慢病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞

背景：原代细胞的转染效率低下一直是制约其发展的主要因素之一,慢病毒转染以其独特的优势成为各种干细胞基因修饰良好的转染方法。目的：验证慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞的可行性。方法：将携带增强型绿色荧光蛋白基因的慢病毒在含血清或无血清条件下按不同的MOI值分别转染人骨髓基质细胞,长期观察荧光蛋白表达情况。将经修饰的细胞通过立体定向移植入大鼠纹状体内,观察移植细胞的存活及目的基因的表达情况。结果与结论：基因转染48h后,可见人骨髓基质细胞成功表达绿色荧光蛋白,无血清条件下的转染效率高于含血清条件下的转染效率,转染成功的细胞在体外持续培养2个月以上未见明显的荧光消减。转染后的细胞可在大鼠纹状体存活并持续表达绿色荧光蛋白2个月以上。提示慢病毒是一种高效的转染人骨髓基质细胞的载体,慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因转染可以作为人骨髓基质细胞的示踪标志用于体内移植研究。     

慢病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞***☆

背景：原代细胞的转染效率低下一直是制约其发展的主要因素之一,慢病毒转染以其独特的优势成为各种干细胞基因修饰良好的转染方法。 目的：验证慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞的可行性。 方法：将携带增强型绿色荧光蛋白基因的慢病毒在含血清或无血清条件下按不同的MOI值分别转染人骨髓基质细胞,长期观察荧光蛋白表达情况。将经修饰的细胞通过立体定向移植入大鼠纹状体内,观察移植细胞的存活及目的基因的表达情况。 结果与结论：基因转染48 h后,可见人骨髓基质细胞成功表达绿色荧光蛋白,无血清条件下的转染效率高于含血清条件下的转染效率,转染成功的细胞在体外持续培养2个月以上未见明显的荧光消减。转染后的细胞可在大鼠纹状体存活并持续表达绿色荧光蛋白2个月以上。提示慢病毒是一种高效的转染人骨髓基质细胞的载体,慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因转染可以作为人骨髓基质细胞的示踪标志用于体内移植研究。     

CatWalk步态分析系统分析大鼠大脑中动脉阻塞模型的行为学特征

目的 探讨以CatWalk步态分析系统对大鼠暂时性大脑中动脉阻塞(MCAO)模型进行行为学评价的可行性.方法 30只SD雄性大鼠按随机数字表法分为MCAO模型组和对照组,其中模型组以线栓法制作成暂时性MCAO模型.分别于模型制作后第1、3、7、14、28天应用传统的18分制mNSS评分以及CatWalk步态分析系统对2组大鼠进行行为学特征分析.结果 CatWalk结果 显示MCAO模型组大鼠的四肢压强、接触面积和运行速度均比对照组大鼠减小减慢;在协调性方面,模型组大鼠造模后第3天时同为后侧的左后肢→右后肢的时间较对照组明显缩短,且其同为左侧的左前肢→左后肢的时间亦较对照组明显缩短,这一变化在第28天时仍然存在;在造模后第3天模型组出现了在对照组中并未见到的Ra型(1.5％)和Rb型(2.3％)步序;但步调、站立时间、抬爪时间和规律指数等参数在2组间差别不明显.结论 CatWalk步态分析系统在压强、速度、接触面积、步态以及协调性等方面可反映脑缺血造成的损伤及其随时间变化的过程,可用于动物模型的多种行为学特征的综合分析.     

慢病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞

背景:原代细胞的转染效率低下一直是制约其发展的主要因素之一,慢病毒转染以其独特的优势成为各种干细胞基因修饰良好的转染方法。目的:验证慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞的可行性。方法:将携带增强型绿色荧光蛋白基因的慢病毒在含血清或无血清条件下按不同的MOI值分别转染人骨髓基质细胞,长期观察荧光蛋白表达情况。将经修饰的细胞通过立体定向移植入大鼠纹状体内,观察移植细胞的存活及目的基因的表达情况。结果与结论:基因转染48h后,可见人骨髓基质细胞成功表达绿色荧光蛋白,无血清条件下的转染效率高于含血清条件下的转染效率,转染成功的细胞在体外持续培养2个月以上未见明显的荧光消减。转染后的细胞可在大鼠纹状体存活并持续表达绿色荧光蛋白2个月以上。提示慢病毒是一种高效的转染人骨髓基质细胞的载体,慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因转染可以作为人骨髓基质细胞的示踪标志用于体内移植研究。     

干细胞移植治疗缺血性脑损伤的策略

缺血性脑损伤在临床上占有重要的地位，干细胞移植是目前有可能实现对缺血坏死区结构与功能重建的方法之一。当前干细胞治疗缺血性脑损伤的主要策略有：激活脑内成体神经干细胞自身修复机制；外源干细胞脑内移植；基因修饰的干细胞脑内移植。作用机制上，重建神经环路并不总是功能恢复的首要条件。     

高温高湿环境下运动对战士血红蛋白的影响

本实验通过部队战士在高温高湿环境下进行野外跑步实验,测定运动前后战士红细胞比容的改变,分析3组战士的红细胞比容的改变差别,为战士今后训练提供指导,同时也为我们临床治疗脑外伤和脑出血后出现的高热提供依据。1　对象和方法1.1　对象　随机选择高温高湿环境下生活的南沙守礁战士90例,全部为男性,其中新战士6 0例,入伍2 a内,年龄16～2 2岁,随机分为两组,新战士组,平均年龄19.2 3岁,新战士服药组(口服乌拉地尔片剂,商品名:利喜定,西安利君制药厂生产,剂量30 mg/片) ,平均年龄19.86岁;老战士30例,入伍2 a以上,年龄2 2～2 8岁,平均年龄2 4 …     

高温高湿环境下运动前后人体相关生化指标的变化

目的：观察高温高湿环境下运动前后人体相关生化指标影响的改变情况，为运动训练提供指导及理论依据。方法：选取在高温高湿环境下生活了1年以上海军守礁健康男性战士90名，按年龄分成老战士组(n=30)和新战士组，其中新战士组随机分为新战士对照组(n=30)和新战士服药组(n=30)，在高温高湿环境下20min内跑步3000m，其中新战士服药组在运动前7h和3h口服乌拉地尔片剂(西安利君制药厂生产，30mg／片，批号：040321)30mg。测定跑步前后的血钾离子、钠离子、氯离子、尿素氮和血糖的改变。结果：3组战士运动后的钠离子[老战士组、新战士组和新战士服药组分别为(142，80&;#177;1.94)，(144，42&;#177;4.41)和(141．27&;#177;1，17)mmol／L]、氯离子水平[以上3组分别为(110．43&;#177;1．81)，(107．67&;#177;2，75)和(108，93&;#177;1.48)mmol／L]高于运动前，差异有显著性意义(t=-14，082～-4.230，P均&;lt;0．01)，而血钾离子、血糖与运动前比较，差异无显著性意义。结论：高温高湿环境对人体有关的生化指标影响较大，新老战士在此环境下出现的耐受和适应性不同，口服乌拉地尔片剂可以降低和减少运动前后的钠离子、氯离子水平。     

不同年龄大鼠组织端粒酶活性变化的研究

目的 了解不同组织端粒酶活性随年龄变化的规律，为治疗性克隆核供体细胞的选择提供依据。方法 采用PCR-ELISA法检测不同年龄SD大鼠皮肤、肌肉、骨髓、脑和睾丸组织的端粒酶活性。结果 (1)随着年龄的增长，各组织端粒酶活性均呈下降趋势；(2)新生皮肤、肌肉和脑组织表达端粒酶活性，一月后则不再表达端粒酶活性；(3)一月至二年骨髓和睾丸组织均保持较高端粒酶活性。结论 端粒酶活性表达程度与不同组织有关，骨髓和睾丸组织能维持较高端粒酶活性；骨髓组织中持续表达端粒酶活性的细胞可能足一种较好的核供体细胞。     

高温高湿环境下颅脑火器伤对犬肾脏组织的损害作用

目的研究高温高湿环境下,颅脑火器伤对犬肾脏组织的影响。方法选取杂种犬11只,随机分为高温高湿对照组5只和高温高湿颅脑枪伤组6只,枪伤组使用手枪弹致颅脑火器伤模型。检测体温、呼吸、心率改变,血浆电解质和血气分析及肾脏组织病理学检查。结果高温高湿环境下体温增高,心率、呼吸频率增快,出现低氧血症、低碳酸血症和低钾血症;伤后肾脏组织可见凝固性坏死灶,肾小管上皮细胞内囊泡形成,胞浆内见红染颗粒样变性,肾小管损伤表现。结论高温高湿环境颅脑火器伤对肾脏有病理性损害。