大鼠脑室出血鞘内与脑室内纤溶治疗对比研究

目的研究大鼠鞘内与脑室内注射尿激酶两种纤溶治疗对脑室系统血凝块的影响。方法借助大鼠脑立体定位仪建立大鼠脑室出血模型；测定腩组织含水量，并比较不同途径纤溶治疗对脑组织水肿的影响；通过脑片及HE染色观察血凝块清除情况。结果两治疗组鞘内组和脑室组脑组织含水量较模型组明显减少（P〈0．05），但鞘内组和脑室组之间脑组织含水量无显著性差异（P〉0．05）；脑片及HE染色观察到模型大鼠脑室系统内血凝块有残留，而两治疗组脑室血块大部分被清除。结论脑室出血后经鞘内和脑室内纤溶治疗均能加快血块溶解，促进脑脊液循环，减轻脑组织水肿和损伤。     

嗅鞘细胞移植脊髓损伤大鼠后Semaphorin3A的表达

脊髓损伤后损伤区Semaphorin3A(Sema3A)表达明显升高,嗅鞘细胞移植对此会有何影响？实验发现单纯脊髓横切损伤后,会出现脊髓出血、水肿、变性、坏死,囊腔形成,胶质细胞增生和神经纤维再生等病理反应。嗅鞘细胞移植后,脊髓的上述病理反应明显减轻,损伤区神经元和神经纤维的坏死程度下降,损伤区Sema3A表达降低。证实嗅鞘细胞移植可通过降低Sema3A表达对损伤脊髓神经元起保护作用。     

5-羟色胺在大鼠实验性脑震荡脑组织中的表达

目的 探讨5-羟色胺在大鼠实验性脑震荡脑组织中的表达及其意义。方法 采用Wistar雄性二级大鼠复制脑震荡动物模型。于伤后1，3，7，14及30d取脑组织，经免疫组化等技术研究5-羟色胺在脑震荡发生发展中的变化规律。结果 100g组见典型脑震肠的临床表现，其病理改变为脑血管收缩与扩张，脑组织淤血，水肿，神经元变性，坏死，尼氏体减少甚至消失，5-羟色胺于伤后1d表达增强，3d达高峰，7d后开始减少，而于14d后逐渐恢复至正常水平。阳性染色见于大脑，海马，丘脑及小脑神经元胞浆内。结论 脑震荡以血液循环障碍和实质细胞变性，坏死为主要病理改变；5-羟色胺参与脑震荡发生时脑组织损伤的病理过程，可能是脑震荡时脑损伤的重要原因之一。     

嗅鞘细胞移植对脊髓慢性压迫形态和脑源性神经营养因子表达的影响

背景：嗅鞘细胞是介于星形胶质细胞和许旺细胞之间的一类特殊的胶质细胞,具有切实有效的促进神经再生修复的作用,但其相关机制还没确定。 目的：观察嗅球成鞘细胞移植对脊髓慢性压迫损伤后脊髓功能形态和脑源性神经营养因子的影响,以及嗅鞘细胞移植后脊髓慢性压迫损伤动物脊髓功能的修复。 设计、时间及地点：对照动物实验，细胞学观察，于2005-11/2007-03在上海中医药大学脊柱病研究所完成。 材料：新生SD雄性大鼠采用酶消化法培养原代大鼠嗅鞘细胞，并将其制成细胞悬液。雄性3月龄SD大鼠以螺钉持续性压迫大鼠C4脊髓建立脊髓慢性压迫动物模型。 方法：造模后大鼠分为模型组、嗅鞘细胞组、DMEM/Ham’s F-12 培养液组、正常组，每组12只。嗅鞘细胞组在距离脊髓压迫区域上下0.5 mm处选4点注射,按1μL/点脊髓内注射109 L-1嗅鞘细胞，注入速度为1μL/ min。 主要观察指标：应用光学显微镜、电子显微镜观察脊髓形态的变化，采用免疫组织化学、PT-PCR 的方法检测脊髓组织脑源性神经营养因子的分泌，以改良的Gale联合行为评分法对脊髓功能进行评定， 结果：免疫组织化学检测显示，嗅鞘细胞移植能部分改善大鼠脊髓灰质神经细胞的凋亡程度，延缓白质神经纤维的减少，促进髓鞘的修复与再生。与模型组、DMEM/Ham’s F-12 培养液组比较， 嗅鞘细胞移植治疗后脊髓组织中脑源性神经营养因子表达明显增加（P < 0.01）。与模型组、DMEM/Ham’s F-12 培养液组比较，嗅鞘细胞移植能较大程度的改善大鼠脊髓功能（P < 0.05）。 结论：嗅鞘移植能够部分改善脊髓损伤后脊髓组织的病理形态，促进脊髓组织中脑源性神经营养因子的表达，减轻脊髓慢性压迫后的功能损害。     

高压氧对外源性人神经干细胞移植治疗损伤脑组织神经元病理状态的改善效应☆

目的：研究证明高压氧治疗能明显减轻缺氧后宿主脑区深部水肿，减少内源性神经元变性与坏死，并增加围产期鼠新生神经元数量与碱性成纤维生长因子活性。实验拟进一步观察缺氧缺血性脑损伤大鼠移植人神经干细胞后予高压氧治疗对脑组织神经元病理改变的影响。 方法：实验于2007-04在解放军海军总医院完成。①细胞来源及动物：经医院伦理委员会授权，孕妇知情同意下留取孕12周流产的人胎儿脑组织。新生7 d龄SD大鼠20只，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法：取胎儿脑组织，在无菌条件下培养扩增并制备成人神经干细胞单细胞悬液。20只大鼠均建立缺氧缺血性脑损伤模型，3只死亡，剩余鼠随机数字表法分为2组，细胞移植+高压氧组9只，单纯细胞移植组8只。造模后3 d，两组大鼠均于左侧侧脑室进行细胞移植，注射位点以前囟为参照点，AP= -1 mm，ML= -1.5 mm，DV= -4.0 mm，缓慢注入2×106 L-1细胞悬液5 μL。移植后1 h，将细胞移植+高压氧组大鼠放入高压氧舱内，给予高压氧通气，升压及降压过程各15 min，最终达压力为1.8个绝对大气压，稳压60 min，1次/d，连续10 d。两组大鼠麻醉后断头取脑，制备组织切片。③实验评估：免疫荧光法检测神经干细胞巢蛋白的表达、人神经干细胞植入后神经丝蛋白表达及其向神经元分化情况。尼氏染色检测移植后脑组织皮质、海马神经元形态、结构的变化。 结果：移植过程中细胞移植+高压氧组有1只鼠因麻醉死亡，高压氧通气过程中没有动物死亡。①人神经干细胞的鉴定：人胎儿脑组织体外培养12 d获取生长旺盛的人神经干细胞小集落，即神经球。倒置显微镜下观察可见每个小集落为数十个细胞构成，细胞折光性强，周边有清晰的光晕。免疫荧光标记大部分活细胞表达巢蛋白。②人神经干细胞植入后神经丝蛋白表达及其向神经元分化：植入后10 d，两组在皮质及海马区均可见神经丝蛋白阳性细胞，即植入细胞分化形成的神经元，其细胞形态与宿主内源性细胞相似。③神经元尼氏染色：两组大鼠均没有发现肿瘤形成。移植后10 d与单纯细胞移植组相比，细胞移植+高压氧组海马及皮质区组织细胞水肿程度明显减轻，且海马CA1区、CA3区、齿状回神经元排列更整齐，组织结构更完整。 结论：缺氧缺血性脑损伤新生大鼠移植人神经干细胞后，高压氧治疗可减轻损伤易感区组织细胞水肿程度，并使海马区神经元结构更加完整，推测有可能促进细胞的成活、迁移及分化。     

尼莫同对颅脑损伤后AQP4表达和血脑屏障通透性的影响

目的尼莫同对研究颅脑损伤后AQP4表达和血脑屏障（BBB）通透性的影响。方法健康成年Wistar大鼠50只，随机分成尼莫同组和生理盐水对照组。自由落体硬膜外撞击方法致重度脑创伤模型。在伤后6h、12h、24h、48h和72h每组各处死5只动物。取大鼠受损脑组织用于以下实验：①HE染色进行形态学观察；②免疫组化检测AQP4的表达变化；③测伤区脑组织中伊文氏蓝（EB）外渗的量，以反映伤侧BBB通透性的变化。结果颅脑损伤后，在尼莫同组和对照组损伤的脑组织均出现脑损伤的病理改变、AQP4表达上调、BBB通透性增加等改变，其变化趋势一致。颅脑损伤后6h、12h、24h、48h和72h，尼莫同组损伤脑组织EB外渗量明显多于对照组（P〈0．05）。结论尼莫同可以增加颅脑损伤后BBB通透性，加重脑损伤，但不影响受损脑组织AQP4的表达。     

L—精氨酸对家兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的影响研究

观察Ｌ－精氨酸在治疗实验家兔蛛网膜下腔出血后的病理生理变化。结果表明，ＳＡＨ模型制备成后一周，脑组织的含水Ｎａ＾＋量增加，同时脑基底动脉口径缩小，管腔横截面积减少，血管形态学检查提示的内皮细胞和平滑肌细胞损伤，用适量Ｌ－精氨酸治疗，能显著降低脑组织含水，Ｎａ＾＋的量，同时亦能明业扩大脑基底动脉口径，形态学检查提示血管内皮细胞及平滑肌细胞损伤有不同程度的减轻。     

高温高湿环境颅脑火器伤脑组织病理变化研究

目的研究高温高湿环境颅脑火器伤后脑组织病理学的改变,方法选用杂种狗6只,在高温高湿环境下采用国产54式军用手枪,7.62mm手枪弹,枪口距动物30 cm远,于狗额部冠状方向致狗脑火器伤。伤后脑组织大体病理及切片进行光、电镜下形态学变化观察。结果脑组织挫伤出血,神经毯疏松,神经胶质细胞肿胀,白质内大量轴索损伤;脑血管周围间隙明显增宽和脑内血管痉挛表现;皮层下细胞存在液化坏死,皮层细胞空泡变性及坏死;外伤性蛛网膜下腔出血。结论高温高湿环境颅脑火器伤白质内轴突损伤严重,除原发伤道区、挫伤区和震荡区外,枪伤可引起皮层神经细胞的反弹性损害和皮层下组织细胞的挤压性破坏。     

脑出血后IGF-1在脑组织中的表达及其对细胞凋亡的影响

目的研究胰岛素样生长因子-1（IGF-1）在实验性大鼠脑出血后脑组织中的表达厦其对细胞凋亡的影响。方法应用立体定向技术，将自体未抗凝血注入大鼠基底节区以制备脑出血模型；将动物分为正常对照组、实验组厦干预组，分别在不同时间断头取脑以制作标本，连续切片分别作IGF-1阳性细胞免疫组化染色及TUNEL染色。结果脑出血后2h血肿周围脑组织表达IGF-1，24h达表达高峰，7d时恢复正常；TUNEL染色阳性细胞于脑出血后8h开始出现，3d时达高峰，7d时仍有表达；给予外源性IGF-1后，凋亡细胞显著减少，与同时点实验组相比，差别有显著性。结论脑出血后IGF-1可抑制细胞凋亡的发生，从而减轻脑出血后继发性脑损伤。     

细胞移植治疗中枢神经系统脱髓鞘疾病的进展

中枢神经系统脱髓鞘是多发性硬化、脑自质营养不良及脊髓损伤的主要病理改变,导致神经系统功能缺失。动物实验中,将神经系统参与髓鞘形成的细胞植入脱髓鞘部位,取得了一定的冶疗效果。目前用于移植的细胞主要有少突胶质细胞前体细胞、雪旺细胞、嗅球成髓鞘细胞等。随着近年来对神经干细胞研究的不断深入,少突胶质细胞前体细胞被认为是最有前途的供体细胞。不足之处在于对于成年慢性脱髓鞘动物模型移植后的复髓鞘程度的定量描述非常有限,有待于进一步研究。     

颅脑损伤程度对大鼠脑血流及氧代谢的影响

目的 对颅脑损伤影响脑血流及氧代谢进行前瞻性研究。方法 30只Wistar大白鼠分成3组：颅脑损伤1组（TBI1）、2组（TBI2）及3组（TBI3）各10只，分别为轻、中、重型颅脑损伤。用脑阻抗（REG）测定脑血流量，颈内静脉血氧饱和度（SjVO2)反映全脑氧代谢情况。结果 TBI、TBI2及TBI3组影响脑血流和氧代谢程度依次为TBI3＞TBI2＞TBI1，健侧脑组织含水量各组无明显差异，伤侧脑组织含水量TBI3组最多，其次为TBI2，明显高于TBI1组（P＜0．01）。结论 颅脑损伤后脑血流和氧代谢变化取决于损伤程度，脑血流和氧代谢各参数的监测对正确认识脑组织病理生理变化，指导临床治疗，判断预后有重要价值。     

首乌延寿丹对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的研究首乌延寿丹对大鼠局灶性脑缺血的保护机制。方法采用改良的线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO)。将健康成年大鼠随机分为5组:假手术组、缺血模型组、缺血前首乌延寿丹低、中、高处理组。测定丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT),并进行病理组织学检查。结果首乌延寿丹能明显提高缺血脑组织中SOD、CAT活性,降低MDA含量,减轻脑水肿,首乌延寿丹能改善脑缺血造成的大鼠脑组织损伤。结论首乌延寿丹对大鼠局灶性脑缺血有明显的保护作用,其机制可能是通过有效的拮抗自由基损伤,提高脑组织抗氧化能力来实现的。     

3D打印引导下外伤性脑内血肿微创穿刺引流术

目的通过3D打印技术打印出符合患者面部特征并带有穿刺通道的模型,用于术前定位、术中引导穿刺方向,简化手术过程,提高外伤性颅内血肿穿刺准确性。 方法以1例25岁男性的外伤性脑内血肿颅脑CT二维图像为原始数据,利用Mimics 16.0软件处理,重建形成三维图像,设计穿刺通道,测量穿刺深度,通过3D打印机打印出带有穿刺针颅外段孔道的模型,术前置于术区定位,术中通过穿刺孔道置入引流管,控制穿刺深度,术后复查颅脑CT观察引流管末端位置。 结果在利用计算机软件设计带有穿刺针孔道的"面具"时可在三维空间任意旋转,从各个角度观察,避开重要血管及功能区,达到预定穿刺部位。 结论成功构建符合患者个体特征的三维图像,通过3D打印机将模型打印出来用于手术,可提高穿刺准确性,降低手术难度。     

雌激素对脑缺血病理及超微结构的影响

目的：通过观察雌激素对去卵巢雌性大鼠局灶性脑缺血大脑皮质区病理及超微结构的影响，以探讨雌激素对缺血性脑损害的神经保护作用。方法：采用大鼠大脑中动脉闭塞制成局灶性脑缺血模型，在缺血２小时，再灌注２２小时后立即断头取脑，切片，用光镜（定性和定量）和电镜观察大脑皮质区的病理学变化及超微结构改变。结果：雌激素用药组较对照组正常神经细胞的密度显著增加（Ｐ〈０．０５），血管内皮细胞受损程度减轻。结论：雌激素可     

高压氧预适应对大鼠高原颅脑损伤的作用研究

目的探讨高压氧（HBO）预适应对高原颅脑损伤（TBI）的神经保护作用。方法将78只SD大鼠随机分为平原组、高原组和高压氧预适应组，各组按Feeney自由落体撞击法制作TBI模型，并通过低压氧舱模拟高原环境。采用Longa评分法进行神经功能缺损评分，Moor DRT4激光多普勒血流监测仪和LICOX CMP组织氧分压监测仪分别监测伤区局部脑血流（rCBF）和局部脑组织氧分压（PbtiO2）变化，利用光镜观察伤区脑组织的病理学改变。结果伤后24h高原组较平原组神经功能缺损评分上升。rCBF和PbtiO2下降，病理损伤加重；高压氧预适应组较高原组神经功能缺损评分下降（P〈0.05），rCBF和PbtiO2升高（均为P〈0.05）病理损伤减轻。结论高压氧预适应可诱导对高原颅脑损伤的神经保护作用改善神经功能。     

潘恩点穿刺在经翼点手术中的应用

目的探讨经翼点手术中行侧脑室穿刺的方法和操作技巧。方法回顾性分析总结昆明医科大学第二附属医院神经外科2013年1月至2015年6月期间16例经翼点手术中采用潘恩点(paine point)穿刺侧脑室的操作方法和手术疗效。结果 16例患者侧脑室均穿刺成功,术中脑组织塌陷良好,为显微手术操作获得空间,术后给予持续引流脑脊液,能明显改善临床症状,缓解脑积水。结论潘恩点穿刺简便易行,在经翼点手术中发挥重要作用。     

Early changes of experimentally induced cerebral aneurysms in rats: scanning electron microscopic study

To obtain information about the early changes of experimentally induced cerebral aneurysms in rats, the luminal surface of branching areas of their cerebral arteries was examined with a scanning electron microscope. At the branching sites of major cerebral arteries in the control animals, the intima just distal to the apex markedly protruded into the lumen forming a linear bank-like intimal pad. Along and distal to this pad, there was a shallow long groove (juxta-apical groove). Such grooves were much deeper and wider in experimental animals than those in the control rats. By studying various stages of early aneurysmal changes, cerebral aneurysms were proven to develop from such grooves. In deep juxta-apical grooves and small aneurysms, round regenerated endothelial cells with a large number of microvilli were diffusely present. Degenerated cells with balloons and craters were observed intermingled with such regenerated cells. Interendothelial gaps were also seen. The present study showed the complex structure of the apex of arterial bifurcation in rats, including bank-like intimal pads. Such complex structures of the branching sites were considered to be responsible for the initiation of cerebral aneurysms due to endothelial injury possibly caused by turbulent flow there.     

脑出血大鼠锥体束显微和超微结构改变

目的研究脑出血大鼠锥体束病理变化规律及特点。方法使用Ⅳ型胶原酶．肝素诱导大鼠基底节脑出血,采用劳克坚牢蓝（LFB）染色、神经丝蛋白（NF）免疫组化和电镜对内囊后肢进行观察。结果Ⅳ型胶原酶-肝素能成功建立具有典型神经功能缺损的大鼠脑出血模型。光镜发现锥体束髓鞘损伤在脑出血1～3d逐渐加重,7d开始再生修复,1～7d轴突损伤持续加重,14d轴突光度值（0．09±0．01）有所增加,但与7d（0．10±0．02）相比无显著性差异（P〉0．05）。电镜显示脑出血1d锥体束髓鞘松解,轴突水肿,部分无髓轴突崩解坏死消失,3d髓鞘松解、空泡样变性,局部髓鞘消失、厚薄不均,轴突水肿严重,甚至坏死崩解。结论大鼠脑出血后1w内锥体束损伤呈进行性加重,提示应早期和超早期予以干预治疗以减轻损伤和促进修复。     

Effect of difluoromethylornithine on reperfusion injury after temporary middle cerebral artery occlusion.

Polyamines have been shown to play an important role in the disturbance of the blood-brain barrier (BBB) in a number of pathological states including ischemia. BBB disturbances may be almost completely prevented by treating animals with the ornithine decarboxylase (ODC) inhibitor, alpha-difluoromethylornithine (DFMO). DFMO has been also shown to prevent N-Methyl-D-aspartate (NMDA) toxicity in tissue cultures. It has been suggested that the pathological disturbances in polyamine metabolism observed following cerebral ischemia, particularly the post-ischemic increase in putrescine, may contribute to the ischemic injury that is most evident in the CA1 subfield of the hippocampus. In this study, effects of DFMO in cerebral ischemia and reperfusion were examined. The results showed that inhibition of the polyamine system by DFMO decreased ischemic injury volume and brain tissue water content in a dose-dependent manner, without change in vital signs, including systemic arterial blood pressure, arterial partial oxygen pressure, regional cerebral blood flow and body temperature.     

胶质瘤与锥体束交界区脑白质超微结构定点观察

目的观察胶质瘤瘤周脑白质神经纤维的超微结构，为研究神经纤维束功能保护提供组织学依据。方法对8例功能区胶质瘤，术前行扩散张量成像（DTI），标记锥体束与肿瘤交界区的神经影像兴趣区，利用神经导航系统中扩散张量成像一纤维束示踪（DTI-FT）图像、脑穿刺留置着色明胶海绵矫正脑漂移技术、直接电刺激技术等，定点采集影像兴趣区标本，进行常规透射电镜观察。结果成功定点采集标本13块，术后患者运动功能均保持术前状态或改善。胶质瘤周边脑白质内有髓神经纤维存在三类超微结构改变：单纯髓鞘病理改变、单纯轴索病理改变及髓鞘．轴索共同病变。结论针对术前神经影像兴趣区，定点留取大脑半球内手术病理标本的方法，为研究神经影像信号与手术神经病理间关系提供了重要方法。轴索变性、坏死是肿瘤周边脑白质功能障碍的重要原因，而仅有髓鞘病变的有髓神经纤维是术后神经功能改善的基础。