局部注射骨髓间充质干细胞治疗大鼠脊髓损伤：运动功能有改善吗？

背景：目前研究多为骨髓间充质干细胞的体外培养及细胞移植对颅内疾病的治疗,对植入细胞在损伤脊髓中的成活、分化、迁移、结构重建等了解有限。 目的：探讨局部骨髓间充质干细胞移植在脊髓损伤修复中的作用和骨髓间充质干细胞替代治疗的可行性。 方法：成年健康雌性SD大鼠随机分为细胞移植组和对照组,建立SD大鼠脊髓横断损伤模型,伤后即刻分别向损伤区局部移植大鼠骨髓间充质干细胞悬液或无钙镁磷酸缓冲液。在术前和术后1 d,1周,2周,3周,4周和8周进行BBB评分,观测大鼠的运动功能,并于移植后1周免疫组织化学染色法观察BrdU标记的骨髓间充质干细胞在脊髓损伤处的存活情况,移植后4周进行损伤脊髓的大体观察和组织学检测。 结果与结论：移植后第1~8周细胞移植组BBB评分均髙于对照组;术后1周免疫组织化学染色结果显示在细胞移植组大鼠脊髓远端检测到BrdU阳性细胞,术后4周脊髓损伤处发现有神经纤维。证实通过损伤后立即局部注射的方式将骨髓间充质干细胞移植进大鼠脊髓损伤区,细胞可在损伤区存活;存活的骨髓间充质干细胞可分化为神经元,在损伤局部形成神经元通路,从而促进脊髓神经纤维传导功能的恢复,并促进高位脊髓损伤后大鼠后肢运动功能恢复。     

骨髓间充质干细胞尾静脉移植脊髓损伤大鼠脑源性神经营养因子及神经生长因子的表达

背景：骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤有治疗作用,但其机制尚不完全清楚。 目的：应用免疫组织化学方法观察骨髓间充质干细胞静脉移植损伤脊髓局部脑源性神经营养因子及神经生长因子的表达,分析骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的作用途径。 方法：运用改良Allen法制备T10脊髓外伤性截瘫大鼠模型,假手术组6只,脊髓损伤组24只随机分为对照组和骨髓间充质干细胞移植组。骨髓间充质干细胞移植组、假手术组接受骨髓间充质干细胞单细胞悬液1 mL(1×106 cells)自大鼠尾静脉缓慢注射移植,对照组静脉注射PBS 1 mL。 结果与结论：脊髓损伤后损伤局部的脑源性神经营养因子、神经生长因子表达增加,骨髓间充质干细胞静脉注射移植后能促进脊髓损伤局部脑源性神经营养因子、神经生长因子更进一步的表达,这可能是促进神经结构及神经功能恢复的因素之一。     

注射用七叶皂苷钠联合脐带间充质干细胞移植改善脑梗死大鼠神经功能

背景：单纯的脐带间充质干细胞移植修复受损脑组织的作用并不十分理想。 目的：观察脐带间充质干细胞移植联合注射用七叶皂苷钠治疗大鼠脑梗死的效果。 方法：应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞模型,随机分为对照组、细胞移植组、七叶皂苷钠+ 细胞移植组,分别尾静脉注射细胞培养液、1×1010 L-1脐带间充质干细胞悬液、尾静脉1×1010 L-1脐带间充质干细胞悬液同时经腹腔注射七叶皂苷钠 5 mg/(kg•d),连续5 d。 结果与结论：移植后1周,七叶皂苷钠+细胞移植组大鼠神经功能障碍评分低于细胞移植组及对照组(P < 0.05);七叶皂苷钠+细胞移植组大鼠脑梗死周围组织AQP9 及AQP4 mRNA的表达低于细胞移植组,却高于对照组(P < 0.05);七叶皂苷钠+细胞移植组CM-Dil阳性细胞和神经元数量多于细胞移植组及对照组(P < 0.05)。提示脐带间充质干细胞移植联合注射用七叶皂苷钠治疗大鼠脑梗死可明显改善大鼠的神经功能。     

骨髓间充质干细胞移植联用氨基胍对大鼠脊髓损伤修复的影响*

背景：体内实验发现,骨髓间充质干细胞可在体内神经组织中分化为神经元样细胞,表达神经元抗原,并且骨髓间充质干细胞的存在对神经元的损伤有保护作用,这可能与骨髓间充质干细胞分泌的活性物质有关。 目的：观察骨髓间充质干细胞移植联用诱导型一氧化氮合酶抑制剂-氨基胍对大鼠脊髓损伤修复的影响。 设计、时间及地点： 随机对照动物实验,细胞学观察,于2006-07/2008-02在河北工程大学附属医院外科实验室和中心实验室完成。 材料：Wistar大鼠36只随机分成对照组、骨髓间充质干细胞组、联合移植组,每组12只。氨基胍由美国Sigma公司提供。 方法：采用密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,以Brdu标记细胞核。对照组：制备脊髓半切损伤模型不做处理。骨髓间充质干细胞组：制备脊髓半切损伤模型后,损伤上下各 1 mm处移植骨髓间充质干细胞悬液共2 μL。联合移植组：制备脊髓半切损伤模型后,损伤上下各 1 mm处移植骨髓间充质干细胞悬液8 μL,同时局部给予氨基胍100 mg/kg。 主要观察指标：术后采用斜板试验及改良Tarlov评分评价动物后肢运动功能恢复情况。术后2个月,显微镜下观察移植后脊髓形态结构变化及移植物存活情况。神经微丝和胶质原纤维酸性蛋白免疫组织化学评价移植对脊髓再生的影响。 结果：下肢运动功能评价联合移植组优于骨髓间充质干细胞组,骨髓间充质干细胞组优于对照组。免疫组织化学检测发现,脊髓损伤区有新生束状轴突伸向断端,嗜银染色可见脊髓断端的再生轴突长入断端间组织中,部分连接两端面。损伤阶段脊髓内可见Brdu标记阳性骨髓间充质干细胞存活,灰质分布较白质多,以注射部位向周围损伤组织迁移,联合应用氨基胍组Brdu标记阳性骨髓间充质干细胞存活多。联合移植组术后2个月神经微丝和胶质原纤维酸性蛋白免疫阳性反应的面积比均高于其他各组。 结论：骨髓间充质干细胞联合氨基胍移植促进大鼠半横断脊髓结构和功能恢复的效果明显优于单纯细胞移植组,两者联用具有协同效应。     

移植人脐带间充质干细胞修复大鼠脊髓损伤

背景：已知人脐带间充质干细胞对脊髓损伤存在着潜在的治疗价值,然而,当前对移植人脐带间充质干细胞治疗脊髓损伤及机制方面研究很少。 目的：观察人脐带间充质干细胞对脊髓损伤大鼠的治疗效果。 方法：40只Wistar大鼠建立脊髓损伤模型,38只造模成功后随机摸球法分为3组：空白对照组：只接受单纯损伤,不做任何移植;DMEM移植组：损伤后1周予以5 μL DMEM局部移植;细胞移植组：损伤后1周予以5 μL准备好的人脐带间充质干细胞局部移植(细胞数1×106)。移植后对实验动物通过BBB评分、体感诱发电位与运动诱发电位观察后肢功能恢复情况。分别于损伤后2,4,6,8,10周随机于细胞移植组抽取大鼠2只,免疫组织化学染色观察人脐带间充质干细胞存活、迁移、分化,通过胶质纤维酸性蛋白阳性细胞染色比较各组损伤局部胶质瘢痕形成面积。 结果与结论：BBB评分损伤后4周细胞移植组高于其他两组(P < 0.05),损伤后12周细胞移植组与其他两组相比SEP、MEP潜伏期缩短、波幅值增高(P < 0.05)。免疫组织化学染色示人脐带间充质干细胞可向神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化,分化的少突胶质细胞并包绕轴突形成髓鞘。细胞移植组损伤局部胶质瘢痕面积均小于其他两组(P < 0.05),空白对照组、DMEM移植组间差异无显著性(P > 0.05)。提示未经体外诱导的人脐带间充质干细胞可于损伤大鼠脊髓体内向神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞分化,减小胶质瘢痕,并促进脊髓损伤大鼠神经功能的恢复。     

异体骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤

背景：脊髓损伤的修复目前尚无良好的治疗手段,细胞移植能促进神经轴突再生及脊髓功能恢复,为治疗脊髓损伤提供了可能,但因脊髓损伤模型及移植方式不同,其治疗效果并不相同。 目的：验证异体骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤的治疗作用。 方法：全骨髓贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞。健康SD大鼠随机分为3组,细胞移植组、对照组和假手术组。细胞移植组和对照组采用改良Allen重物打击法制造大鼠脊髓损伤模型,假手术组仅暴露脊髓。术后4周,每周进行运动功能评分,ELISA检测脊髓损伤组织中脑源性神经营养因子、神经生长因子表达;免疫荧光染色检测脊髓组织中NF200和胶质纤维酸性蛋白表达。 结果与结论：与对照组比较,细胞移植组大鼠运动功能明显改善,脊髓组织中脑源性神经营养因子、神经生长因子蛋白含量明显增高(P < 0.05);移植组大鼠脊髓囊腔较小,NF200表达明显增加,胶质纤维酸性蛋白表达减少。提示异体骨髓间充质干细胞移植能增加损伤脊髓神经生长因子含量,抑制胶质瘢痕形成,促进神经轴突再生,改善大鼠脊髓损伤后运动功能恢复。     

法舒地尔与骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤：有协同效应吗？

背景：研究证实，Rho激酶抑制剂法舒地尔可以有效阻断继发性脊髓损伤过程。 目的：观察法舒地尔对骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤大鼠运动功能恢复的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2008-11/2009-03在天津医科大学内分泌研究所完成。 材料：1月龄SD大鼠1只，用于分离制备骨髓间充质干细胞。健康雌性SD大鼠30只，用于建立脊髓损伤动物模型，随机分成单纯损伤组、细胞移植组、细胞移植+法舒地尔组，10只/组。法舒地尔为天津红日药业公司产品。 方法：造模1周后，细胞移植组、细胞移植+法舒地尔组大鼠显露脊髓损伤区域，注入10 μL骨髓间充质干细胞悬液。此外，细胞移植+法舒地尔组6 h后开始腹腔注射10 mg/kg法舒地尔，2次/d，连续用药1周。 主要观察指标：斜板实验检测后肢运动功能，病理切片苏木精-伊红染色结果，HRP逆行神经示踪，Western-Blot法检测脊髓组织Phospho-ERM蛋白的表达。 结果：①造模后8周，与单纯损伤组比较，细胞移植组及细胞移植+法舒地尔组大鼠斜板试验角度均显著增加(P < 0.05， P < 0.01)，且后者增加幅度明显大于前者(P < 0.05)。②单纯损伤组损伤处脊髓组织断裂，有明显空洞形成；细胞移植组、细胞移植+法舒地尔组可见少量神经轴索样结构，但细胞移植组的组织空洞大于细胞移植+法舒地尔组。③单纯损伤组至T8以上节段可见较少的HRP阳性颗粒标记的神经纤维；细胞移植组HRP阳性神经纤维数居中；细胞移植+法舒地尔组可见较多HRP阳性颗粒标记的神经纤维。④单纯损伤组、细胞移植组脊髓细胞Phospho-ERM蛋白的表达均明显高于细胞移植+法舒地尔组(P < 0.05)。 结论：骨髓间质干细胞移植对于脊髓损伤大鼠后肢运动功能的恢复有促进作用，联合应用法舒地尔可产生协同效果。     

静脉移植CXCR-4基因转染骨髓间充质干细胞在脊髓损伤鼠体内的迁移与分化

背景：研究发现,基质细胞衍生因子1/CXCR-4轴具有介导骨髓间充质干细胞定向迁移的作用。 目的：观察静脉移植CXCR-4基因转染间充质干细胞治疗脊髓损伤的可行性。 方法：利用脊髓横切法构建C57BL/6小鼠T10脊髓损伤模型,造模后7 d抽签随机分成3组：实验组经尾静脉注射CXCR-4基因转染同种异体骨髓间充质干细胞悬液,对照组与空白对照组分别注射同种异体骨髓间充质干细胞悬液及无细胞培养基。移植后第7,14,21,28天利用激光共聚焦显微镜、免疫组织化学双标染色法检测脊髓损伤部位绿色荧光蛋白阳性细胞迁移存活及分化情况,并采用BBB评分评估小鼠神经运动功能恢复情况。 结果与结论：实验组移植后各时相点损伤灶内绿色荧光蛋白阳性细胞集聚明显,数量不断增多,迁移率明显高于对照组与空白对照组,来源于骨髓间充质干细胞的神经细胞占移植细胞的比例亦高于对照组与空白对照组,小鼠神经运动功能恢复明显。说明静脉移植CXCR-4基因转染的骨髓间充质干细胞表现出对脊髓损伤灶更强的定向迁移能力,且能在损伤灶内存活、分化,发挥修复损伤脊髓作用。     

骨髓间充质干细胞修复损伤脊髓的实验及临床应用短期随访

背景：骨髓间充质干细胞治疗脊髓损伤的研究已经逐渐由动物实验过渡到临床,但其作用机制还不完全清楚。 目的：观察骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤大鼠脊髓功能的修复作用,并通过临床应用观察短期疗效。 方法：采用改良Allen's打击法造成Wistar大鼠脊髓损伤模型,将体外分离培养的骨髓间充质干细胞分别经尾静脉及损伤局部移植,应用改良Tarlov评分评定大鼠行为学变化,在光镜下对损伤脊髓病理切片进行对比分析。对5例脊髓损伤患者通过损伤原位注射、腰穿、静脉输注的方式行人自体骨髓间充质干细胞移植,并行神经功能及生活能力评定。 结果与结论：治疗后15 d,骨髓间充质干细胞尾静脉及损伤局部移植组大鼠运动功能评分较模型对照组显著提高;移植后7,15,30 d,脊髓病理切片显示骨髓间充质干细胞尾静脉及损伤局部移植组大鼠较模型对照组有显著恢复。临床患者骨髓间充质干细胞移植后半年神经功能及生活能力均有改善。     

骨髓间充质干细胞不同移植途径治疗大鼠脊髓损伤的比较

背景：在适当的生长环境下，中枢神经系统内的一些受损的神经元轴突有少许再生，并能与靶细胞形成功能性的突触联系。 目的：比较局部注射和尾静脉注射途径移植骨髓间充质干细胞对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的作用。 设计、时间及地点：细胞组织学对照观察，于2007-03/2008-04在承德医学院完成。 材料：健康成年雄性SD大鼠40只，由解放军军事医学科学院动物中心（北京）提供。 方法：取4只大鼠，采用密度梯度离心法和贴壁法体外分离培养骨髓间充质干细胞，传至第2代于临用前24 h行BrdU标记。余36只大鼠均建立T12脊髓损伤模型，1周后随机分为3组，局部注射组于损伤部位上下位点注射1×106个骨髓间充质干细胞至损伤大鼠体内；尾静脉注射组通过尾静脉移植等量骨髓间充质干细胞至损伤大鼠体内；模型对照组不行细胞移植。 主要观察指标：神经功能缺损BBB评分，苏木精-伊红染色病理学检测，细胞分化免疫组化染色结果。 结果：细胞移植后2，4，6周，模型对照组神经功能缺损BBB评分均显著低于局部注射组、尾静脉注射组（F=721.373，F=1 114.450，F=1 004.099，P均 < 0.01）；局部注射组神经功能缺损BBB评分均显著高于尾静脉注射组（t=55.261，t=71.385，t=78.135，P均 < 0.01）。苏木精-伊红染色结果显示，模型对照组损伤脊髓组织有较多空腔，横断处形成大量空泡；局部注射组无明显空腔，空泡小而少，间质水肿较轻。移植后4，6周，部分植入的骨髓间充质干细胞呈微管相关蛋白2及胶质纤维酸性蛋白双阳性表达。 结论：局部注射和尾静脉注射两种途径移植的骨髓间充质干细胞均可在脊髓损伤处存活、分化并改善神经功能，且局部注射的效果优于尾静脉注射。     

Effect of intravenous transplantation of bone marrow mesenchymal stem cells on neurotransmitters and synapsins in rats with spinal cord injury

Bone marrow mesenchymal stem cells were isolated, purified and cultured in vitro by Percoll density gradient centrifugation combined with the cell adherence method. Passages 3-5 bone marrow mesenchymal stem cells were transplanted into rats with traumatic spinal cord injury via the caudal vein. Basso-Beattie-Bresnahan scores indicate that neurological function of experimental rats was significantly improved over transplantation time (1-5 weeks). Expressions of choline acetyltransferase, glutamic acid decarboxylase and synapsins in the damaged spinal cord of rats was significantly increased after transplantation, determined by immunofluorescence staining and laser confocal scanning microscopy. Bone marrow mesenchymal stem cells that had migrated into the damaged area of rats in the experimental group began to express choline acetyltransferase, glutamic acid decarboxylase and synapsins, 3 weeks after transplantation. The Basso-Beattie- Bresnahan scores positively correlated with expression of choline acetyltransferase and synapsins. Experimental findings indicate that intravenously transplanted bone marrow mesenchymal stem cells traverse into the damaged spinal cord of rats, promote expression of choline acetyltransferase, glutamic acid decarboxylase and synapsins, and improve nerve function in rats with spinal cord injury.     

骨髓间充质干细胞立体定向移植治疗大鼠脊髓损伤*

摘要 背景：传统观念认为,神经组织损伤后几乎不能再生,以往对SCI的治疗缺乏有效手段,致使本病致残率高,疗效差。干细胞治疗关键在于移植具有再生能力的干细胞,通过多种作用机制,可以重建中枢神经系统的结构和功能,近年来引起了广泛的关注。 目的：探讨立体定向移植骨髓间充质干细胞（MSCs）对大鼠脊髓损伤修复的影响并探讨其机制 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-10/2008-6在天津市环湖医院完成。 材料：1月龄SD大鼠20只,用于制备骨髓间充质干细胞;健康成年Wistar大鼠45只,雌性、同系,体质量280±20 g。将动物随机分为对照组、假手术组与移植组,每组各15只。 方法：密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离骨髓间充质干细胞,经流式细胞仪鉴定为MSCs。以动脉瘤夹夹闭法制备大鼠脊髓损伤（SCI）模型,在SCI大鼠致伤后第7天,通过立体定向途径移植MSCs到移植组大鼠脊髓损伤中心,移植等量生理盐水至假手术组大鼠脊髓损伤中心,对照组大鼠不做处理。 主要观察指标：SCI大鼠损伤前及损伤后第7天、14天、30天、60天、90天的BBB评分;损伤后第90天处死大鼠,观察其脊髓组织中有无BrdU阳性细胞、Brdu+NSE、Brdu+GFAP、Brdu+bFGF、Brdu+BDNF免疫组化双染阳性细胞并观察NSE、GFAP、bFGF、BDNF单染阳性细胞。 结果： ①BBB评分发现,MSCs移植组大鼠BBB后肢功能评分恢复优于对照组（p<0.05）;假手术组BBB评分在损伤后30天内恢复速度慢于对照组（p<0.05）,至第90天与对照组比较无显著差异（P>0.05）;②免疫组织化学染色发现,移植组大鼠脊髓内在损伤中心及头、尾端距离脊髓损伤中心1cm处均可见BrdU染色阳性细胞及Brdu+NSE、Brdu+GFAP、Brdu+bFGF、Brdu+BDNF免疫组化双染阳性细胞。移植组NSE、GFAP、bFGF、BDNF单染阳性细胞数明显高于对照组和假手术组（p<0.05）。 结论： MSCs移植可以促进SCI大鼠的神经功能的恢复,其机制可能与移植细胞分化为神经元样和神经胶质细胞样细胞,并分泌或促进宿主分泌神经营养因子有关。 关键词 脊髓损伤 骨髓间充质干细胞 立体定向 细胞移植     

Propofol promotes spinal cord injury repair by bone marrow mesenchymal stem cell transplantation

Propofol is a neuroprotective anesthetic. Whether propofol can promote spinal cord injury repair by bone marrow mesenchymal stem cells remains poorly understood. We used rats to investigate spinal cord injury repair using bone marrow mesenchymal stem cell transplantation combined with propofol administration via the tail vein. Rat spinal cord injury was clearly alleviated; a large number of newborn non-myelinated and myelinated nerve fibers appeared in the spinal cord, the numbers of CM-Dil-labeled bone marrow mesenchymal stem cells and fluorogold-labeled nerve fibers were increased and hindlimb motor function of spinal cord-injured rats was markedly improved. These improvements were more prominent in rats subjected to bone marrow mesenchymal cell transplantation combined with propofol administration than in rats receiving monotherapy. These results indicate that propofol can enhance the therapeutic effects of bone marrow mesenchymal stem cell transplantation on spinal cord injury in rats.     

Propofol injection combined with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation better improves electrophysiological function in the hindlimb of rats with spinal cord injury than monotherapy

The repair effects of bone marrow mesenchymal stem cell transplantation on nervous system damage are not satisfactory. Propofol has been shown to protect against spinal cord injury. Therefore, this study sought to explore the therapeutic effects of their combination on spinal cord injury. Rat models of spinal cord injury were established using the weight drop method. Rats were subjected to bone marrow mesenchymal stem cell transplantation via tail vein injection and/or propofol injection via tail vein using an infusion pump. Four weeks after cell transplantation and/or propofol treatment, the cavity within the spinal cord was reduced. The numbers of PKH-26-positive cells and horseradish peroxidase-positive nerve fibers apparently increased in the spinal cord. Latencies of somatosensory evoked potentials and motor evoked potentials in the hindlimb were noticeably shortened, amplitude was increased and hindlimb motor function was obviously improved. Moreover, the combined effects were better than cell transplantation or propofol injection alone. The above data suggest that the combination of propofol injection and bone marrow mesenchymal stem cell transplantation can effectively improve hindlimb electrophysiological function, promote the recovery of motor funtion, and play a neuroprotective role in spinal cord injury in rats.     

大鼠骨髓间充质干细胞静脉移植对脊髓损伤的修复作用

目的初步探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）静脉移植对脊髓损伤后神经功能恢复和神经修复的影响。方法体外培养BMSCs，改良Allen法制备大鼠脊髓损伤模型，经尾静脉移植Brdu标记的BMSCs，损伤后24h、移植后1、3、5周评价实验动物的神经功能状况，并检测BMSCs在体内迁移、存活以及分化情况，电子显微镜观察组织形态学变化。结果移植的BMSCs在宿主损伤脊髓中聚集并存活，3～5周后有部分移植细胞表达神经元特异性烯醇化酶（NSE）、神经丝蛋白（NF）、微管相关蛋白（MAP2）；BMSCs静脉移植组大鼠运动功能改善，BBB评分高于对照组（P〈0．05）；5周后组织学观察，与对照组相比移植组损伤区脊髓结构较完整。结论BMSCs经静脉移植后可向脊髓损伤处聚集并存活分化，促进神经修复及神经功能的恢复。     

Human adipose tissue- and umbilical cord-derived stem cells: which is a better alternative to treat spinal cord injury?

Multiple types of stem cells have been proposed for the treatment of spinal cord injury, but their comparative information remains elusive. In this study, a rat model of T10 contusion spinal cord injury was established by the impactor method. Human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells(UCMSCs) or human adipose tissue-derived mesenchymal stem cells(ADMSCs)(2.5 μL/injection site, 1 × 10~5 cells/μL) was injected on rostral and caudal of the injury segment on the ninth day after injury. Rats injected with mesenchymal stem cell culture medium were used as controls. Our results show that although transplanted UCMSCs and ADMSCs failed to differentiate into neurons or glial cells in vivo, both significantly improved motor and sensory function. After spinal cord injury, UCMSCs and ADMSCs similarly promoted spinal neuron survival and axonal regeneration, decreased glial scar and lesion cavity formation, and reduced numbers of active macrophages. BioPlex analysis of spinal samples showed a specific increase of interleukin-10 and decrease of tumor necrosis factor α in the ADMSC group, as well as a downregulation of macrophage inflammatory protein 3α in both UCMSC and ADMSC groups at 3 days after cell transplantation. Upregulation of interleukin-10 and interleukin-13 was observed in both UCMSC and ADMSC groups at 7 days after cell transplantation. Isobaric tagging for relative and absolute quantitation proteomics analyses showed that UCMSCs and ADMSCs induced changes of multiple genes related to axonal regeneration, neurotrophy, and cell apoptosis in common and specific manners. In conclusion, UCMSC and ADMSC transplants yielded quite similar contributions to motor and sensory recovery after spinal cord injury via anti-inflammation and improved axonal growth. However, there were some differences in cytokine and gene expression induced by these two types of transplanted cells. Animal experiments were approved by the Laboratory Animal Ethics Committee at Jinan University(approval No. 20180228026) on February 28, 2018, and the application of human stem cells was approved by the Medical Ethics Committee of Medical College of Jinan University of China(approval No. 2016041303) on April 13, 2016.     

不同来源成体神经干细胞促进大鼠脊髓损伤功能修复的比较研究

目的 评价大脑、骨髓和脂肪组织3种不同来源的神经干细胞对大鼠脊髓挫伤的治疗效果.方法 选取来源于同一大鼠成体中大脑、骨髓和脂肪的3个部位的组织,分离、诱导分化为不同来源的神经干细胞;应用自由落体损伤模型装置造成大鼠脊髓挫伤.将不同来源的神经干细胞分别移植入大鼠脊髓损伤部位,通过BBB评分比较修复脊髓损伤功能的效果,应用免疫荧光染色检测不同移植细胞在损伤脊髓中的存活、分布、迁移的情况.另设假手术对照组和生理盐水对照组.结果 与假手术对照组和生理盐水对照组比较,3个细胞处理组BBB评分在2～8周开始增加,9周以后更加明显,差异开始有统计学意义(P<0.05).在移植后1周和4周,细胞移植组中脑源性神经干细胞(SVZ-NSs)组Brdu/nestin+>神经元存活的数目明显高于其他2组.但差异没有统计学意义(P>0.05);到了第8周,3组均仅有少量Brdu/nestin+>细胞存活,相互之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 植入来源于大脑、骨髓和脂肪组织的神经干细胞都可以在一定程度上提高脊髓损伤后运动功能恢复,但SVZ-NSs组的脊髓损伤大鼠运动功能恢复要比脂肪来源的神经干细胞(AD-NSs)组及骨髓来源的神经干细胞(BM-NSs)组更好.AD-NSs由于来源广泛和强有力的增殖能力,相比其他来源的神经干细胞,可能是更好的选择.     

氯化锂对脊髓损伤大鼠内源性神经干细胞的影响

背景：对于脊髓损伤的治疗,移植外源性神经干细胞仍面临着诸多难题,因此激活内源性神经干细胞的“补充治疗”策略成为近来研究热点。已发现氯化锂可以明显抑制神经干细胞的分化而促进其增殖,其效应与Wnt信号通路有关。 目的：探讨氯化锂对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-03/08在珠江医院中心实验室进行。 材料：Wistar成年雌性大鼠55只,分为3组：正常对照组5只、单纯损伤组25只、氯化锂治疗组25只。氯化锂为广州光华化学试剂厂产品。 方法：单纯损伤组、氯化锂治疗组大鼠采用经典Allens重物坠落法在T10段制作急性脊髓损伤模型。从造模后1 h开始,氯化锂治疗组经腹腔注射氯化锂3 mmol/(kg•d),直至取材;单纯损伤组同法给予等量生理盐水;正常对照组不作任何处理。各组取材前24 h腹腔注射Brdu溶液进行标记,每8 h注射1次,共3次。对距离损伤中心5 mm处的脊髓进行Brdu、连环蛋白免疫组化检测。 主要观察指标：BrdU阳性细胞数及连环蛋白阳性表达面积。 结果：正常对照组脊髓中央管周围及外膜可见少量Brdu阳性细胞,几乎无连环蛋白阳性表达。单纯损伤组造模后24 h即可见大量Brdu阳性细胞及微量连环蛋白表达,1周时两者达到高峰,主要分布于损伤脊髓周围的灰质和室管膜区,2周后开始明显减少,4周时仅见少量Brdu阳性细胞及连环蛋白阳性表达。与单纯损伤组比较,造模后24 h氯化锂治疗组Brdu阳性细胞及连环蛋白的表达无显著性差异,1周时在中央管周围、外膜、灰质中Brdu阳性细胞数及连环蛋白表达量明显增多(P < 0.05),至2周时仍处于较高水平,4周时仍有大量Brdu阳性细胞及连环蛋白表达。 结论：脊髓损伤后氯化锂的应用可以明显提高损伤脊髓组织内连环蛋白的表达,伴随着连环蛋白浓度的提高及持续表达,促进内源性神经干细胞的增殖,其作用机制与Wnt信号通路有关。