人羊膜上皮细胞的分离、培养及鉴定

目的建立人羊膜上皮细胞分离、培养及鉴定方法。方法从足月分娩人胎盘剥离羊膜,采用胰蛋白酶消化法分离人羊膜上皮细胞（hAECs）,采用免疫细胞化学、免疫荧光染色及流式细胞术分析其表型特征,使用含表皮生长因子LG—DMEM培养基培养。结果采用低速旋转胰蛋白酶消化法从羊膜分离的hAECs数为（6．13±1．42）×10^7,份（n=12）,所分离的hAECs明显表达上皮细胞标志物角蛋白CK19,不表达间充质细胞标志物波形蛋白,不同程度地表达CD29、CD44和CD71。在表皮生长因子存在的条件下,hAECs生长增殖较快,培养至第6天细胞总数可增殖171倍。结论建立了人羊膜上皮细胞分离、培养及鉴定方法,hAECs具有上皮细胞的特异标志和间充质干细胞的某些表型特征。     

脐带血造血干/祖细胞罗丹明123荧光染色及其意义

目的 探讨人脐带血造血干,祖细胞(UCB-HSPC)罗丹明123(Rh0123)荧光染色特点及其应用价值.方法 采用密度梯度离心法获取脐带血单个核细胞(UCB-MNC),用含终浓度为0.1 μg/ml Rh0123的2%胎牛血清-PBS液、37℃下孵育UCB-MNC细胞(细胞浓度为106/ml)20 min,之后用Lin抗体(PE标记的CD19、CD13、CD2、CD8、CD3)及造血干,祖细胞(HSPC)标志抗体CD34-PerCP和CD38-APC标记UCB-MNC细胞,流式细胞仪分析HSPC亚群及其Rh0123染色特点.结果 流式细胞术检测结果表明,UCB-Lin-MNC中的HSPC比例高于MNC中约6倍;UCB-CD34+CD38+造血祖细胞(HPC)的Rh0123染色平均荧光强度值为23.55±2.40,是UCB-CD34+CD38-造血干细胞(HSC)值10.2±21.03的2倍多(P<0.01).结论 UCB-Lin-MNC中富含HSPC;UCB-HSC的Rho123染料聚集能力明显低于UCB-HPC,提示Rh0123拒染法可作为进一步纯化人UCB-HSC的新手段.     

胃黏膜TGF-β1在幽门螺杆菌感染中的表达及与外周血T细胞亚群变化的关系

目的:探讨幽门螺杆菌(H.pylori)感染、TGF-β1及T淋巴细胞亚群在胃黏膜癌变过程中的作用及相互关系.方法:选取不同胃黏膜病变组织的72例胃镜活检标本,采用快速尿素酶试验(rapid urease test,RUT)结合Giemsa染色判断H.pylori感染,免疫组织化学染色技术检测胃黏膜组织中TGF-β1表达,流式细胞术检测不同胃黏膜病变患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比值.结果:TGF-β1在慢性浅表性胃炎(CSG)、慢性萎缩性胃炎(CAG)、肠上皮化生及不典型增生(IM/Dy)和胃癌(GC)中表达的阳性率分别为39.1%,52.6%,62.3%和87.5%,CSG组与IM/Dy、GC组相比,差异有统计学意义(P<0.05);IM/Dy中H.pylori阳性者TGF-β1表达明显高于H.pylori阴性者(87.5% vs 33.3%,P<0.05).与CSG相比,GC中CD3+明显降低(P<0.05),CD4+及CD4+/CD8+明显降低(P<0.01);IM/Dy患者CD4+及CD4+/CD8+低于CSG,有显著性差异(均P<0.01).不同胃黏膜病变TGF-β1表达与CD3+、CD4+T细胞、CD4+/CD8+呈负相关.结论:在GC前病变中,AKCSG到GC,TGF-β1表达逐渐增加,细胞免疫功能降低,TGF-β1对细胞免疫功能的抑制作用是IM/Dy、GC患者细胞免疫功能低下的原因之一.     

315例染色体异常遗传筛查报告

目的:通过染色体核型遗传学分析,了解遵义及周边地区染色体异常疾病的组成与分布特点。方法:采用培养的外周血淋巴细胞,常规方法制备染色体并对其进行核型分析。结果:从1 884例遗传咨询患者中,共检出异常染色体核型315例,检出率为16.7%;其中,常染色体异常206例,性染色体异常109例,两者分别占异常核型的65.4%和34.6%;在常染色体异常中21-三体综合征最多见,占常染色体异常核型的78.6%;而性染色体异常以Klinefelter综合征最多,占性染色体异常核型的72.5%,其次为Turner综合征,占11.9%。结论:遵义及周边地区染色体异常总检出率高于国内部分地区。为降低出生缺陷率,应重视产前筛查及产前诊断。     

左旋布比卡因复合芬太尼腰-硬联合麻醉用于老年阴式全子宫切除术的观察

目的探讨小剂量左旋布比卡因复合芬太尼椎管内联合麻醉在老年阴式全子宫切除术中的临床效果及安全性。方法选择行老年阴式全子宫切除术患者40例,年龄60-78岁,随机分为两组:A组,左旋布比卡因5mg 芬太尼25ug与10%葡萄糖水配成2.5ml溶液20例;B组,布比卡因10mg 10%葡萄糖水配成2.5ml溶液20例。实施腰-硬膜外联合麻醉。观察并记录:两组最高阻滞平面及到达时间,改良Bromage评分法判断运动神经阻滞程度,运动神经阻滞持续时间,平面消退时间,平均动脉压和心率变化及寒战等副作用。结果所有患者麻醉镇痛完善。两组最高阻滞平面及到达时间,麻醉持续时间,肌松效果差异均无显著意义。B组低血压和寒战发生率显著高于A组(P<0.05),B组运动神经阻滞评分与阻滞持续时间显著高于A组(P<0.01)。结论左旋布比卡因复合芬太尼腰一硬联合麻醉能满足老年患者阴式全子宫切除术的麻醉要求,且副作用明显减少。     

医院药剂科管理工作的方向

医院药学是医院工作的重要组成部分。近年来,随着科学技术的迅猛发展,医药新理论、新技术在医院药学领域得到广泛应用,使医院药学的内容不断充实,其总体水平也在迅速提高。设想21世纪的医院药学是一门综合性很强的学科,它涉及到化学、物理学、药理学、药剂学、医学、经济学、信     

人下颌下腺干/祖细胞的分离及培养

背景:近年来国内外学者研究证实了唾液腺组织中的确存在一类具有成体干细胞特性的唾液腺细胞,但是这类干细胞的研究多集中在动物的唾液腺,而人类唾液腺干细胞的生物学特征研究较少.目的:体外分离、培养人唾液腺干/祖细胞,并观察其生物学特征.方法:从流产胎儿下颌下腺中分离、单克隆培养获得人唾液腺干/祖细胞,应用免疫荧光染色方法检测上皮细胞标志CK19,Laminin的表达,流式细胞术检测CD29,CD90.1和 CD117的表达.绘制人唾液腺干/祖细胞生长曲线,评价体外增殖能力.结果与结论:人唾液腺干/祖细胞胞浆表达上皮细胞标志CK19及Laminin;流式细胞术结果显示,CD90.1,CD29及CD117的表达率分别为99.69%,98.83%及67.27%;体外培养也表现出高增殖能力、克隆形成能力和较高的传代数等组织干细胞特性.提示人胎儿下颌下腺中能分离出具有组织干细胞特性的细胞.     

杜仲叶通过Shp2激活Erk1/2促进BMSCs增殖的研究

目的 研究杜仲叶提取物对大鼠BMSCs的增殖作用及其分子机制.方法 使用密度梯度离心和贴壁培养法从SD大鼠股骨骨髓中获取BMSCs,通过流式细胞仪检测细胞表面抗原；分别用0,5,20,60,100 mg/ml的杜仲叶提取物和20mg/ml杜仲叶提取物+10 μmol/L Shp2抑制剂NSC87887处理BMSCs,2d后BrdU检测细胞增殖情况；用无血清无酚红培养基饥饿大鼠BMSCs 6 h后,一组分别加入0,5,20,60,100 mg/ml的杜仲叶提取物处理15 min,另一组用10 μmol/LShp2抑制剂处理预处理2h后加入20 mg/ml杜仲叶提取物处理15 min,Western blot检测p-Shp2(Tyr580)和Erk1/2磷酸化水平的变化.结果 流式细胞仪细胞表面抗原检测显示CD29、CD90呈阳性,CD34、CD45呈阴性；BrdU结果显示杜仲叶提取物促进BMSCs增殖,并具有浓度依赖性,NSC87887可以抑制其促进作用；杜仲叶提取物可以诱导BMSCs的p-Shp2 (Tyr580)和Erk1/2磷酸化水平升高,而对诱导Erk1/2磷酸化的促进作用是通过激活Shp2来完成的.结论 杜仲叶提取物通过Shp2/Erk途径促进大鼠BMSCs增殖.     

去甲氧基姜黄素对涎腺腺样囊性癌细胞株ACC-M增殖和凋亡的影响

目的 进一步探讨去甲氧基姜黄素（DMC）对涎腺腺样囊性癌的治疗作用.方法 取对数生长期涎腺腺样囊性癌细胞株ACC-M随机分为对照组和观察组,观察组分别加入终浓度为5、25、50、100、200 μmol/L的去甲氧基姜黄素20 μl,对照组加入相同体积二甲基亚砜（DMSO）.分别于培养24、48、72 h后在倒置显微镜下观察细胞形态,应用MTT比色法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 对照组细胞生长迅速,观察组随去甲氧基姜黄素作用时间和浓度增加细胞收缩、变小、破碎,部分脱落漂浮于培养液;观察组去甲氧基姜黄素浓度＞50 μmoL/L时细胞生长抑制率及凋亡率均显著高于对照组,且与去甲氧基姜黄素浓度和作用时间均呈正相关（P＜0.05）.结论 去甲氧基姜黄素可通过抑制细胞增殖并诱导其凋亡发挥抗肿瘤作用,且该作用具有浓度和时间依赖性.     

美研制新型抗生素治肺结核

美国一家药物研发公司的科学家发现了一种治疗肺结核的新型化合物，它在治疗感染肺结核的实验鼠过程中，效果和速度都优于现有的标准。此外，在自愿参加试验的健康人中进行的初步研究表明这种药是安全的。