基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术快速鉴定降香中化学成分

目的:降香为我国传统名贵中药材,然目前市场上降香来源品种复杂,质量差异较大,为进一步明确其药效物质基础,采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间高分辨率质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术快速分析降香甲醇提取物中的化学成分。方法:采用UPLC RRHD SB-C18色谱柱(3.0 mm×100 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温40℃;采用电喷雾离子源,负离子模式采集数据。结果:通过一级精确荷质比和二级碎片信息数据,结合文献资料,质谱裂解规律,Mass bank质谱数据库及对照品的保留时间等,从降香的甲醇提取物中初步鉴定83个化学成分,包括18个黄酮类,31个异黄酮类,10个新黄酮类,9个异黄烷类,7个其他类型黄酮和8个其他类成分。结论:UPLCQ-TOF-MS/MS技术方法可快捷、准确、较全面地鉴定降香甲醇提取物中的化学成分,降香的主要化学成分为异黄酮、黄酮、新黄酮、异黄烷等黄酮类,为降香的药效物质基础研究奠定基础,也为降香药材的质量标准提升提供理论依据和技术支持。     

蛋白激酶Cδ通过抑制自噬促进TRAIL诱导前列腺癌细胞凋亡

目的探讨蛋白激酶Cδ在去势抵抗性前列腺癌细胞中对自噬的影响,并研究其相关机制。方法使用去势抵抗性前列腺癌细胞C4-2和CWR22Rv1作为研究对象,将细胞进行分组,分别使用DMSO对照、BAF-A1、TRAIL、PKCδ激活剂PMA和PKCδ抑制剂rottlerin对细胞进行处理。用MTT检测各组药物处理后细胞存活状况;用Western blot检测各组药物处理后mTOR通路、自噬相关蛋白和凋亡相关蛋白的变化;用GFP-LC3荧光蛋白标记检测细胞内自噬作用的变化。结果 TRAIL诱导去势抵抗性前列腺癌细胞C4-2和CWR22Rv1自噬作用增强。PMA可以通过激活mTOR通路抑制自噬并提高细胞对TRAIL的凋亡敏感性。PKCδ在此过程中是抑制自噬作用的关键分子。结论本研究证实在去势抵抗性前列腺癌细胞C4-2和CWR22Rv1中,PKCδ/AKT/mTOR通路对细胞自噬的负向调节作用,激活该通路可以促进TRAIL诱导的细胞凋亡现象。     

冲击载荷下脂肪层的压缩性能

目的 对脂肪的动态压缩性能开展研究,进一步揭示损伤机制,为医疗救治提供参考。方法 基于改进的霍普金森杆（split Hopkinson pressure bar,SHPB）实验装置,对猪脂肪进行动态压缩实验,测量脂肪组织在不同应变率下的应力-应变曲线;对脂肪组织SHPB实验过程进行仿真分析;开展直径32 mm橡胶非致命弹侵彻人体腹部模拟靶标过程的数值模拟。结果 脂肪组织具有明显的应变率效应,两组高应变率下的应力-应变曲线近似为直线且斜率相近,弹性模量为3.25 MPa,约为准静态时的6倍;脂肪SHPB仿真曲线和实验曲线基本吻合,验证了所采用本构模型的正确性;非致命弹侵彻人体腹部过程中,皮肤表面出现了类似“水波”的环形凸起区域,脂肪层吸收了约67%的冲击动能。结论 脂肪组织的实验数据较为准确。数值模拟可以很好再现侵彻过程,为非致命武器对人体损伤效应的研究提供参考。     

微生物检测中培养基的制备及注意事项

制备培养基是细菌培养中不可缺少的工作,培养基的质量是微生物检测工作的基础。培养基的好坏,培养细菌时选择培养基类型是否恰当,都直接关系到检测结果的准确性、可靠性。因此,培养基的制备和使用是微生物实验室检测工作中的重要环节。培养基是用人工方法配制细菌生长所需要的营养物质[1]。培养基的种类繁多,在配制过程中,不注意方法,常会使配制过程变得非常繁琐,而且易导致细菌培养失败。本人根据多年实践经验,对培养基配制过程中的一些技巧及注意事项总结如下,以便微生物实验室不断完善和提高培养基的配制水平,为检测工作提供高质量的培养基,从而保证检测结果的科学有效。     

苓桂术甘汤加减联合西药改善慢性心力衰竭患者心功能临床疗效分析

目的探讨苓桂术甘汤加减联合西药改善慢性心力衰竭患者心功能的临床疗效。方法 80例慢性心力衰竭患者,随机分为观察组和对照组,每组40例。两组患者均给予常规的西药治疗,观察组在此基础上再给予苓桂术甘汤配合治疗,7 d为1个疗程,2个疗程后观察两组的临床疗效。结果观察组治疗治疗总有效率为95.0%,高于对照组的85.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组均未见明显不良反应。结论苓桂术甘汤加减联合西药对改善慢性心力衰竭患者的心功能有很好的临床疗效,能够明显提高临床治疗有效率,且没有明显的不良反应,值得临床推广。     

黄檀属植物东非黑黄檀的化学成分与药理作用研究进展

降香为我国Ⅱ级珍稀濒危保护植物降香黄檀的心材,资源稀缺,价格昂贵。东非黑黄檀与降香为同属植物,在非洲民间常用于治疗痢疾、腹泻、惊厥及支气管炎等疾病。目前,从该植物中分离得到化学成分15个,现代药理研究表明其具有抗癌、抗炎、抗菌、抗氧化、抗凝血活性、抗疟疾及抗HIV等多种生物活性。在收集整理大量国内外文献调研的基础上,对东非黑黄檀化学成分与药理活性进行综述,发现其有6个黄酮类成分与降香的化学成分相同,部分药理活性也相同,这些为其作为降香的潜在替代药材提供了一些理论依据,也为东非黑黄檀的深入研究提供重要参考。     

不同采收期龙脑樟挥发油的得率及质量分析

目的:比较不同采收期龙脑樟挥发油的得率及质量。方法:采集不同生长年限、不同月份龙脑樟枝叶,采取水蒸气蒸馏法提取挥发油,计算挥发油得率,利用GC-MS分析挥发油中主要类型成分,采用气相色谱法测定其中右旋龙脑、异龙脑、樟脑的含量。结果:与3年生长期样品相比,生长期为2年的龙脑樟枝叶挥发油得率稍高,且成分类型更少,主成分右旋龙脑GC-MS峰面积占主要成分总峰面积的80%以上。2年期的龙脑樟叶中,11月底采集的龙脑樟鲜叶挥发油得率最高(1.37%);每个月份样品中右旋龙脑质量分数均70%,其中5月份样品中质量分数最高,达87%;樟脑的质量分数11月份最低,仅0.32%;但所有挥发油样品中均不含异龙脑。结论:龙脑樟的最佳采收年限为2年,最佳采收期为11月底至12月初。建立了一种准确、可靠、重复性好的可同时测定龙脑樟中3种挥发性成分的气相色谱法,可为龙脑樟挥发油的质量评价提供实验依据。     

IFN-γ对日本血吸虫病肝纤维化小鼠Smads表达的影响

目的 从转录水平探讨参与TGF-β1信号转导的Smads在日本血吸虫感染的BALB/c小鼠形成肝纤维化过程中,以及IFN-γ治疗后的表达情况. 方法 BALB/c小鼠感染日本血吸虫尾蚴后第16周,将其随机分成3组:安慰剂组、吡喹酮治疗组和吡喹酮联合IFN-γ治疗组,治疗8周.分别在感染后第8周、12周、16周和24周,处死小鼠取肝脏组织,一部分进行天狼猩红染色,观察胶原沉积情况;另一部分提取总mRNA,通过RT-PCR检测Smad2.Smad3,Smad4和Smad7 mRNA的表达水平. 结果 肝纤维化模型在感染16周后形成.胶原表达随着感染时间的延长而增加.胶原表达在吡喹酮联合IFN-γ治疗组表达下降,而在安慰剂组和吡喹酮治疗组之间的差别无统计学意义.在肝纤维化形成过程中,Smad3 mRNA在感染16周时增加到正常水平的2倍;Smad2 mRNA的表达水平在感染12周时下降,在16周时,又恢复到正常水平;Smad4和Smad7 mRNA水平变化不明显.在联合治疗后,Smad7 mRNA水平明显增高,Smad2 mRNA保持在低水平上,Smad3 mRNA高于正常对照组,Smad4 mRNA水平仍无明显变化. 结论 Smad3 mRNA表达上调,Smad2 mRNA表达下调以及Smad7 mRNA的低水平表达可能导致小鼠肝纤维化的形成,IFN-γ可能通过诱导Smad7 mRNA表达上调,从而达到抗纤维化的作用.     

日本血吸虫感染BALB/c小鼠肝窦的动态观察

目的观察感染日本血吸虫BALB／c小鼠肝窦动态变化，及其与肝纤维化和肝细胞损伤的关系。方法建立感染日本血吸虫BALB／c小鼠肝纤维化动物模型，肝标本行常规病理染色和天狼猩红染色，进行肝纤维化程度的半定量分析，免疫组化染色检测肝窦Ⅳ型胶原（C—Ⅳ）和第Ⅶ因子相关抗原（vWF）的表达，测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST），另每组取2只小鼠新鲜肝组织进行透射电镜观察。结果感染小鼠肝窦内皮细胞（SEC）第4周窗孔减少、变小，第8周窗孔消失及SEC下基底膜（BM）形成，肝窦C—Ⅳ和vWF随感染时间的延续表达逐渐增强，肝纤维化程度也逐渐增高，血清ALT和AST与感染时间无关。结论血吸虫感染所引起的小鼠SEC表型改变可能是其诱导肝纤维化的始动机制之一。     

糖尿病肾病脑动脉硬化患者血清β_2-微球蛋白、基质金属蛋白酶-2水平分析

目的:分析糖尿病肾病脑动脉硬化患者血清β2-微球蛋白(β2-MG)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)水平变化。方法:将80例糖尿病肾病患者分为脑动脉硬化组(48例)和脑动脉正常组(32例),分别检测两组血清β2-MG和MMP-2水平,并行组间比较分析。结果:脑动脉硬化组β2-MG水平较脑动脉正常组明显升高,而MMP-2水平较脑动脉正常组明显降低(P均<0.05)。结论:糖尿病肾病患者血清β2-MG、MMP-2异常可能与其脑动脉硬化有关。