮细胞培养取新生儿脐带,收集内皮细胞。于37℃5%CO2培养箱内用含2 0 %胎牛血清的M199培养基培养(含青霉素50ku L、链霉素10 0mg L、谷氨酸2mmol L和GIBCOBRL)。采用形态及CD33免疫组织化学方法鉴定。1.2　Northernblot分析取第2～4代内皮细胞,以5.0×10 4 个 cm2 接种于1%胎牛血清的M199培养基中培养4 8h后,给予血管内皮细胞生长因子(VEGF)培养2 4h ,采用异硫氰酸胍酸酚一步法提取总RNA。紫外分光光度计测....     

Ⅱ型胶原酶/弹性蛋白酶消化法培养大鼠血管平滑肌细胞

为快速、成功培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,在无菌条件下分离大鼠胸主动脉,并剥离外膜及内皮,然后用Ⅱ型胶原酶／弹性蛋白酶消化血管中层,2h左右完全消化成单个细胞时,离心收集细胞,然后重悬,接种细胞,24h后便可见细胞贴,4－5天便可传代,传至第3代时,用台盼蓝检查细胞存活率为96％,光镜和免疫组织化学鉴定培养细胞,培养细胞纯度为97％,与国内报道的贴块法及消化法相比,用酶解法培养血管平滑肌细胞的培养周期缩短4－5天,能更好的保护细胞,维持细胞形状。     

银杏叶提取物对饲高胆固醇兔动脉粥样硬化和低密度脂蛋白体外氧化的作用

目的 :观察银杏叶提取物对饲高胆固醇兔动脉粥样硬化斑块形成和低密度脂蛋白体外氧化的拮抗作用。方法 :采用饲高胆固醇兔动脉粥样硬化模型 ,观察银杏叶提取物对兔主动脉动脉粥样硬化斑块形成的影响 ;采用铜离子 (10× 10 -6mol/L)体外氧化低密度脂蛋白模型 ,观察银杏叶提取物对低密度脂蛋白脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)含量和维生素E水平的影响。结果 :银杏叶提取物 (0 5 g/kg/天 )明显减少饲高胆固醇兔主动脉动脉粥样硬化斑块面积百分比 (19 0 %± 8 2 %vs 44 9%±17 6 % ,P <0 0 1) ;银杏叶提取物明显抑制铜离子氧化低密度脂蛋白致MDA增加和维生素E减少 (P<0 0 5 ) ,且呈剂量依赖性和时间依赖性。结论 :银杏叶提取物有延缓饲高胆固醇兔动脉粥样硬化斑块形成的作用和抗低密度脂蛋白体外氧化修饰的作用。     

绞股蓝总皂甙对休克家兔心肾ATP酶活力的影响

目的探讨绞股蓝总皂甙（GPS）对内毒素休克家兔心肾ATP酶活力的作用。方法家兔29只,体重(2.1±0.2)kg,雌雄不拘,由南华大学动物部提供。动物随机分为3组（1）对照组（n=9）经耳缘ivNS5mL.kg-1,10min后再注射NS0.9mL.kg-1。（2）内毒素组（n=10）经耳缘ivNS5　mL.kg-1,10min后再注射内毒素4　mL.kg-1。(3）GPS组（n=10）经耳缘iv1%GPS5mL.kg-1,10min后再注射内毒素4　mL.kg-1。家兔静脉麻醉,颈总动脉插管,通过二道生理记录仪记录血压。各组动物均观察10　h或至动物接近死亡时处死动物,然后开胸取心,剖腹取肾,进行ATP酶活力测定。结果1.GPS对注射内毒素的家兔平均动脉血压的影响内毒素组家兔在第4、6　h血压都明显低于实验前和对照组,而GPS组在第4h与对照组比较血压没有明显差异,在第6　h出现下降但没有内毒素组那么明显。2.GPS对注射内毒素家兔心肾ATP酶活性的影响结果见表1。     

垫状卷柏化学成分研究

垫状卷柏Selaginella pulvinata Hoor et Grev. 为卷柏科卷柏属植物,广布于四川、云南、西藏、广西、广东、江西、湖北、河南和河北等地。     

垫状卷柏化学成分研究

垫状卷柏Selaginella pulvinata Hoor et Grev.为卷柏科卷柏属植物,广布于四川,云南,西藏,广西,广东,江西,湖北,河北和河北等地,民间生用治经闭,跌打损伤,腹痛和哮喘,炒炭用治吐血,便血 ,尿血和脱肛等^[1],其化学成分未见报道。