关节镜下同种异体胫前肌肌腱重建膝关节前后交叉韧带损伤的疗效观察

目的 探讨关节镜下同种异体胫前肌肌腱移植重建前交叉韧带(anterior erueiate ligament,ACL)和后交叉韧带(posterior cruciate ligament,PCL)的手术方法及疗效.方法 2005年2月-2006年7月,收治10例ACL及PCL同时断裂患者.男7例,女3例;年龄18～45岁,平均30.2岁.左膝6例,右膝4例.均有明确外伤史.病程1～3周,平均1.8周.关节镜下取26～28 cm同种异体胫前肌肌腱重建ACL及PCL.术后伸膝位支具制动4周,4周后开始0～900主动屈膝功能锻炼,6周后主动屈膝>90°.结果 手术均顺利完成,术中未发生血管、神经损伤.手术时间90～110min,平均100 min.切口均Ⅰ期愈合,无早期并发症发生.10例均获随访,随访时间12～15个月,平均13.5个月.行走步态正常,关节活动度为0～135°.10例膝关节前抽屉试验及内外侧应力试验均为阴性;后抽屉试验8例阴性,2例分级Ⅰ度.2例术后4 d出现膝关节积液,经抽液和注射透明质酸钠后消失.Lysholm膝关节功能评分由术前(24.89 ± 5.39)分升至术后12个月的(96.00±4.59)分,差异有统计学意义(P<0.05).结论 关节镜下同种异体胫前肌肌腱重建ACL及PCL,手术时间短、并发症少、临床效果好.     

反义转化生长因子-β1基因逆转骨肉瘤细胞恶性表型的研究

目的　观察反义转化生长因子 (TGF) β1基因对骨肉瘤细胞恶性表型的逆转作用。方法　将反义TGF β1基因转染骨肉瘤细胞MG 63后 ,以G418(4 0 0mg/L)筛选 14d ,获得转染细胞系。分别检测细胞周期、细胞凋亡和明胶酶A(MMP 2 )表达 ,并观察转染细胞软琼脂克隆形成数和裸鼠体内致瘤能力。结果　与MG 63和空载体转染细胞MG pcDNA3相比 ,反义基因转染细胞MG TGF β1(-)的G0 /G1期细胞从 5 6.2 %和 60 .1%增至 71.6% ,S期细胞从 19.1%和 17.8%降至 12 .9% ,MMP 2mRNA表达明显减少。MG TGF β1( )的软琼脂克隆形成数从 48.6± 8.1和45 .2± 4.7减至 2 8.2± 5 .6,裸鼠体内形成肿瘤的体积 (83 .4± 2 7.4)mm3 也明显小于MG 63组(191.3± 2 1.5 )mm3 和MG pcDNA3组 (2 0 4.2± 3 0 .7)mm3 。结论　反义TGF β1基因转染骨肉瘤细胞可以逆转肿瘤细胞的恶性表型 ,抑制肿瘤的侵袭和转移。     

IL-1RⅠ IL-1RⅡ IL-1RAcP在骨关节炎滑膜中的表达及其生物学意义

目的探讨白细胞介素-1受体(IL-1R)家族中的3个成员IL-1RⅠ、IL-1RⅡ和IL-1R协同蛋白(IL-1RAcP)在骨关节炎(OA)滑膜中的表达和生物学意义。方法采用免疫组织化学和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了不同病程的107例OA患者膝关节滑膜组织中三者的表达情况。结果免疫组织化学显示IL-1RⅠ和IL-1RAcP在OA滑膜中强阳性表达,IL-1RⅡ在OA滑膜中阳性表达,在对照组中均呈阴性或弱阳性表达。RT-PCR显示IL-1RⅠ、IL-1RⅡ、IL-1RAcP在Ⅰ度OA滑膜中的表达均显著高于正常滑膜(P＜0．05),且IL-1RⅠ的表达显著高于IL-1RⅡ(P＜0．05),而与IL-1RAcP的差异无统计学意义(P＞0．05)。但在Ⅱ度和Ⅲ度OA滑膜中,IL-1RⅠ、IL-1RAcP的表达与在正常滑膜中的表达差异无统计学意义(P＞0．05),IL-1RⅡ在Ⅲ度OA滑膜中的表达显著高于正常组(P＜0．05)。结论IL-1RⅠ、IL-1RⅡ、IL-1RAcP在OA的发病机制中起着重要的作用,尤以IL-1RⅠ和IL-1RAcP为主,但其表达只在OA早期短期增加,与OA病情的发展可能无关。     

白细胞介素-6抑制白细胞介素-1β诱导的兔纤维环细胞凋亡的研究

目的探讨白细胞介素(IL)-6对IL-1β在体外诱导兔纤维环细胞凋亡作用的影响。方法以10μg/L浓度的IL-1β诱导体外培养的原代兔纤维环细胞发生凋亡,然后分别加入10μg/ L和100μg/L的IL-6以影响纤维环细胞凋亡进程。对细胞行Annexin-V-PI染色和Caspase-9功能染色,采用流式细胞仪检测结果。结果IL-1β诱导下,凋亡纤维环细胞比例由(2.67±1.08)%上升至(20.37±1.57)%,而在两种浓度IL-6的干预下,细胞凋亡比例分别为(18.17±4.68)%和(9.42±1.27)%,与IL-1β诱导退变的纤维环细胞差异有统计学意义(P＜0.05)。而Caspase-9功能阳性细胞也由(19.40±0.98)%分别降至(15.13±1.45)%和(10.17±2.50)%(P＜0.05)。结论IL-6对IL-1β诱导的体外兔纤维环细胞凋亡有明显的抑制作用,这种抑制作用可能是通过抑制纤维环细胞内Caspase-9的激活实现的。对IL-6抑制作用的进一步研究,将有助于明确椎间盘细胞凋亡的调控途径,为椎间盘退变的治疗寻找新切入点。     

碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞增殖和分化的影响

目的 :明确外源性碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对成骨细胞生长的影响。方法 :用体外培养的SD大鼠的成骨细胞 ,加入不同浓度的bFGF( 10～ 10 0ng/ml) ,培养 2 4h后 ,通过MTT检测法、增殖细胞核抗原免疫组化分析及细胞碱性磷酸酶量的测定观察bFGF对成骨细胞的增殖和分化的影响。结果 :bFGF在此浓度范围内能明显促进成骨细胞生长 ,细胞内ALP含量下降。结论 :bFGF可以明显刺激成骨细胞的增殖 ,对细胞的分化无促进作用     

胰岛素对大鼠脊髓损伤细胞凋亡及iNOS、COX-2表达的影响

目的 观察胰岛素对急性脊髓损伤后细胞凋亡及相关炎症因子表达的影响,探讨胰岛素对脊髓损伤保护作用的分子机制.方法 60只SD大鼠随机分为损伤对照组和胰岛素治疗组,建立SCI模型;术后8 h、1d、3 d、7 d、14 d处死动物取材,采用原位末端标记(TUNEL)和免疫组织化学观察脊髓细胞凋亡及iNOS、COX-2表达变化,并进行比较分析.结果 术后各时相胰岛素治疗组TUNEL阳性细胞的数目明显少于损伤对照组;胰岛素治疗组iNOS、COX-2的表达率明显比对照组降低,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.01).结论 初步研究表明胰岛素对急性脊髓损伤有保护作用,抑制炎症因子iNOS、COX-2的表达是其可能作用机制之一.     

烟酰胺对椎间盘聚集蛋白聚糖的调控作用

目的:观察烟酰胺对椎间盘聚集蛋白聚糖的调节作用.方法:构建体外椎间盘组织凝胶培养模型,以10ng/mlIL-1β诱发椎间盘退变,同时以0.5 mg/ml,0.25 mg/ml和0.05 mg/ml烟酰胺进行治疗,于造模的第一、二周对各组行葡萄糖醛酸含量测定、藏红O-快绿染色及聚集蛋白聚糖核心蛋白基因RT-PCR检测.结果:①给与0.5 mg/ml烟酰胺一周后髓核糖醛酸含量较正常对照上升44.8%,(P＜0.01);给与IL-1的各组糖醛酸含量随烟酰胺浓度上升而增高:0.5 mg/ml治疗一周后髓核糖醛酸含量较未治疗组上升68.3%,(P＜0.01),2周后髓核及纤维糖醛本含量仍高于同期正常组(P＜0.01)和未治疗组(P＜0.01).②藏红O-快绿染色显示,随着烟酰胺浓度加大,髓核及纤维环染色浓度越大,组织结构受IL-1β破坏越小.③RT-PCR显示与IL-1的各组椎间盘内,核心蛋白表达强度随烟酰胺浓度上升而上升.结论:体外条件下,烟酰胺可提高椎间盘聚集蛋白聚糖含量,对抗IL-1β诱导的椎间盘退变,具备用于椎间盘退变临床治疗的潜力.     

骨巨细胞瘤组织中端粒酶hTERT基因表达及其意义

目的 探讨骨巨细胞瘤组织中端粒酶hTERT基因的表达及意义.方法 应用原位分子杂交技术,对4l例骨巨细胞瘤组织、17例骨质增生骨组织、11例异位骨化组织和10例正常骨组织中端粒酶hTERT基因进行检测和定位,并运用图像分析系统对hTERT基因表达水平进行研究.结果 端粒酶hTERT基因在骨巨细胞瘤中表达阳性率为41.5%(17/41),表达强度与骨巨细胞瘤的分化程度明显相关(P＜0.05):低分化肿瘤＞中分化肿瘤＞高分化肿瘤,端粒酶hTERT细胞表达水平与肿瘤细胞的分布定位一致.17例骨质增生骨组织、11例异位骨化组织和10例正常骨组织中端粒酶hTERT基因的表达均为阴性.结论 原位分子杂交是检测端粒酶亚单位hTERT的有效方法,在骨巨细胞瘤细胞水平检测端粒酶hTERT基因的定位诊断具有重要意义.在骨巨细胞瘤发展和维持中端粒酶可能起到重要的作用,同时还可能存在端粒酶以外的机制导致肿瘤细胞永生化.     

The Use of Calcaneal Anatomic Plate in Arthroscopically-assisted Open Reduction and Internal Fixation of Intra-articular Calcaneal Fractures

Calcaneusisthebiggestaccessoryboneoffootandalsotheimportantbonetobeartheweightofbody.Fracturesofthecalcaneuscompriseabout2%ofallfracturesandarethemostfrequentfrac turesofthehindfootconstitutingabout60%-65%ofallmajortarsalinjuries.Thereareabout75%involvedarticularfacetincalcanealfractures.Thetherapeuticprincipleoughttolikeothersfrac tures,anatomicalreconstruction,rigidinternalfixationandearlyfunctionalexerciseareneeded.Ourdepartmenthasusedcalcanealanatomicplateintreatmentofintra articularfractu…     

转化生长因子β_1基因修饰的间充质干细胞/仿生基质材料的体外复合培养

目的 探讨转化生长因子β_1(TGF-β_1)基因转染对间充质干细胞(MSCs)增殖分化的影响,评价涂覆多聚赖氨酸(PLYS)的聚DL乳酸(PDLLA) 仿生基质材料能否作为关节软骨组织工程学研究的支架材料。方法 将组织工程学与分子生物学有机结合,体外将具有多重生物学效应的TGF-β_1基因转入关节软骨组织工程首选种子细胞--间充质干细胞（MSCs）,并与表面涂覆PLYS的PDLLA可降解三维多孔基质材料体外复合培养。以单纯空载体转染MSCs为对照,通过扫描电镜等方法观察种子细胞的粘附、增殖及分化等情况。结果 基质材料孔隙率为88%,其中孔径为150～200μm的有效孔占80%。所有细胞均能很好地粘附于基质材料上,其中TGF-β_1基因修饰的MSCs增殖分化活性明显优于对照组。结论 利用分子组织工程学原理可使TGF-β_1持续高效发挥作用,使提高关节软骨缺损的修复质量和远期疗效成为可能。涂覆PLYS的PDLLA仿生基质材料不仅具有良好的生物相容性和结构相容性,而且具有更好的表面相容性和生物学活性,在一定程度上解决了细胞-基质材料之间存在的界面不相容问题,是关节软骨缺损修复的良好基质材料。