高尿酸通过TLR4/NF-κB信号通路诱导肾小管上皮细胞上皮-间充质转化的作用研究

目的 探讨尿酸诱导肾小管上皮细胞上皮-间充质细胞转化(epithelia-mesenchymal transition,EMT)的作用及机制.方法 采用不同质量浓度的尿酸预孵育肾小管上皮细胞(HK-2)48 h,通过倒置显微镜观察尿酸对HK-2细胞形态的影响,Western blot检测Fibronectin、α-SMA和E-cadherin蛋白表达变化.Real-time PCR检测炎症因子IL-1 β、IL-6以及TNF-α mRNA的表达变化,免疫荧光检测上皮细胞标志物cytokeratin和间充质细胞标志物vimentin的表达变化.结果 与正常组相比,15 mg/dL的尿酸处理HK-2细胞48 h后,HK-2细胞间隙增大,呈长梭形改变.间充质细胞标志物Fibronectin、α-SMA表达明显升高,而上皮细胞标志物E-cadherin的表达明显下降(P＜0.05).同时,高浓度尿酸诱导了HK-2细胞炎症因子IL-1β、TNF-α的表达升高(P＜0.05),TLR4/NF-κB信号通路活化,而靶向抑制NF-κB信号通路活化可以显著抑制尿酸诱导的EMT.结论 高尿酸可以通过活化TLR4/NF-κB信号通路诱导肾小管上皮细胞EMT的发生,靶向干预NF-κB信号通路可以显著抑制尿酸诱导的肾间质纤维化.     

酶联免疫吸附技术测定鸡蛋黄中抗幽门螺杆菌IgY活性

目的:探索测定抗Hpylori-IgY的方法. 方法:用间接ELISA法测定幽门螺旋杆菌(Hpylori)超声破碎物免疫鸡所产鸡蛋中抗H pylori-IgY的效价.用间接ELISA法检测抗Hpylori-IgY的酸碱及酶稳定性. 结果:用幽门螺旋杆菌的超声破碎物免疫产蛋母鸡,可得到高效价的抗幽门螺旋杆菌IgY.IgY的酸稳定性好,耐胃蛋白酶. 结论:间接ELISA法简单、准确,可作为测定IgY的标准方法.     

ELISA检测白血病和淋巴瘤患者弓形虫抗体阳性率

ELISA检测贵州省白血病和淋巴瘤患者各150例血样中弓形虫特异性抗体(Ig G、Ig M)和循环抗原(CAg),计算阳性率。PCR扩增弓形虫529 bp特异性片段。结果显示,白血病患者弓形虫Ig G和Ig M抗体阳性率分别为16.0%(24/150)和2.7%(4/150),CAg阳性率为2.0%(3/150)。淋巴瘤患者弓形虫Ig G和Ig M抗体阳性率分别为20.0%(30/150)和1.3%(2/150),CAg阳性率为0.7%(1/150)。健康人Ig G和Ig M抗体阳性率分别为6.4%(7/110)和0.9%(1/110),CAg阳性率为0.9%(1/110)。白血病患者、淋巴瘤患者和健康人之间弓形虫Ig G抗体阳性率差异有统计学意义(P0.05),白血病和淋巴瘤患者间Ig G抗体阳性率差异无统计学意义(P0.05);弓形虫Ig M抗体和CAg阳性率在各组间差异均无统计学意义(P0.05)。白血病患者、淋巴瘤患者和健康人血样中均未扩增出529 bp特异性条带。     

L6565小鼠白血病病毒诱发小鼠白血病

为探讨病毒与白血病发生的关系 ,我们用Ｌ65 65小鼠白血病病毒 (Ｌ65 65ＭＶＬ)悬液感染乳鼠 ,每周观察小鼠的发病情况及病理变化 ,并用逆转录一聚合酶链反应 (ＲＴ -ＰＣＲ)动态检测小鼠体内病毒核酸的分布。结果发现 :小鼠感染病毒后 3～ 5周 ,其脾脏和淋巴结呈早期白血病的病理改变。至第 1 0～ 1 2周小鼠发生淋巴细胞白血病 ,表现出耸毛、活动减少、腹膨胀等症状。病毒核酸于感染后第 2周首先在小鼠胸腺、脾脏检测到 ,随时间延长、病毒核酸广泛分布在外周血、胸腺、脾脏、淋巴结等多种脏器组织中。本实验表明Ｌ65 65小鼠白血病可诱发小…     

卵黄抗幽门螺杆菌抗体的制备及特性研究

幽门螺杆菌 (H .pylori,Hp)与慢性胃炎、消化性溃疡和胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤有密切关系。采用抗生素三联或四联疗法治疗Hp感染 ,但Hp易耐药。用特异性抗体防治传染病是经典的方法 ,抗HpIgG是防治Hp感染的途径 ,因此 ,我们采用鸡卵黄免疫球蛋白G抗体 (又称IgY)防治Hp。IgY是母鸡血中的IgG选择性地转移到卵黄中 ,是卵黄中惟一的免疫球蛋白类 ,具有与血清IgG一样的抗体活性。这提示 ,可以从免疫母鸡的蛋中获得大量特异性抗体。用 2 5株Hp菌株的培养液作为免疫材料 ,其中NCTC116 37、NCTC116 39、SS1三株由中国预防科学院流行病…     

Y染色体单倍型在贵州苗族人群中的多态性分布

目的：调查Y染色体单倍型在贵州省苗族人群中的分布，从父系历史探寻贵州省苗族人的起源和迁移及其与其他民族间的亲缘关系。方法：采用PCR—RFLP法观察了由13个单核苷酸多态位点(SNPs)组成的Y染色体单倍型在贵州省苗族人群中的多态性分布，并将结果与我国其他民族及世界各大洲人群进行比较。结果：贵州省苗族人群中具有我国南方人群特异性的H7、H11和H12单倍型出现，其单倍型分布与我国南方汉族、土家族、彝族、布依族等较为接近，尤以M122(H5 H6)的频率较高。结论：提示贵州省苗族人属于我国南方群体，与南方汉族人及土家族、彝族人有一定的亲缘关系。     

BALB/c小鼠急、慢性弓形虫感染时Th细胞应答的基因表达谱分析

目的:分析弓形虫感染BALB/c小鼠后诱导Th细胞应答的基因表达谱特征.方法:以刚地弓形虫速殖子感染BALB/c小鼠,分别于感染后第6天和第12天各处死小鼠2只,制备小鼠脾细胞悬液并混合,提取细胞总RNA.采用基因芯片技术检测小鼠Th细胞应答各相关基因的表达情况,并对部分表达变化的基因应用Real time-PCR予以验证.结果:BALB/c小鼠感染弓形虫后,基因芯片检测共有20种基因表达差异超出2倍以上.感染后第12天比第6天,8种基因(Gata-3、Ccr3、Ccr4、Bcl6、Nfatc1、CD80、Fos、CD69)表达上调,12种基因(T-bet、CIITA、Irf1、Mapk9、Nfatc3、Fasl、Tyk2、Lat、Mapk10、Socs3、Socs6、Yy1)表达下调.总体呈现Th2型免疫应答基因上调,Th1型免疫应答基因呈下调趋势.Gata-3和T-bet基因的Real time-PCR检测结果与基因芯片检测一致.结论:从基因表达谱分析来看,BALB/c小鼠感染弓形虫后在感染急性期以Th1细胞应答为主,度过急性期后以Th2细胞应答为主.     

通用引物检测登革热病毒NS1基因及其酶切分型

目的：利用通用引物经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测登革病毒RNA，并经限制性内切酶酶切鉴定病毒型别。方法：用C6／36细胞培养登革病毒，碘化钠法提取病毒RNA，利用通用引物进行RT-PCR，对PCR产物用Mav I限制性内切酶酶切鉴定。结果：应用通用引物RT-PCR方法可检测到含量为0．212ng／L的病毒RNA，扩增的产物及酶切片段与预期的靶序列长度和限制酶谱分析相一致。结论：用登革病毒NS1区通用引物通过RT-PCR并经酶切分型，是诊断登革病毒感染的一种简易快速的方法。     

登革2型病毒感染小鼠体内病毒迁移及分布

目的 观察登革病毒在感染动物模型体内的迁移和分布特点，了解登革病毒的感染致病机制。方法 以2型登革病毒新几内亚(NGC)株和临床分离株病毒悬液皮下注射，建立登革病毒感染的小鼠模型。于感染后不同时间采集小鼠血浆、肝、脾、肾、脑等脏器组织，用病毒分离及RT-PCR方法检测病毒的存在。结果 2株2型登革病毒感染小鼠后，在小鼠血浆、肝脏、脾脏、肾脏和大脑组织中均可检测到病毒，病毒在脑组织中持续存在的时间最长，在肝脏中滞留时间最短。临床分离株感染小鼠体内病毒持续时间较NGC株长。结论 登革病毒感染后病毒呈全身性多脏器组织分布，临床分离株的致病作用较NGC株强。     

贵阳市区及近郊三条主要河流细菌污染调查

对贵阳市区及近郊的三条主要河流水中细菌污染情况进行有样调查。结果表明，细菌部数为０．６×１０＾２－１．２×１０＾５ＣＦＵ／ｍｌ；大肠菌群数最低小于９０个／Ｌ，最高大于２３８００个／Ｌ。并分离出务寒沙门菌１１株，伤寒沙门菌５株，且均为多重耐药株。提示所调查的三条河流细菌污染较为严重。