离子排斥色谱法测定焦麦芽中的丙烯酰胺

目的 用离子排斥色谱法检测焦麦芽中可能存在的丙烯酰胺.方法 以水提取焦麦芽中的丙烯酰胺,固相萃取柱净化浓缩,离子排斥色谱分离,紫外检测器测定其含量.色谱条件为Shimadzu SCR-102H柱(300 mm×7.8 mm,7 μm);流动相为0.01 mol · L-1 H2SO4-乙腈(70:30);检测波长195 nm;流速0.6 ml · min-1.结果 丙烯酰胺0.02～5.00 mg · L-1与峰面积线性良好(r=0.9996);检出限0.02 mg · L-1, RSD=3.97%,平均回收率96.0%.结论 所建方法简单、可靠,可用于炮制中药材中丙烯酰胺的检出.     

离子排斥色谱法测定大青叶中有机酸的含量

目的:用非抑制型电导检测离子排斥色谱法分离测定大青叶中有机酸的含量。方法:以2.2 mmol/L对甲苯磺酸为流动相,流量为0.6 mg/mL,柱温40℃。结果:大青叶中顺丁烯二酸、柠檬酸、DL-苹果酸、琥珀酸和反丁烯二酸5种有机酸的含量分别为8.04×103、3.32×104、3.00×104、506.42、389.84 mg/kg。结论:该方法快速、简便。     

含翻译增强序列的人canstatin杜氏盐藻叶绿体表达载体的构建

目的:构建含翻译增强序列的人canstatin杜氏盐藻叶绿体重组表达载体。方法:采用RT-PCR的方法,获得含有人canstatin的cDNA片段以及分别在5’UTR下游和3’UTR上游添加了翻译增强序列(UUAACUUUA)的人canstatin cDNA片段,将得到的目的片段分别连接到PMD18-T载体上,利用该载体将目的片段连接到荧光素酶基因Lux Ct表达盒中并进行酶切鉴定。结果:RT-PCR分别得到约700 bp的cDNA片段并克隆到PMD18-T载体上。用PaeR7Ⅰ、SphⅠ双酶切Lux Ct质粒,得到2 100 bp和10 000 bp的2条片段。然后,将大片段回收后分别与上一步得到的cDNA片段进行连接,酶切鉴定结果显示含有翻译增强序列的人canstatin片段成功插入到Lux Ct质粒中。结论:成功构建了含有翻译增强序列的人canstatin杜氏盐藻叶绿体重组表达载体。     

杜氏盐藻鞭毛内运输蛋白88在鞭毛组装过程中的功能分析及其原核表达

目的:克隆杜氏盐藻鞭毛内运输蛋白(IFT)88的cDNA全长并分析其部分功能。方法:根据盐藻转录组测序片段,分别设计其3’端内、外侧引物及5’端内、外侧引物,PCR扩增其全长。提取盐藻再生过程中不同时间段的总RNA,逆转录后进行实时荧光定量PCR,检测IFT88 mRNA的表达情况。随后利用ORF finder预测并扩增其开放阅读框,连接到pET28a载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3),并在1mmol/LIPTG、37℃的条件下诱导4h,提取总蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测IFT88蛋白表达情况。结果:克隆拼接后共得到开放阅读框2400bp,编码799个氨基酸。BLAST显示该氨基酸序列与多个物种的IFT88有较高同源性。SDS-PAGE结果显示,与未诱导组相比,诱导组在90000左右有一条明显的条带。在鞭毛再生过程中,杜氏盐藻IFT88 mRNA的表达量在去鞭毛后30min左右时最高,随后快速下降。结论:扩增得到杜氏盐藻IFT88 cDNA序列且IFT88可能参与盐藻鞭毛组装。     

胸大肌瓣加原位皮片移植修复鼻咽癌放疗后颈部复发的术后缺损

目的:胸大肌皮瓣是头颈部术后缺损常用的修复皮瓣,但由于它的臃肿常导致术后较高的并发症发生。本文将介绍我院采用胸大肌皮瓣去脂、原位皮片植皮在鼻咽癌放疗后颈部复发术后皮肤缺损修复中的应用。方法:对2007年1月-2012年1月就诊中山大学肿瘤防治中心的8例鼻咽癌根治性放疗后颈部复发侵犯颈部皮肤及皮下组织患者,采用胸大肌皮瓣去脂、原位皮片植皮修复颈部大面积皮肤及皮下组织缺损。常规取胸大肌皮瓣,切除皮瓣的皮肤及皮下脂肪,从切除的皮肤中获取表皮和真皮层植皮在胸大肌上,打包7天。结果:皮瓣大小6cm×9cm-6cm×15cm,常规测量切除的皮下脂肪厚度,平均15.13mm(n=8)。所有皮瓣及移植皮片均存活良好,所有患者对术后供区、受区外观满意。结论:本方法简便易行,创伤小,成活率高,改善胸大肌皮瓣臃肿的同时修复了颈部皮肤缺损,不仅能恢复功能,还有较好的外形。     

98例新生儿惊厥发病原因的临床分析与研究

目的探讨新生儿惊厥发病的临床诊断以及发病原因。方法采用资料回顾性分析的方法将于2010年1月至2011年1月入住我院妇产科发生惊厥的98例新生儿的临床资料进行回顾性分析,对本组患儿的发病原因以及临床特点、治疗转归加以分析与研究。结果通过上述方法的实施,可以得出如下结果:本组98例患者发生惊厥的主要原因表现在如下几点:缺血缺氧性脑疾病38例(占38/98=38.78%),颅内出血疾病33例(占33/98=33.67%),代谢性疾病27例(占27/98=27.55%);惊厥发生的主要类型为:微小型为66例(占66/98=67.35%),灶阵挛性为29例(占29/98=27.55%),局灶阵挛型为16例(占16/98=16.33%),强直型为12例(占12/98=12.24%);本组患者主要以微小型最为多见,肌阵挛型最少。结论由上述结果可以得出如下几个方面的结论:①引发新生儿惊厥发病的主要原因包括三个方面,即缺血缺氧性脑疾病、颅内出血疾病以及代谢性疾病;②新生儿生后一周之内,其惊厥发生率要远远高于一周之后,那么这就说明了新生儿发生惊厥在刚开始出生的时候比例比较高。     

右美托咪定、咪达唑仑对重型颅脑损伤术后脑氧代谢的影响

目的：探讨右美托咪定、咪达唑仑对重型颅脑损伤术后病人脑氧代谢的影响。方法：选取30例重型颅脑损伤术后病人,随机分为右美托咪定组(n=15)与咪达唑仑组(n=15)。监测镇静前及镇静第1～5天的心率(HR)、平均动脉压(MAP)、格拉斯哥昏迷评分(GCS)、Richmond躁动-镇静评分(RASS)、脑氧摄取率和脑动静脉氧含量差,以及机械通气时间、ICU住院时间、总住院时间、28 d格拉斯哥预后评分。结果：2组病人的年龄、性别、颅脑损伤类型、急性生理与慢性健康Ⅱ评分、GCS评分、术后RASS的差异均无统计学意义(P>0.05)。镇静前2组病人各指标差异均无统计学意义(P>0.05);与咪达唑仑组比较,镇静后右美托咪定组第1～5天HR均下降,第4和5天MAP下降(P<0.05～P<0.01)。与镇静前比较,右美托咪定组镇静后第3～5天HR下降,第1～5天MAP下降(P<0.05～P<0.01)。与咪达唑仑组比较,右美托咪定组第1天和第2天氧合指数、颈静脉球血氧分压和颈静脉球血氧饱和度升高(P<0.05～P<0.01),脑氧摄取率和脑动静脉氧含...