人胎盘组织造血干/祖细胞的分离富集

为了探索从胎盘组织中分离富集造血干/祖细胞(HSPC)的标化流程,采用机械法加胶原酶消化法制备人胎盘组织单个细胞悬液,用羟乙基淀粉(6%HES)法从中分离出单个核细胞(MNC),再经免疫磁珠分选法分选出CD34-、CD34+CD38-、CD34+CD38+3个细胞亚群,用流式细胞术对各阶段分选细胞进行表型分析并计算分选细胞的富集度和回收率。结果表明:机械法加胶原酶消化法制备的人胎盘组织单个细胞悬液中单个核细胞(MNC)数达(12.30±3.51)×108,与脐血初始样品所含的MNC数(8.86±5.38)×108比较差异无统计学意义,而其CD34+细胞所占百分率[(3.93±2.31)%]则明显高于脐血[(0.44±0.29)%]。胎盘组织单个细胞悬液经6%HES分离后MNC和CD34+细胞的回收率分别为(45.3±11.7)%和(51.1±9.8)%;MNC经免疫磁珠分选后,其CD34+细胞的纯度和回收率分别为(73.4±14.1)%和(52.7±11.7)%。结论:本实验所建立的"机械法加胶原酶消化法-HES分离MNC-MACS分选目标细胞"的分离纯化方法可从胎盘组织获得高丰度、高富集度、高活性的HSPC,为进一步研究胎盘HSPC提供了比较经济、效果较好的分离富集方案。     

用Percoll连续密度梯度离心及阿新蓝-吉氏染色分离和鉴定隐孢子虫卵囊

Carcia等(1983)报道检测隐孢子虫卵囊最有效的浓缩方法是Sheather’s溶液漂浮法,且若用相差显微镜观察制备的标本无需染色。随后相继发展了一些净化隐孢子虫卵囊的技术。迄今,应用最广泛的较新方法有Percoll不连续密度梯度分离法和使用由Zierdt(1984)发明的寄生虫浓缩装置。但由于在卵囊悬液中含有大量的污染物,使用这些方法不能获得良好的效果。作者在寻找分离卵囊的新方法时发现,用ConcanavalinA-Sepharose 4B代价昂贵,而用Percoll连续密度梯度离心分离则较快速,并且能回收原样本中80％的卵囊。至今在试验过的所有染色方法中,对粪便样本中诊断最有效的方     

大鼠外周血间充质干细胞的富集及生物学特性研究

目的:探究大鼠外周血间充质干细胞(PBMSC)的有效富集方法,并进一步研究其生物学特性。方法:采集经G-CSF动员的4周龄SD大鼠外周血,用密度梯度离心法分离出单个核细胞,继而采用贴壁培养法获得成纤维样集落生长细胞,绘制细胞生长曲线;应用流式细胞术(CD90、CD44、CD29、CD45、CD11b和CD79a)和免疫细胞化学染色法(CD73、CD105、CD34和HLA-DR)分析富集的第2代PBMSC的表型特征,并对其进行成骨、成软骨和成脂肪细胞诱导分化能力鉴定。结果:1原代培养6-7 d可见明显的成纤维样细胞集落生长,至培养21 d细胞生长汇合度可达80%;传代细胞贴壁能力强,形态均一,呈梭形漩涡状生长;传代培养的PBMSC于培养次日即可进入对数生长期,细胞倍增时间为39.2 h。2富集的PBMSC高表达CD90、CD44、CD29、CD73及CD105,不表达CD45、CD11b、CD79a、CD34和HLA-DR。3PBMSC分别经成骨、成软骨和成脂细胞诱导分化培养21 d后,再分别经茜素红染色显示有大量钙化结节形成,阿利新蓝染色的胞浆内有大量糖胺聚糖形成,油红O染色细胞内有大量脂滴形成。结论:采用本研究方法可从大鼠外周血中分离富集到高纯度、高丰度的PBMSC,且其具备MSC的生长特点和表型特征,并具有中胚层多系分化能力。     

重组杜氏利什曼原虫39kD抗原的诊断价值

为了给内脏利什曼病（ＶＬ）患者提供较为准确的实验诊断方法。我们将表达杜氏利什曼原虫３９ｋＤ抗原的大肠杆菌制备物进行电泳并转移至硝酸纤维滤膜上，以１１例确诊ＶＬ病人的不同稀释度血清对其识别，当稀释度达１∶４００时，全部病人血清均能明显识别３９ｋＤ抗原带．而正常人血清和其他病人血清不识别３９ｋＤ抗原带，说明重组杜氏利什曼原虫３９ｋＤ抗原具有一定的诊断价值，用其检测病人血清中相应抗体可以诊断内脏利什曼病。     

集体化疗与小学生目标化疗防治肠线虫病的效果观察

在肠线虫病防治措施中，化疗是一项必要的手段，这对迅速降低感染程度、减轻病情有直接作用。化疗要取得显效，涉及选用的药物、用药剂量与服法，以及服药对象的确定等诸多方面的问题，均值得探讨。近年来，我们采用集体化疗与小学生目标化疗两种方法进行了效果观察。对象与方法1对象1．1集体化疗吴堡乡共20个行政村，总人口26391人，经乡及村医务人员（剔除长期外出及禁忌者）列出服药人员名单。1．2小学生化疗各村小学在校学生。2驱虫药物及服法采用合剂：每片合阿苯达唑100mg和甲苯达隆200mg。4岁以下儿童服1片，早晚各服半片；5岁以上及…     

代谢性酸碱失衡的诊断

许多疾病常伴发酸碱平衡紊乱即酸碱失衡,严重的可明显影响机体代谢和生理功能甚至危及生命。随着酸碱平衡理论知识的不断深化及自动化血气分析仪的广泛使用,酸碱失衡的判断已成为临床日常诊疗工作的重要一环。     

苯并咪唑对线虫的作用及线虫抗药性机制的研究进展

苯并咪唑对线虫作用的基本方式是在线虫微管蛋白结合而抑制微管的聚合，并由此引起一系列继发的生化和生理学效应。苯并咪唑的选择性毒杀机制在于与线虫微管蛋白的高亲和性结合，而线虫的抗药性 β－微管蛋白基因的改变使其蛋白结构发生变化，导致与苯并咪唑高亲和结合下降或结合位点丢失。     

外周血T淋巴细胞HLA-B27检测辅助诊断强直性脊柱炎

目的 探讨外周血T淋巴细胞HLA-B27和血清多项免疫指标检测对强直性脊梓炎(AS)的辅助诊断价值.方法 采用流式细胞仪对52例疑似AS患者外周血T淋巴细胞HLA-B27表达进行检测,结合临床资料对AS作出诊断;对其中37例男性病例血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM,补体C3、C4及C反应蛋白(CRP)含量进行免疫比浊法测定.结果 52例疑似AS患者共检测出 HLA-B27+13例(男性12例,女性1例),确诊AS患者12人(男性患者11人,女性1人),包括男性HLA-B27+AS患者9例(最小年龄12岁,最大58岁),男性HLA-B27-AS 2例(分别为20岁和78岁),女性HLA-B27-AS 1例为(9岁),男性AS确诊患者的HLA-B27阳性率为82%.除补体C3外,男性AS组IgG、IgA、IgM、C4及CRP均较男性非AS组高(P＜0.05).结论 AS患者体液免疫功能明显活跃,HLA-B27检测有助于临床资料疑似病例的AS诊断.     

无机骨材料对上颌窦提升术后骨再生的影响

目的：研究兔上颌窦提升术后扩增区域内新生骨的改建过程和破骨细胞的分布情况,探讨无机骨颗粒对上颌窦提升术后骨再生的影响。方法：对8只日本大耳白兔施行上颌窦提升术。实验组扩增区植入无机骨颗粒,对照组仅使血凝块充满扩增区,不填充移植材料。结果：术后4周,对照组扩增区近窦黏膜处的新生骨表面可见大量破骨细胞。组织形态测量学分析表明,术后4周至8周实验组窦底提升高度显著大于对照组;术后8周时实验组新生骨面积较对照组明显增加。结论：上颌窦内存在的空气压力可导致上颌窦提升术后新生骨发生吸收。在上颌窦提升术中使用无机骨填充材料可抵抗上颌窦内的空气压力,并具有良好的骨重建效果。     

大鼠肱二、肱三头肌肌纤维型组成及分布研究

采用Guth—Samaha肌球蛋白ATP酶组织化学染色法并稍做改良，分别对成年SD大鼠肱二、肱三头肌长头冰冻切片进行肌纤维染色分型研究。发现大鼠肱二、肱三头肌长头均可分出两型肌纤维，即Ⅰ型纤维（慢缩纤维）和Ⅱ型纤维（快缩纤维），并且两型肌纤维在两肌中均呈棋盘样均匀分布；图像分析仪计数肱二头肌长头以Ⅱ型纤维占绝对优势，肱三头肌长头则以Ⅰ型纤维为主。提示大鼠肱二头肌为力量兼速度型肌，而肱三头肌则为耐力型肌，主要参与维持肢体姿势。