RNA干扰抑制胃癌VEGF表达的实验研究

在诸多促血管生成因子中,VEGF的作用最强,在肿瘤血管生成的各个环节均有重要作用,且能特异性地作用于血管内皮细胞的有丝分裂原,故抑制VEGF表达是当前抗肿瘤血管生成的最重要策略.本研究采用DNA载体细胞内表达小片段干扰RNA技术(small interfering RNA,siRNA),构建干扰质粒psiRNA-VEGF并观察其抑制人胃腺癌细胞(MGC-803)VEGF表达的效果.     

双歧杆菌对兔VX2瘤HIF 1α和VEGF表达的影响

目的: 探讨青春型双歧杆菌对兔VX2瘤组织HIF1α、VEGF表达的影响。方法: 建立兔荷VX2瘤模型20只，随机分成2组，每组10只。对照组经耳缘静脉注射生理盐水，实验组经耳缘静脉注射青春型双歧杆菌。处死动物，取出脏器和肿瘤组织粉碎后进行厌氧培养和革兰染色，观察双歧杆菌对肿瘤的靶向性；另取部分肿瘤组织HE染色观察肿瘤组织的形态学变化；应用免疫组织化学方法分别检测肿瘤组织中HIF1α、VEGF的表达。结果: 青春型双歧杆菌能够靶向定植于肿瘤组织中；经双歧杆菌治疗后实验兔肿瘤组织坏死面积明显增加。免疫组化显示实验兔VX2瘤组织中HIF1α、VEGF阳性表达细胞密度显著低于对照组（P<0.05），且两组中HIF1α与VEGF的表达呈显著正相关（r=0.86）。结论: 青春型双歧杆菌能够在兔VX2瘤组织中靶向定植，且能下调兔VX2瘤中HIF1α和VEGF的表达     

双歧杆菌对兔VX2瘤HIF-1α和VEGF表达的影响

目的：探讨青春型双歧杆菌对兔VX2瘤组织HIF-1α、VEGF表达的影响。方法：建立兔荷VX2瘤模型20只，随机分成2组，每组10只。对照组经耳缘静脉注射生理盐水，实验组经耳缘静脉注射青春型双歧杆菌。处死动物，取出脏器和肿瘤组织粉碎后进行厌氧培养和革兰染色，观察双歧杆菌对肿瘤的靶向性；另取部分肿瘤组织H—E染色观察肿瘤组织的形态学变化；应用免疫组织化学方法分别检测肿瘤组织中HIF-1α、VEGF的表达。结果：青春型双歧杆菌能够靶向定植于肿瘤组织中；经双歧杆菌治疗后实验兔肿瘤组织坏死面积明显增加。免疫组化显示实验兔VX2瘤组织中HIF-1α、VEGF阳性表达细胞密度显著低于对照组（P〈0．05），且两组中HIF-1α与VEGF的表达呈显著正相关（r=0．86）。结论：青春型双歧杆菌能够在兔VX2瘤组织中靶向定植，且能下调兔VX2瘤中HIF-1α和VEGF的表达。     

精神病痊愈后自杀死亡因素分析

精神病人的自杀比较常见，而经治疗痊愈出院后的精神病人自杀原因多为社会心理因素。本文研究发现，痊愈精神病人的自杀率显著高于正常人群及住院精神病人。普及精神卫生知识，关心改善精神病人的社会支持系统，是防止精神病人出院后自杀的关键。     

针对糖尿病易感基因Vβ13的慢病毒系统的建立及其对T细胞的转导

目的 应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效沉默连接红色荧光蛋白mCherry与靶基因1型糖尿病易感基因Vβ13的表达,建立一种简便有效基因沉默的系统,并初步研究慢病毒感染T细胞的可能性.方法 以Vβ13 mRNA编码序列作为干扰靶点,以慢病毒质粒UTG作为载体,构建靶向Vβ13的shRNA表达质粒,构建携带Vβ13的mCherry红色荧光蛋白的质粒作为验证shRNA有效性的靶点,并转染293FT细胞.通过红色荧光的表达及RT-PCR和Western blot确定最佳沉默Vβ13序列后,将有效的UTG-Vβ13质粒与辅助质粒共转染293FT细胞,低温超高速离心,获取高滴度慢病毒.应用慢病毒感染大鼠T细胞,光镜观察T细胞被慢病毒感染的情况,流式细胞术检测T细胞的绿色荧光表达情况.结果 成功构建Vβ13-shRNA慢病毒载体UTG-shRNA-Vβ13,RT-PCR及Western blot结果显示慢病毒感染的293FT细胞Vβ13 mRNA及蛋白表达相对于对照组显著降低.构建的慢病毒可以成功感染T细胞.结论 红色靶基因-绿色慢病毒系统具有简便的筛选性能;UTG慢病毒对神经干细胞具有较高感染效率.可作为一种良好的基因导入载体,实现慢病毒介导的RNA干扰在T细胞内的有效表达,并为T细胞过继性转移的相关研究提供技术支持.     

双歧杆菌在肿瘤治疗中的应用

双歧杆菌作为机体肠道内数量占绝对优势的生理性菌群，对维持机体的健康发挥重要的功能。双歧杆菌能够刺激机体的免疫器官且自身具有抗肿瘤活性。此外，双歧杆菌专性厌氧的特性使其在肿瘤的基因治疗中起重要的作用。     

藻酸双脂钠联合更昔洛韦在体外抗人巨细胞病毒感染的效果研究

目的　研究藻酸双脂钠(PSS)联合更昔洛韦(GCV)在体外抗人巨细胞病毒(HCMV)感染的作用。方法　应用体外细胞培养技术构建HCMV-AD169 感染人胚肺成纤维细胞(HELF)模型,对照组采用GCV (50 mg.L_-1)单一药物,实验组采用PSS (100 mg.L_-1)和GCV (50 mg.L_-1)的联合药物,应用两组药物同时对模型进行干预,观察干预后两组的特征性致细胞病变效应(CPE)的变化,同时应用RT-PCR法检测用药后两组HCMV的IE2的表达情况。 结果 实验组和对照组均可提高感染细胞的存活率,同时降低感染细胞中HCMV IE2的mRNA表达量。显微镜下形态学观察显示,相比对照组,实验组能明显降低药物对HELF细胞的毒性作用,提高细胞存活率。结论　PSS联合GCV具有良好的体外抗HCMV作用,二者具有协同抗病毒作用。     

非小细胞肺癌中FHIT基因异常甲基化对其蛋白、mRNA表达的影响

背景与目的 脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)是一种新的抑癌基因,其启动子甲基化在肿瘤的发生和发展过程中发挥重要作用.本研究的目的 是通过检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中抑癌基因FHIT启动子CpG岛异常甲基化和蛋白、转录表达情况及其相互关系,探讨FHIT基因在NSCLC发生发展中的作用.方法 应用甲基化特异性PCR(Methylation-specific PCR,MSP)、免疫印迹(Western Blot)及RT-PCR测定52例NSCLC组织及其癌旁正常组织(>5 cm)中FHIT的甲基化、蛋白表达和转录水平.结果 NSCLC癌组织中FHIT甲基化率为38.46%(20/52),在癌旁正常组织中FHIT甲基化率为7.6996(4/52),两者差异存在统计学意义(P<0.05);癌组织中FHIT蛋白表达率为28.8%(15/52),癌旁正常组织FHIT蛋白表达率为88.5%(46/52),两者差异存在统计学意义(P=0.000);FHIT mRNA在癌组织中表达率为51.9%(27/52),在癌旁正常组织中全部表达,且表达量明显高于癌组织(P=0.000).结论 在NSCLC中,FHIT基因启动子甲基化频率明显升高,其蛋白表达率明显下降,mRNA表达率下降,提示FHIT启动子甲基化在肺癌的发生和发展中起着一定作用,而且FHIT基因的甲基化与蛋白及mRNA的表达存在一定的关系.     

结直肠癌MTAP基因的表达及启动子去甲基化的研究

背景与目的：研究报道甲硫腺苷磷酸化酶（5’-methylthioadenosine phosphorylase,MTAP）在多种肿瘤组织中出现异常表达。本研究检测MTAP基因在结直肠腺癌、结直肠腺瘤和正常结直肠粘膜组织中的表达以及MTAP启动子甲基化的改变,探讨结直肠癌MTAP基因表达的变化与启动子去甲基化的关系。方法：定量PCR检测50例结直肠癌及癌周正常组织中MTAP mRNA的表达量;免疫组织化学的方法检测MTAP在结直肠癌中的表达;甲基化特异多聚酶链反应（Methylation—specified PCR,MSP）检测正常肠粘膜和结直肠癌组织中MTAP基因启动子发生甲基化的情况。结果：定量PCR结果显示：正常结直肠组织中MTAP mRNA的相对水平显著低于结直肠癌组织（P〈0．01）：免疫组织化学结果显示MTAP在结直肠腺癌中的表达高于结直肠腺瘤及正常结直肠粘膜（98．00％vs．85．00％和12．50％,P〈0．05）,结直肠腺瘤与正常结直肠粘膜差异亦具有统计学意义（P〈0．01）;MSP检测16例正常结直肠组织,20例结直肠腺瘤,50例结直肠癌组织启动子甲基化频率分别是93．75％,75．00％,32．00％。结直肠癌中甲基化率较腺瘤和正常组织均显著降低（P〈0．01）。结论：MTAP在结直肠腺癌组织中的表达高于腺瘤和正常组织,MTAP在结直肠腺癌组织中高表达可能与MTAP启动子去甲基化有关。     

药物联合双侧顺行性脑灌注在中低体温停循环A型主动脉夹层手术脑保护中的临床研究

目的：探讨药物联合双侧选择性顺行脑灌注对中低体温停循环(MHCA)A型主动脉夹层(TAAD)患者的脑保护作用。方法：选择赣南医学院第一附属医院2021年1月—2022年2月收治的TAAD行孙氏手术患者90例,采用简单随机数字表法分为A组[采用单侧选择性顺行脑灌注(UASCP)]、B组[采用双侧选择性顺行脑灌注(BASCP)]及C组[药物(精氨酸+硫酸镁+丙泊酚)联合BASCP]三组,每组30例,比较三组治疗效果。结果：三组手术时间、术后ICU停留时间、术后麻醉清醒时间、术后出现短暂性神经功能缺损(TND)例数及中国临床神经功能缺损程度(CSS)评分>16分的例数比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与A组患者相比,B组患者手术时间、体外循环时间明显减少,C组患者手术时间明显增加(P<0.05);A组术后ICU停留时间长于C组(P<0.05);A组与B组患者术后出现TND例数、CSS评分大于16分的例数均多于C组(P<0.05);A组与B组患者术后清醒时间均长于C组(P<0.05)。结论：药物联合双侧顺行选择性脑灌注(BASCP)方案可有效缩短MHC...