熄风止颤合剂对PSI诱导的帕金森病模型大鼠脑的影响

目的 观察熄风止颤合剂对蛋白酶抑制因子Ⅰ(proteasome inhibitors I,PSI)诱导的帕金森病(PD)慢性动物模型大鼠行为学及大脑多巴胺神经元的影响.方法 雄性SD大鼠背部皮下注射PSI,制备慢性PD动物模型,将造模成功大鼠随机分为三组:分别以生理盐水、美多巴及熄风止颤合剂进行灌胃治疗,观察其行为学变化,并分别通过TUNEL法、电镜、免疫组织化学方法观察大鼠脑多巴胺神经元的变化.结果 中药熄风止颤合剂可以改善PD的症状,且中药组大鼠大脑中多巴胺神经元的密度高于美多巴组,细胞凋亡指数低于美多巴组.结论 熄风止颤合剂对PD有治疗作用,其作用可能是通过降低多巴胺神经元的凋亡.     

RNA干扰抑制胃癌VEGF表达的实验研究

在诸多促血管生成因子中,VEGF的作用最强,在肿瘤血管生成的各个环节均有重要作用,且能特异性地作用于血管内皮细胞的有丝分裂原,故抑制VEGF表达是当前抗肿瘤血管生成的最重要策略.本研究采用DNA载体细胞内表达小片段干扰RNA技术(small interfering RNA,siRNA),构建干扰质粒psiRNA-VEGF并观察其抑制人胃腺癌细胞(MGC-803)VEGF表达的效果.     

MCF-7/BCRP细胞系的建立及其生物学特征

目的：建立表达乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的耐药细胞系MCF-7／BCRP。方法：提取MCF-7细胞的总RNA，设计BCRP基因上下游引物，用RT-PCR法克隆出BCRP基因全长并连接到真核表达栽体pcDNA3．1(-)上，转染MCF-7细胞后以G418筛选细胞。采用米托蒽醌外排实验、细胞毒性实验、细胞群体倍增时间、免疫荧光法鉴定构建的耐药细胞系。结果：MCF-7／BCRP对米托蒽醌耐药指数增加至14．72：外排米托蒽醌的作用增强；细胞群体倍增时间较亲代细胞延长：MCF-7／BCRP细胞能表达一定量的BCRP。结论：MCF-7／BCRP细胞能够表达BCRP并具有BCRP的耐药表型。     

阿司匹林对STZ糖尿病大鼠外周血白细胞iNOS mRNA和胰岛细胞iNOS表达的影响

目的：探讨早期应用阿司匹林对糖尿病大鼠外周血白细胞（PBL）iNOS mRNA、胰岛细胞iNOS表达的影响。方法：腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）制备实验性STZ糖尿病大鼠模型，治疗组给予肠溶阿司匹林灌胃。检测血糖、血浆胰岛素含量、胰岛β细胞胰岛素的表达情况，及胰岛中iNOS、外周血白细胞iNOS mRNA阳性细胞率的变化。结果：治疗1月后．胰岛iNOS阳性细胞及外周血白细胞iNOS mRNA阳性细胞表达率明显降低（P〈0．05）．结论：早期应用阿司匹林能明显降低外周血白细胞iNOS mRNA和胰岛中iNOS阳性细胞表达率，降低血糖水平，改善胰岛β细胞的分泌功能。     

双歧杆菌在肿瘤治疗中的应用

双歧杆菌作为机体肠道内数量占绝对优势的生理性菌群，对维持机体的健康发挥重要的功能。双歧杆菌能够刺激机体的免疫器官且自身具有抗肿瘤活性。此外，双歧杆菌专性厌氧的特性使其在肿瘤的基因治疗中起重要的作用。     

针对糖尿病易感基因Vβ13的慢病毒系统的建立及其对T细胞的转导

目的 应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效沉默连接红色荧光蛋白mCherry与靶基因1型糖尿病易感基因Vβ13的表达,建立一种简便有效基因沉默的系统,并初步研究慢病毒感染T细胞的可能性.方法 以Vβ13 mRNA编码序列作为干扰靶点,以慢病毒质粒UTG作为载体,构建靶向Vβ13的shRNA表达质粒,构建携带Vβ13的mCherry红色荧光蛋白的质粒作为验证shRNA有效性的靶点,并转染293FT细胞.通过红色荧光的表达及RT-PCR和Western blot确定最佳沉默Vβ13序列后,将有效的UTG-Vβ13质粒与辅助质粒共转染293FT细胞,低温超高速离心,获取高滴度慢病毒.应用慢病毒感染大鼠T细胞,光镜观察T细胞被慢病毒感染的情况,流式细胞术检测T细胞的绿色荧光表达情况.结果 成功构建Vβ13-shRNA慢病毒载体UTG-shRNA-Vβ13,RT-PCR及Western blot结果显示慢病毒感染的293FT细胞Vβ13 mRNA及蛋白表达相对于对照组显著降低.构建的慢病毒可以成功感染T细胞.结论 红色靶基因-绿色慢病毒系统具有简便的筛选性能;UTG慢病毒对神经干细胞具有较高感染效率.可作为一种良好的基因导入载体,实现慢病毒介导的RNA干扰在T细胞内的有效表达,并为T细胞过继性转移的相关研究提供技术支持.     

藻酸双脂钠联合更昔洛韦在体外抗人巨细胞病毒感染的效果研究

目的　研究藻酸双脂钠(PSS)联合更昔洛韦(GCV)在体外抗人巨细胞病毒(HCMV)感染的作用。方法　应用体外细胞培养技术构建HCMV-AD169 感染人胚肺成纤维细胞(HELF)模型,对照组采用GCV (50 mg.L_-1)单一药物,实验组采用PSS (100 mg.L_-1)和GCV (50 mg.L_-1)的联合药物,应用两组药物同时对模型进行干预,观察干预后两组的特征性致细胞病变效应(CPE)的变化,同时应用RT-PCR法检测用药后两组HCMV的IE2的表达情况。 结果 实验组和对照组均可提高感染细胞的存活率,同时降低感染细胞中HCMV IE2的mRNA表达量。显微镜下形态学观察显示,相比对照组,实验组能明显降低药物对HELF细胞的毒性作用,提高细胞存活率。结论　PSS联合GCV具有良好的体外抗HCMV作用,二者具有协同抗病毒作用。     

肥大细胞及其上高亲和力雌激素受体在肠易激综合征发病机制中的作用研究

目的:探讨肥大细胞及其上雌激素受体在肠易激综合征(IBS)患者肠道内的分布、变化和临床意义,并对性激素在消化道的作用靶点和可能的细胞学机制作出合理解释和推断。方法:经结肠镜钳取24例正常人和59例IBS患者回肠末端、