单螺旋和3股螺旋蚕丝纤维支架的力学性能及其细胞黏附性能比较

目的:经蚕茧缫丝脱胶而成的丝状纤维是一种无生理活性的天然结构性蛋白,这种结构使丝状支架具有良好的力学性质和生物相容性。观察采用单螺旋和3股螺旋蚕丝两种不同编织方法制备的丝状支架力学性能和细胞黏附性能的差异。方法:实验于2005-10/2006-05在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成。将蚕丝用不同的编织方法制备单螺旋、3股螺旋两种丝状支架,直径4.5mm。实验方法:①丝状支架的力学检测:两种丝状支架各取10cm置于AGS-H多功能材料力学实验机的夹具中,固定后以10mm/min的速度行拉断试验。②对SD大鼠骨髓基质干细胞分离培养。实验评估:①通过拉断实验测定最大载荷、最大拉伸长度及弹性模量。②对骨髓基质干细胞进行苏木精-伊红染色。③扫描电镜观测骨髓基质干细胞与丝状支架的黏附情况。结果:①力学性能检测结果:单螺旋、3股螺旋两种丝状支架的最大载荷、最大拉伸长度、弹性模量[分别为(870±32),(846±20)N;(14.60±0.85),(13.90±0.64)mm;(6519±287),(6373±375)MPa]差异无显著性意义(P>0.05)。②免疫组织化学鉴定结果:骨髓间充质干细胞的细胞膜抗原CD44有阳性表达,CD34均为阴性表达。③骨髓基质干细胞与丝状支架的黏附情况:两种编织方法的丝状支架的丝状纤维表面均光滑,有较多的骨髓间充质干细胞黏附在丝状纤维上。结论:单螺旋和3股螺旋两种丝状支架的力学性能和细胞黏附性能相近。     

关节镜下骺板近侧缝线固定治疗儿童胫骨髁间棘骨折的疗效观察

目的总结经骺板近侧缝线固定,治疗儿童胫骨髁间棘骨折的手术效果。方法 2005年5月～2009年5月武汉协和医院骨科收治的儿童胫骨髁间棘骨折病例34例,按Meyers-Mckeever骨折分型:Ⅱ型23例,Ⅲ型11例。在关节镜监视下,用硬膜外穿刺针引导,穿Ⅱ号普迪丝缝线(PDS-Ⅱ),复位并固定骨折块。结果随访12～24个月(平均18个月)。术前Lyshlom评分30～57分(42.6±2.2),1年后评分96～100分(98.6±2.9),手术前后评分差异有统计学意义(P<0.01)。术后所有患膝活动度恢复正常。结论关节镜下骺板近侧缝线固定治疗儿童胫骨髁间棘骨折具有手术创伤小、术后恢复快、无需二次手术取出内固定等优点,同时避免了损伤骺板可能引起的并发症。     

关节镜下钮扣钢板固定四股半腱肌重建膝关节前交叉韧带

目的 探讨关节镜下钮扣钢板固定四股半腱肌重建膝关节前交叉韧带的治疗效果。方法 关节镜下四股半腱肌重建膝关节前交叉韧带20例。术前MRI证实膝关节前交叉韧带断裂,术中关节镜下均证实膝关节前交叉韧带断裂,四股半腱肌重建者用钮扣钢板固定。结果 平均随访7个月,无1例打软腿,假交锁症状消失,关节痛消失。X线见内固定物与术后一致,无移位。Lysholm膝关节功能评分：术前平均54.5,随访评分95.6。结论 关节镜下四股半腱肌重建膝关节前交叉韧带临床效果好,并发症少,手术时间短。     

同种异体骨软骨柱移植治疗关节软骨缺损

背景:同种异体骨软骨移植修复关节软骨损伤可以解决自体骨软骨来源有限的问题,但存在免疫排斥问题.目的:观察以深低温保护剂保护的同种异体骨软骨柱移植修复兔关节软骨缺损的效果,并与自体关节软骨移植作比较.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008 05/10在武汉协和医院骨科实验室完成.材料:24只成年健康新西兰兔中8只用于异体骨软骨柱的制备,16只随机分成同种异体移植组和自体移植组,每组8只.方法:使用横穿钉套筒提取兔股骨内侧髁骨软骨柱,将骨软骨柱在4℃条件下放入盛有10%二甲基亚砜的冻存管中2 h,将冻存管移入程序冷冻仪内以1℃/min速率降至-75℃,放入-196℃液氮罐底部保存3周备用.用横穿钉钻头在兔左膝关节股骨内侧髁垂直于软骨面制造缺损,缺损深4 mm,直径4.45 mm,自体移植组取右膝关节内侧髁骨软骨柱植入到左侧膝关节相应缺损处,异体移植组将经过程序性深低温冷冻保存的同种异体骨软骨柱移植到相应缺损处.主要观察指标:术后12周观察兔关节活动度、修复组织的质地等情况.以苏木精-伊红染色观察关节软骨组织的病理变化,以半定量改良Wakitani score法进行评估.以免疫组织化学染色观察Ⅱ型胶原分泌情况.结果:两组实验动物关节活动度正常.异体移植组移植处关节软骨面较光整,与周围正常关节软骨高度一致,结合紧密,颜色接近,与自体移植组相似.两组移植后,兔关节缺损处被透明软骨覆盖,潮线整齐,细胞排列有序,分泌大量基质,异体移植组移植处软骨深层及软骨下骨处可见微小裂隙,未见淋巴细胞和浆细胞浸润.同种自体与异体骨软骨移植组Wakitaniscore评分结果无统计学差异,总分接近,修复软骨Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均强阳性.结论:冷冻同种异体骨软骨柱移植可修复全层小面积关节软骨缺损,术后近期软骨细胞存活,可分泌软骨基质,未见明显排斥反应,与自体骨软骨柱修复的兔关节软骨缺损在组织学上相近.     

关节镜下自体腘绳肌和异体胫前肌单束重建前交叉韧带的1年随访比较

背景：由于人工韧带存在慢性疲劳,越来越多的人采用异体肌腱重建前后交叉韧带损伤。 目的：比较关节镜下自体腘绳肌和异体胫前肌单束重建前交叉韧带的疗效。 方法：收集关节镜下用自体腘绳肌和异体胫前肌单束重建前交叉韧带随访满1年的病例。自体腘绳肌重建前交叉韧带组28例;异体胫前肌重建前交叉韧带组18例。采用股骨端Endobutten、胫骨端可吸收螺钉固定。采用支具固定并进行功能训练。 结果与结论：前交叉韧带重建后6个月,异体肌腱组lysholm评分高于自体肌腱组(P < 0.05);重建后12个月两组lysholm评分差异无显著性意义。两组重建后6,12个月与重建前比较差异均有显著性意义(P < 0.05),重建后12个月与6个月比较差异有显著性意义(P < 0.05)。结果表明,自体和异体肌腱重建前交叉韧带随访1年疗效相当。     

距下关节制动术治疗柔韧性扁平足的历史与现状

扁平足是一种常见的足部畸形,若不及时治疗则可能导致下肢力线改变,最终使患者出现膝、髋关节甚至腰背痛。距下关节制动术,作为一种微创的手术,在跗骨窦中置入植入物来改变足弓诸骨的排列。相比于关节融合及截骨等手术治疗其优势是创伤小、恢复快,保留了关节功能,对以后再次手术无影响。     

Transfection of Articular Chondrocytes with rhBMP7 Gene and Its Expression

The repair of osteochondral defects remainsone of the most intensely studied orthopaedic top-ics.Nowadays the focus is on gene modified tissueengineering[1] .It is suggested that articular chon-drocytes could serve as satisfactory target cells,while bone morphogenetic protein- 7(BMP- 7) couldstimulate new bone and cartilage tissue forma-tion[2 ] .In the present study,a recombinant plas-mid pc DNA3 - rh BMP7was transduced to culturedrabbit articular chondrocytes in vitro in order toexplore …     

Expression of Transforming Growth Factor β1 in Mesenchymal Stem Cells: Potential Utility in Molecular Tissue Engineering for Osteochondral Repair

Summary: The feasibility of using gene therapy to treat full-thickness articular cartilage defects was investigated with respect to the transfection and expression of exogenous transforming growth factor (TGF)-β1 genes in bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) in vitro. The full-length rat TGF-β1 cDNA was transfected to MSCs mediated by lipofectamine and then selected with G418,a synthetic neomycin analog. The transient and stable expression of TGF-β1 by MSCs was detected by using immunohistochemical staining. The lipofectamine-mediated gene therapy efficiently trans fected MSCs in vitro with the TGF-β1 gene causing a marked up-regulation in TGF-β1 expression as compared with the vector-transfected control groups, and the increased expression persisted for at least 4 weeks after selected with G418. It was suggested that bone marrow-derived MSCs were sus ceptible to in vitro lipofectamine mediated TGF-β1 gene transfer and that transgene expression persist-ed for at least 4 weeks. Having successfully combined the existing techniques of tissue engineering with the novel possibilities offered by modern gene transfer technology, an innovative concept, I.e.molecular tissue engineering, are put forward for the first time. As a new branch of tissue engineer-ing, it represents both a new area and an important trend in research. Using this technique, we have a new powerful tool with which: (1) to modify the functional biology of articular tissue repair along defined pathways of growth and differentiation and (2) to affect a better repair of full-thickness artic ular cartilage defects that occur as a result of injury and osteoarthritis.     

关节镜下自体腘绳肌和异体胫前肌单束重建前交叉韧带的1年随访比较

背景:由于人工韧带存在慢性疲劳,越来越多的人采用异体肌腱重建前后交叉韧带损伤.目的:比较关节镜下自体腘绳肌和异体胫前肌单束重建前交叉韧带的疗效.方法:收集关节镜下用自体腘绳肌和异体胫前肌单束重建前交叉韧带随访满1年的病例.自体腘绳肌重建前交叉韧带组28例;异体胫前肌重建前交叉韧带组18例.采用股骨端Endobutten、胫骨端可吸收螺钉固定.采用支具固定并进行功能训练.结果与结论:前交叉韧带重建后6个月,异体肌腱组lysholm评分高于自体肌腱组(P < 0.05);重建后12个月两组lysholm评分差异无显著性意义.两组重建后6,12个月与重建前比较差异均有显著性意义(P < 0.05),重建后12个月与6个月比较差异有显著性意义(P < 0.05).结果表明,自体和异体肌腱重建前交叉韧带随访1年疗效相当.     

蚕丝支架韧带材料的机械强度和体外降解性

背景:目前用于组织工程韧带的支架材料胶原蛋白、聚乳酸、聚羟基乙酸、小肠黏膜下层、聚糖及纳米材料等均有降解速度快的特点,应用于宿主后有一定炎症反应.目的:观察蚕丝支架的机械强度和体外降解性,以及与巨噬细胞的反应.设计:对照观察.单位:实验于2004-09/2005-01在华中科技大学附属协和医院骨科完成.材料:市售白色家蚕蚕丝(20/22D),每30根蚕丝平行排列为一束支架.置入煮沸的5g/LNa2CO3中进行脱胶,Na2CO3溶液体积(mL)与生丝的质量(g)之比为1000.方法:①体外降解实验:8cm长蚕丝支架干燥后测初质量,然后分别浸泡于磷酸盐缓冲液和用磷酸盐缓冲液配制的1.0g/L胶原酶中,浸泡12周后测试蚕丝支架残质量,计算失质量率.同时进行拉伸试验,测量样品的极限抗拉强度.②单核细胞株RAW264.7的培养:将丝状支架组、对照组、脂多糖组均加入2×108 L-1巨噬细胞混悬液1mL中培养,培养第1,7天收集各组细胞培养上清,采用ELISA方法测定TNF-α含量.主要观察指标:①丝状支架在磷酸盐缓冲液和胶原酶中失重率和极限抗拉强度变化.②培养第1,7天各组细胞培养上清中TNF-α含量.结果:①丝状支架在胶原酶中8周后质量减少已超过50%,在磷酸盐缓冲液中未见明显改变.②胶原酶消化8周后丝状支架的极限抗拉强度下降超过原来的50%,在磷酸盐缓冲液中未见明显变化.③培养第1,7天丝状支架组巨噬细胞分泌少量TNF-α,脂多糖组上清中的TNF-α水平明显高于丝状支架组(P<0.01),丝状支架组与对照组TNF-α水平无差异(P>0.05).结论:丝状支架经12周降解后仍保持良好机械特性,培养第1,7天与巨噬细胞混合培养中,巨噬细胞对该材料具有免疫惰性.