Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达鼠IL-4受体拮抗体蛋白的研究

目的 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达鼠IL-4受体拮抗体 (mIL-4RA)蛋白.方法 PCR方法扩增小鼠IL-4 C118截断型基因,定向克隆入转移质粒pFastBacHTB中,转化感受态DH10Bac细胞,在DH10Bac细胞内重组pFastBacHTB与杆粒发生转座.筛选阳性克隆,提取重组杆粒,转染sf9昆虫细胞株,获取完整重组杆状病毒.反复感染sf9细胞,扩增病毒同时表达目的 蛋白;用ELISA方法进行蛋白鉴定并初步定量.结果 经核苷酸序列测定及PCR方法,鉴定成功获得含mIL-4RA基因的重组杆粒;通过杆粒转染后sf9细胞所表现出来的细胞病变,推断成功转染并获得重组杆状病毒;最后ELISA方法初步定量sf9细胞培养上清中mIL-4RA蛋白表达量为(1.15±0.12) ng/mL.结论 本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达mIL-4RA蛋白,为进一步研究其生物学活性及功能奠定了实验基础,同时亦为其他蛋白质的真核表达提供了方法学的参考.     

周瑜之死的启示

看过古典小说《三国演义》的人都知道,东吴的年轻军事家周瑜,具有大将的英才。他年仅34岁就率领东吴军队,一举消灭了数十万曹兵,取得了“赤壁之战”的辉煌胜利。然而,周瑜有大将的才能却无大将的风度,对才能胜过自己的诸葛亮耿耿于怀。他多次设计暗害诸葛亮,但事与愿违,害人不成反害自己。在     

EIAV减毒疫苗诱导马外周血单个核细胞Th1型细胞因子的转录

目的：探讨马传染性贫血病毒驴白细胞减毒疫苗免疫马后,外周血单个核细胞中Th1型细胞因子转录水平与免疫保护应答的关系,揭示DLV的免疫保护机制。方法：应用分子克隆及实时定量RT-PCR技术,建立了马PBMC中IFNγ-、IL-2、IL-12 mRNA转录水平的定量检测方法,定期观察4组（疫苗免疫组、阴性对照组、强毒株阳性对照组、自然感染组）12匹马外周血PBMC中细胞因子的转录水平及分布特征,同时监测体温变化等指标。疫苗株免疫动物8个月后,用EIAV强毒株攻击,观察攻击前后细胞因子转录水平的变化。结果：DLV免疫马,在免疫后3周外周血PBMC中IFN-γ、IL-2转录量显著高于阴性对照组及自然感染组（P〈0.01）;免疫后用EIAV强毒株攻击,IFNγ-、IL-2和IL-12转录的量明显升高,免疫马获得完全保护;强毒株攻击阳性对照马IFN-γ、IL-2转录量随疾病进展波动,发热期下降。结论：本研究首次证明EIAV减毒疫苗可诱导马外周血PBMC中IFN-γ、IL-2、IL-12基因高效转录,其转录水平与DLV的免疫保护密切相关,此结果在分子水平为阐明DLV的免疫保护机制提供了新的实验依据。     

甲状旁腺囊肿1例

甲状旁腺囊肿１例魏梅新，张建国，肖文华，王晓萌患者女，２６岁。因颈前左侧肿物１年入院。查体：颈前左侧甲状腺下方扪及一肿物约５ｃｍ×４ｃｍ×３ｃｍ，边界清楚，随吞咽上下活动，无血管杂音，质中等，无压痛。右侧甲状腺不大，未触及结节。Ｂ超提示为囊性包块。吸...     

肝细胞核因子6在小鼠肝内胆管发育过程中的表达

目的 探讨肝细胞核因子6(HNF6)在肝内胆管发育过程中的作用. 方法 用RT-PCR及免疫组织化学等方法 检测HNF6在小鼠胚胎发育的各个阶段以及成年肝中的表达. 结果 RT-PCR结果 显示,HNF6 mRNA的表达在E9d开始出现,与肝芽形成的时间吻合,E13d HNF6 mRNA的表达消失,E15d又重新出现,并一直维持到出生.免疫组织化学显示,CK19免疫反应在E13d开始出现,此时免疫反应阳性细胞在肝索内散在分布.E15d时在近肝门处的门管区丌始出现由单层的、CK19阳性细胞组成的胆管板,之后,阳性细胞反应主要分布于胆管板和小叶间胆管.E9～11d,多数肝索细胞呈HNF6阳性反应,E13d的肝索中未观察剑HNF6的表达.E15～17d,HNF6阳性反应的分布与CK19相似,成年小鼠肝的胆管上皮细胞仍呈HNF6阳性反应. 结论 HNF6可能与肝干细胞的特化关系不大,而与肝发育的启动、肝干细胞向胆管上皮细胞的分化及其分化状态的维持有关.     

6-12岁儿童感觉统合失调及影响因素的对照研究

于 2 0 0 0年 5月至 1 0月期间 ,采用整群随机抽样的方法 ,在宁波市海曙区2 6所小学中随机抽取 6所小学 (区中心小学 1所 ,普通小学 5所 ) 1 - 4年级每年级各一个班 ,同区 49所幼儿园中随机抽取 4所幼儿园 (公办、系统办、集体、个体幼儿园各一所 )每所一个大班 ,共 1 2 0 0名 6- 1 2岁儿童进行调查 ,收回问卷1 2 0 0份 ,其中有效问卷 1 0 4 7份。男孩5 2 4人 ,女孩 5 2 3人。根据标准分低于 40分为感觉统合失调 [1] ,1 0 4 7人中 ,检出统合失调儿童 2 61名为失调组 ,平均年龄7.79± 1 .82岁 ,男女之比为 1 .5 6:1。随机抽取大于 40分的 61 …     

基于中、西医病症特点的过敏性紫癜动物模型分析

目的 基于过敏性紫癜（Henoch-Schonlein Purpura,HSP）中、西医临床病症特点,分析现有过敏性紫癜的动物模型,探讨现有模型与临床病症的吻合情况。方法 通过整理分析过敏性紫癜动物模型的中、西医诊断标准、优缺点、临床症状吻合情况,提出建立复合性病症结合的过敏性紫癜动物模型的设想。结果 卵清蛋白法复合血热症动物模型、麦胶蛋白联合印度墨水复合血热法动物模型、BSA+LPS+CCl4复合瘀热法动物模型为与过敏性紫癜吻合度较高的动物模型。目前现有的过敏性紫癜动物模型制备技术尚未完全成熟,且多以西医发病机制为主,中医学证候体现较差。结论 提议利用现有的过敏性紫癜动物模型与临床病证相结合,建立复合动物模型,并建立合理的模型评价体系,为研究过敏性紫癜不同目的选择合适的动物模型。     

2018—2020年沈阳市6岁及以下儿童肺炎病例特征及病原菌分析

目的 观察2018—2020年沈阳市6岁及以下儿童肺炎病例特征及病原菌分布情况,为儿童肺炎防治工作提供参考依据。方法 回顾性分析2018年1月至2020年10月沈阳市某医院3 120例6岁及以下儿童肺炎的临床资料,包括患儿的性别、年龄、发病季节、临床症状、住院时间资料、儿童病例呼吸道分泌物细菌培养结果、咽拭子呼吸道病毒抗原检测结果、血清样本肺炎支原体及衣原体抗体检测结果,以及主要病原菌的K-B纸片法药敏试验结果。结果 3 120例患儿中男性1 763例,女性1 357例,以0~3岁患儿比例最高（60.6%）,秋冬季节发病比例高（63.0%）,临床症状主要有咳嗽（96.6%）、发热（95.7%）、呼吸急促（88.6%）、夜寐欠安（86.3%）、食纳差（74.0%）等,住院时间平均（9.3±2.8）d。不同年龄、住院时间的患儿病原菌检出率差异有统计学意义（均P<0.01）,以0~3岁、住院时间>14 d的患儿病原菌检出率最高。所有患儿共检出病原菌2 675株,其中革兰阴性菌1 539株（57.5%）、革兰阳性菌728株（27.2%）、其他408株（15.3%）。革兰阴性菌以肺炎克雷伯菌（412株）、流感嗜血杆菌（365株）为主,革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌（296株）、肺炎链球菌（214株）为主。肺炎克雷伯菌对头孢唑啉、头孢呋辛耐药率高,对亚胺培南、美洛培南敏感;流感嗜血杆菌对复方新诺明、氨苄西林耐药率高,对氨曲南、亚胺硫霉素敏感。金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素耐药率高,对万古霉素、替考拉宁敏感;肺炎链球菌对红霉素、阿奇霉素耐药率高,对万古霉素、左氧氟沙星敏感。结论 沈阳市6岁及以下儿童肺炎病例男性、0~3岁、秋冬季节比例高,临床表现多样并且病原菌检出率高,可根据病原菌分布特点及药敏试验结果为儿童病例选择适合的治疗方案。     

青少年精神障碍患者非自杀性自伤行为现状及影响因素分析

目的 对青少年精神障碍患者非自杀性自伤行为（NSSI）现状进行调查,并分析其影响因素。方法 以2019年1月至2021年1月在九江市某医院青少年精神障碍患者为研究对象进行非自杀性自伤行为评定及相关因素调查,采用描述流行病学分析方法对结果进行分析,并采用单、多因素分析方法对非自杀性自伤行为发生影响因素进行分析。结果 1 500例青少年精神障碍患者检出偶发NSSI 238例,反复NSSI 346例,检出NSSI共计584例,检出率为38.93%。多因素Logistic回归分析结果显示,青少年精神障碍患者发生NSSI的影响因素有母亲教育程度为大专及以上（OR=2.412）、童年虐待（OR=2.897）、童年家庭功能不全（OR=2.398）、所患疾病为抑郁障碍（OR=1.876）或双相障碍（OR=2.222）、孤独感强烈（OR=1.892）。结论 青少年精神障碍患者NSSI发生率较高,尤其是母亲教育程度高、童年虐待、童年家庭功能不全、所患疾病为抑郁障碍或双相障碍、孤独感强烈的患者更易出现NSSI。故应对上述患者予以重点关注,并制定相应的防控策略,以降低NSSI发生风险。     

关键性技能训练法干预儿童孤独症谱系障碍的效果研究

目的 分析关键性技能训练法(PRT)对孤独症谱系障碍(ASD)患儿的干预效果,为ASD儿童的康复治疗提供参考。方法 选取2019年1—12月在郑州大学第三附属医院儿童发育行为科诊断为ASD的2~5岁儿童46例,随机分为常规组和PRT组,每组各23例。两组干预前及干预3个月后均采用孤独症行为量表(ABC)、儿童孤独症评定量表(CARS)进行评估。结果 常规组治疗3个月后ABC总分、交往能区、躯体运动能区、生活自理能区分数均降低(t=5.505、3.102、3.425、4.058,P<0.05)。PRT组治疗3个月后ABC总分、感觉能区、交往能区、躯体运动能区、语言能区、生活自理能区及CARS总分均降低(t=6.087、2.861、4.618、5.509、5.621、6.578、7.398,P<0.05)。PRT组ABC总分、交往能区、躯体运动能区、语言能区、生活自理能区及CARS总分分数差值显著高于常规组(t=8.965、5.488、3.761、5.508、2.612、5.618,P<0.05)。结论 PRT治疗可有效改善ASD儿童的社交、躯体运动、语言、生活能力等。