小儿脑瘫康复护理中家庭康复护理的运用评价

目的:评价小儿脑瘫康复护理中家庭康复护理的运用效果。方法:将35例脑瘫患儿作为研究对象,在其出院后接受家庭康复护理,以患儿出院时为基线,分析家庭康复护理后1、3、6个月患儿的智力发育指数(MDI)、运动发育指数(PDI)及粗大运动功能(GMFM)评分变化。结果:家庭康复护理后1、3、6个月,患儿的MDI、PDI、GMFM评分均呈增加的趋势,家庭康复护理后3、6个月与基线比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:家庭康复护理在小儿脑瘫康复护理中具有重要的作用。     

杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活和毒性检测

目的:构建杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHH)的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-SAHH,并检测其对酵母细胞的毒性和自激活作用。方法:应用RT-PCR扩增杜氏盐藻的SAHHcDNA,测序分析后与酵母双杂交诱饵载体pGBKT7连接,构建诱饵载体pGBKT7-SAHH。用PEG/LiAc法将诱饵载体转入AH109和Y187酵母中,通过表型筛选检测诱饵蛋白对酵母有无毒性和自激活作用。结果:成功构建了诱饵载体pGBKT7-SAHH并成功转化到酵母细胞AH109和Y187中,表达的融合蛋白对宿主酵母细胞无毒性。在AH109和Y187酵母细胞中诱饵载体均未激活报告基因HIS3和ADE2,但是激活了报告基因MEL1。结论:诱饵载体pGBKT7-SAHH可用酵母双杂交方法筛选与SAHH相互作用的蛋白。     

杜氏盐藻糖原合成酶激酶3cDNA片段的克隆及其在鞭毛再生中的功能

目的:克隆杜氏盐藻糖原合成酶激酶3(GSK3)基因序列并探讨它在鞭毛再生中的作用。方法:根据杜氏盐藻转录组测序得到的GSK3的2个片段设计上下游引物,提取盐藻总RNA进行RT-PCR,以此为模板扩增2个片段之间的序列。采用3’RACE方法扩增杜氏盐藻GSK3基因3’端序列,通过杜氏盐藻消减杂交模板扩增得到5’端序列。采用pH休克法去除杜氏盐藻鞭毛,通过实时荧光定量PCR观察鞭毛再生过程中GSK3基因在转录水平上的变化。结果:获得一段长为2116bp的GSK3 cDNA片段,其中包含737bp的3’UTR和1158bp的开放阅读框。实时荧光定量PCR结果表明,GSK3的mRNA转录水平在鞭毛再生过程中明显升高。结论:杜氏盐藻GSK3基因与鞭毛再生密切相关。     

与杜氏盐藻驱动蛋白Ⅱ动力亚基C端相互作用的新蛋白的酵母双杂交筛选

目的:用酵母双杂交的方法筛选与杜氏盐藻驱动蛋白Ⅱ动力亚基(FLA8)C端相互作用的蛋白。方法:设计特异性引物(上下游分别引入EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点),扩增FLA8C端(433个氨基酸)cDNA,与穿梭载体pGBKT7连接以构建诱饵表达载体,然后转化酵母菌株Y187和AH109,Westernblot法检测诱饵蛋白在转化酵母菌株内的表达。通过自激活实验和毒性实验检测诱饵表达载体是否适合利用酵母双杂交的方法筛选相互作用蛋白。转化诱饵质粒的酵母菌株Y187与AH109(文库菌)杂交,待三叶形合子形成后用营养缺陷型培养基和α-半乳糖苷酶活性实验筛选阳性克隆,并对阳性克隆进行测序。结果:成功构建了pGBKT7-FLA8-C双杂交诱饵载体;经检测该载体的表达产物对Y187和AH109均无自激活和毒性作用,可用于酵母双杂交实验;杂交后筛选得到2个阳性克隆,测序结果显示为鞭毛结合蛋白107(FAP107)和含蛋白结合结构域的预测蛋白。结论:成功筛选得到了与杜氏盐藻驱动蛋白Ⅱ动力亚基C端相互作用的蛋白,分别为FAP107和预测蛋白。     

杜氏盐藻鞭毛内运输蛋白88在鞭毛组装过程中的功能分析及其原核表达

目的:克隆杜氏盐藻鞭毛内运输蛋白(IFT)88的cDNA全长并分析其部分功能。方法:根据盐藻转录组测序片段,分别设计其3’端内、外侧引物及5’端内、外侧引物,PCR扩增其全长。提取盐藻再生过程中不同时间段的总RNA,逆转录后进行实时荧光定量PCR,检测IFT88 mRNA的表达情况。随后利用ORF finder预测并扩增其开放阅读框,连接到pET28a载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3),并在1mmol/LIPTG、37℃的条件下诱导4h,提取总蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测IFT88蛋白表达情况。结果:克隆拼接后共得到开放阅读框2400bp,编码799个氨基酸。BLAST显示该氨基酸序列与多个物种的IFT88有较高同源性。SDS-PAGE结果显示,与未诱导组相比,诱导组在90000左右有一条明显的条带。在鞭毛再生过程中,杜氏盐藻IFT88 mRNA的表达量在去鞭毛后30min左右时最高,随后快速下降。结论:扩增得到杜氏盐藻IFT88 cDNA序列且IFT88可能参与盐藻鞭毛组装。     

腹膜透析患者的临床护理观察与分析

目的：分析腹膜透析患者的临床护理效果。方法：对30例患者加强综合性护理措施，并对其效果及生活质量进行观察。结果：临床护理效果为73．33％，且患者营养不良得以改善。结论：加强对腹膜透析患者综合性护理至关重要。     

1988-2015年辽宁开原市猩红热流行趋势分析

目的 了解分析辽宁省开原市1988-2015年猩红热发病情况和规律,为探讨制定猩红热流行的防治措施提供参考依据.方法 对开原市1988年以来的猩红热疫情数据进行统计,分析发病的时间、人群、地区分布.结果 开原市1988-2015年共发生猩红热1 039例,平均发病率为6.26/10万;1993年发病率最高达24.93/10万.1995年以后发病以散发为主,1995-2008年发病率在5/10万以下波动;2009年以后发病率出现上升趋势,波动在2.73～ 8.41/10万之间.全年各月均有病例发生,但以春末夏初和秋末冬初为主;发病以学生最多,其次为幼托儿童和散居儿童.城市发病高于农村,4 ～ 14岁为开原市猩红热高发年龄.结论 开原市近10年来猩红热流行呈上升的趋势,只有采取以加强传染源管理为主导措施的综合防制措施,才能切实有效地降低猩红热的发病率.     

杜氏盐藻FLA8基因全长的克隆及鉴定

目的:获得FLA8基因cDNA序列.方法:根据衣藻、小球藻等驱动蛋白-2亚基的氨基酸高度保守序列GYNGTIF、NEDPKDA设计一对简并引物,采用RT-PCR及3'RACE和5'RACE的方法扩增杜氏盐藻FLA8基因的全长.结果:克隆得到的杜氏盐藻FLA8基因cDNA全长序列为2 612 bp,序列分析显示其包括90...     

吉林省农村计划生育生殖健康适宜技术推广示范研究

《吉林省农村计划生育／生殖健康适宜技术推广示范》项目是“十五”国家科技攻关项目《吉林省农村卫生适宜技术推广示范研究》中的子项目。由吉林省人口和计划生育委员会组织，吉林省人口生命科学技术研究院、吉林大学第二临床医院、吉林省人民医院、蛟河市生殖保健院、农安县生殖保健院5家共同承担推广示范研究。下面就吉林省农村计划生育、生殖健康适宜技术推广示范研究谈一些体会。